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载脂蛋白E基因敲除及高脂饮食小鼠海马神经元内IP3、IP3R-1和Aβ表达变化的研究

作　者: 周祎
导　师: 贾雪梅
学　校: 安徽医科大学
专　业: 人体解剖与组织胚胎学
关键词: 载脂蛋白E基因敲除 高脂饮食 IP3 IP3R-1 Aβ 海马 小鼠
分类号: R329
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要


目的观察载脂蛋白E（ApoE）基因敲除（KO）及高脂饮食小鼠海马CA1和CA3区神经元内三磷酸肌醇（inositol 1,4,5-triphosphate,IP3）、三磷酸肌醇受体Ⅰ型（inositol 1,4,5-triphosphate receptor-1,IP3R-1）和β淀粉样蛋白（amyloid proteinβ,Aβ）表达的变化,以探讨小鼠ApoE基因敲除及高脂饮食与神经退行性疾病发病机制的关系。方法将30只C57BL/6J小鼠分为对照组（C组）、ApoE KO组（KO组）和ApoE KO高脂饮食组（KO-HF组）,小鼠成模后,称重;取血检测血脂;取小鼠脑组织分别进行HE染色、免疫组织化学染色和计算机图像分析。结果①体重结果:C组小鼠体重（14.816±1.370）、KO组小鼠体重（20.066±1.821）及KO-HF组小鼠体重（23.631±5.215）存在差异（F=18.210,P﹤0.05）。②血清学指标检测结果:C组小鼠总胆固醇（2.062±0.303）、KO组小鼠总胆固醇（13.680±3.719）及KO-HF组小鼠总胆固醇（31.821±2.933）存在差异（F=279.439,P﹤0.05）;C组小鼠甘油三酯（1.778±0.397）、KO组小鼠甘油三酯（2.624±0.654）及KO-HF组小鼠甘油三酯（3.006±0.238）存在差异（F=18.422,P﹤0.05）;C组小鼠低密度脂蛋白（0.697±0.550）、KO组小鼠低密度脂蛋白（2.367±0.571）及KO-HF组小鼠低密度脂蛋白（5.165±1.071）存在差异（F=73.820,P﹤0.05）。③H E染色显示,C组小鼠海马CA1和CA3区锥体细胞层神经元排列整齐、紧密,胞体呈锥体形或圆球形,胞核大而圆;KO组小鼠海马锥体细胞层神经元排列不整齐,胞体略小;KO-HF组小鼠海马锥体细胞层神经元排列松散稀疏,胞体小。④免疫组织化学染色显示,IP3和IP3R-1的免疫阳性物质分布于小鼠海马各区神经元胞质内,细胞核为阴性反应。C组小鼠海马CA1和CA3区神经元内IP3和IP3R-1免疫阳性物质着色呈棕黄色至棕褐色,KO组小鼠海马神经元着色呈浅黄色至棕黄色,KO-HF组小鼠海马神经元呈浅黄色。C组小鼠海马CA1和CA3区Aβ表达于神经元胞质中,呈淡黄色,KO组小鼠神经元内Aβ染色呈浅棕黄色,KO-HF组小鼠神经元内的Aβ染色呈深棕黄色。⑤计算机图像分析结果显示,C组小鼠海马CA1和CA3区神经元内的IP3平均光密度值分别为（0.394±0.025）和（0.393±0.031）、KO组IP3平均光密度值分别为（0.375±0.045）和（0.375±0.045）及KO-HF组IP3平均光密度值分别为（0.341±0.033）和（0.343±0.0321）,组间存在差异（P﹤0.05）;C组小鼠海马CA1和CA3区神经元内的IP3R-1平均光密度值分别为（0.383±0.044）和（0.381±0.0503）、KO组IP3R-1平均光密度值分别为（0.364±0.044）和（0.370±0.0423）及KO-HF IP3R-1平均光密度值分别为（0.338±0.013）和（0.338±0.012）,组间存在差异（P﹤0.05）;C组小鼠海马CA1和CA3区神经元内的Aβ平均光密度值（0.2865±0.011）和（0.2679±0.009）、KO组Aβ平均光密度值分别为（0.3354±0.032）和（0.3162±0.033）及KO-HF组Aβ平均光密度值分别为（0.3479±0.052）和（0.3299±0.035）,组间存在差异（P﹤0.05）。结论ApoE KO及高脂饮食可导致小鼠海马CA1和CA3区神经元内IP3和IP3R-1表达降低,Aβ表达增强,提示它们可能参与ApoE异常引发神经退行性病变的发生发展过程。

全文目录


英文缩略词表  6-7摘要  7-9Abstract  9-111 前言  11-122 材料和方法  12-15  2.1 材料  12-14    2.1.1 溶液配制  12-13    2.1.2 仪器设备  13    2.1.3 标本制备  13-14  2.2 方法  14-15    2.2.1 HE 染色  14    2.2.2 免疫组织化学染色  14-15    2.2.3 计算机图像采集  15    2.2.4 统计学分析  153 结果  15-27  3.1 体重检测结果  15  3.2 血清学指标检测结果  15-17  3.3 HE 染色结果  17-19  3.4 免疫组织化学染色结果  19-23  3.5 计算机图像分析结果  23-274 讨论  27-32  4.1 ApoE、血脂与 AD  27-28  4.2 ApoEKO 及高脂饮食小鼠海马形态学变化及意义  28-29  4.3 ApoEKO 小鼠海马神经元 IP3 和IP3R-1 表达变化及意义  29-31  4.4 ApoEKO 小鼠海马神经元 Aβ 表达变化及意义  31-325 小结  32-34参考文献  34-39附录  39-40致谢  40-41综述  41-51  参考文献  48-51

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中图分类: > 医药、卫生 > 基础医学 > 人体形态学 > 人体组织学
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