学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

TLR2、TLR4及相关细胞因子在军团菌感染作用机制的实验研究

作　者: 王伟刚
导　师: 王素萍
学　校: 山西医科大学
专　业: 流行病与卫生统计学
关键词: TLR2 TLR4 军团菌感染小鼠
分类号: R563.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 44次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

目的①探索建立小鼠军团菌感染模型的条件。②初步阐明TLR2、TLR4在军团菌感染的作用机制,了解军团菌感染作用的分子靶点,为军团菌病的防治提供依据。③探讨相关细胞因子(IL-6、TNF-α)在小鼠军团菌感染中的作用。方法1.从北京维通利华实验动物技术有限公司购买80只6-7周SPF级BALB/C小鼠,每组8只,雌雄各半。其中40只小鼠采用鼻内接种50ul 1.2×109/ml军团菌菌悬液,作为染菌组,建立军团菌感染模型,军团菌菌悬液的浓度根据麦氏比浊管确定。另外40只小鼠鼻内接种50ul无菌生理盐水作为对照组,分别于12小时、1天、3天、5天、7天麻醉小鼠,摘取眼球取血,解剖小鼠。2.对染菌组和对照组的小鼠,分别于12小时、1天、3天、5天、7天处死,并进行下述研究:①取左肺上叶、肾脏、脾脏、肝脏少许,固定做病理切片。②采用Real-time RT PCR法测定小鼠肺组织中TLR2、TLR4、MyD88 mRNA的表达水平。③ELISA法检测小鼠肺组织匀浆液中细胞因子(IL-6、TNF-α)表达水平。3.采用SPSS16.0统计软件进行数据的录入和分析。结果①病理切片结果显示:染菌组小鼠肺组织间质有炎性细胞浸润,且随着时间延长炎症有所加重,肺毛细血管壁有血管出血,说明造模成功。染菌组小鼠肾脏肾小球内有出血,且有炎性细胞浸润。染菌组小鼠脾脏髓质内可见出血,中性粒细胞浸润。尚未见染菌组小鼠肝脏有病理改变。②脏器系数结果显示:染菌组和对照组之间肺脏脏器系数差异有统计学意义(F=13.987,P<0.001),各个时间点差异有统计学意义(F=3.035,P=0.023),分组和时间点交互作用差异无统计学意义(F=1.232,P=0.305)。染菌组和对照组之间脾脏脏器系数差异有统计学意义(F=40.585,P<0.001),各个时间点之间差异有统计学意义(F=4.525,P=0.003),分组和时间点之间交互作用差异无统计学意义(F=1.173,P=0.330)。染菌组和对照组之间肾脏脏器系数差异有统计学意义(F=20.473,P<0.001),各个时间点之间差异有统计学意义(F=5.025,P=0.001),分组和时间点之间交互作用差异无统计学意义(F=1.131,P=0.274)。染菌组和对照组之间心脏脏器系数差异无统计学意义(F=0.061,P=0.805),各个时间点之间差异也无统计学意义(F=1.528,P=0.204),分组和时间点之间交互作用差异无统计学意义(F=1.144,P=0.343)。染菌组和对照组之间肝脏脏器系数差异无统计学意义(F=0.590,P=0.478),各个时间点之间差异有统计学意义(F=37.952,P<0.001),分组和时间点之间交互作用差异无统计学意义(F=2.303,P=0.067)。染菌组和对照组之间脑脏器系数差异无统计学意义(F=0.031,P=0.861),各个时间点之间差异无统计学意义(F=1.221,P=0.310),分组和时间点之间交互作用差异无统计学意义(F=0.355,P=0.840)。③比较染菌组和对照组TLR2、TLR4、MyD88 mRNA相对表达量,real-time RT-PCR检测结果显示在染菌组和对照组小鼠肺组织TLR2 mRNA之间表达水平差异无统计学意义(F=0.032,P=0.858),各个时间点差异无统计学意义(F=0.068,P=0.991),分组和时间点之间交互作用差异无统计学意义(F=0.269,P=0.897)。染菌组和对照组小鼠肺组织TLR4 mRNA表达水平差异无统计学意义(F=0.321,P=0.573),各个时间点差异无统计学意义(F=0.443,P=0.777),分组和时间点之间交互作用差异无统计学意义(F=0.616,P=0.625)。染菌组和对照组肺组织MyD88 mRNA表达水平差异无统计学意义(F=0.711,P=0.402),各个时间点差异无统计学意义(F=0.367,P=0.831),分组和时间点之间交互作用差异无统计学意义(F=1.031,P=0.398)。④染菌组和对照组小鼠肺组织IL-6的浓度差异有统计学意义(F=69.18,P<0.001),各个时间点差异有统计学意义(F=5.289,P<0.001),分组和时间点之间交互作用差异有统计学意义(F=8.686,P<0.001)。染菌组和对照组小鼠肺组织TNF-α的浓度差异有统计学意义(F=24.6,P<0.001),各个时间点差异有统计学意义(F=14.230,P<0.001),分组和时间点之间交互作用差异有统计学意义(F=13.987,P<0.001)。结论:①通过鼻内接种50ul 1.2×109/ml军团菌菌悬液能够建立军团菌感染的小鼠模型。②本次研究尚未发现TLR2、TLR4、MyD88参与抗军团菌感染。③IL-6和TNF-α与军团菌感染有关。

全文目录

中文摘要  6-8
英文摘要  8-11
常用缩写词中英文对照表  11-12
前言  12-15
第一部分小鼠军团菌病感染模型的建立  15-29
  1 对象  15-17
    1.1 实验对象  15
    1.2 试剂  15-16
      1.2.1 主要试剂  15-16
      1.2.2 试剂配制  16
    1.3 主要仪器设备  16-17
  2. 方法  17-18
    2.1 菌种的复苏及保存  17
    2.2 小鼠军团菌感染模型的建立  17-18
  3 结果  18-23
    3.1 病理切片结果  18-19
    3.2 脏器系数比较  19-23
  4 讨论  23-29
第二部分：Toll 样受体2、4 表达与小鼠军团菌感染的关系的研究  29-40
  1 对象和方法  29-32
    1.1 实验对象  29
    1.2 材料与仪器  29
      1.2.1 主要试剂  29
      1.2.2 主要仪器  29
    1.3 试验方法  29-32
      1.3.1 小鼠肺组织总RNA 提取  29-30
      1.3.2 real-time RT-PCR 检测肺组织TLR2、TLR4、MyD88 mRNA  30-32
    1.4 统计学方法  32
  2 结果  32-36
    2.1 TLR2 mRNA 在小鼠肺组织中的表达  32-33
    2.2 TLR4 mRNA 在小鼠肺组织中的表达  33
    2.3 MyD88 mRNA 在小鼠肺组织中的表达  33-36
  3 讨论  36-40
第三部分相关细胞因子与小鼠军团菌感染的关系研究  40-45
  1 对象和方法  40
    1.1 实验对象  40
    1.2 材料与仪器  40
  2 结果  40-43
    2.1 IL-6 与军团菌感染的关系  40-42
    2.2 TNF-α与军团菌感染的关系  42-43
  3 讨论  43-45
全文小结  45
研究特色  45-46
参考文献  46-54
综述  54-65
  参考文献  62-65
个人简历  65-66
致谢  66

TLR2、TLR4及相关细胞因子在军团菌感染作用机制的实验研究

内容摘要

全文目录

相似论文