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茯苓多糖的抗炎效果及其对小鼠免疫功能影响的初步研究

作　者: 赵强强
导　师: 何光源；涂知明
学　校: 华中科技大学
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: 茯苓多糖小鼠巨噬细胞RAW264.7 白细胞介素-6 肿瘤坏死因子-α
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

茯苓(Poria cocos (Sehw.) Wolf),又名茯灵、玉灵,属多孔菌科茯苓属。茯苓是一种在我国应用历史悠久、应用范围广泛的重要传统药材,具有益脾胃、宁心安神、渗湿利水等功效。茯苓多糖为茯苓的有效成分之一。有研究结果显示,茯苓能显著地抑制炎症反应和增强机体免疫功能,具有较好的研究和药用价值。但对茯苓多糖抗炎效果和增强免疫功能作用的研究却甚少。本文以小鼠巨噬细胞RAW264.7为研究材料,采用ELISA和RT-PCR方法研究了茯苓多糖PS1及PS2对炎症的影响;选择昆明小白鼠为研究材料,采用小鼠炭粒廓清法、PHA诱导T淋巴细胞转化法和脾细胞抗体形成法研究了茯苓多糖PS1及PS2对小鼠免疫功能的影响,主要的研究结果为:1)本文采用盐提法和水提法,分别获得了盐提茯苓多糖PS1和水提茯苓多糖PS2。对PS1及PS2进行理化性质分析表明,PS1和PS2均不含蛋白质和核酸等杂质,它们的平均分子量分别为9.5×104和20.0×104,完全水解后获得的主要单糖样本组分为:PS1为半乳糖、甘露糖、葡糖糖和木糖,摩尔比为4.7:2.5:1.6:1.1;PS2为葡萄糖、半乳糖、甘露糖和木糖,摩尔比为6.5: 1.6:1.3:0.6。2)茯苓多糖PS1及PS2均具有剂量依赖的抑制炎症反应的效果。本文通过LPS刺激RAW264.7细胞产生炎症反应建立了炎症细胞模型,分别用不同浓度的PS1及PS2单独干预炎性RAW264.7细胞后,用ELISA和RT-PCR法检测肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6表达量及肿瘤坏死因子-αmRNA表达量。ELISA结果显示,PS1及PS2均能显著抑制白细胞介素6和肿瘤坏死因子-α的表达;RT-PCR结果表明,PS1及PS2对肿瘤坏死因子-αmRNA的表达具有明显的抑制作用。3)PS1及PS2对小鼠非特异性免疫和细胞免疫功能都具有明显的增强作用,但对小鼠体液免疫功能并没有明显的影响。本文采用小鼠碳粒廓清法、PHA刺激T淋巴细胞转化法和小鼠脾细胞抗体形成法,分别检验了茯苓多糖PS1及PS2对小鼠非特异性免疫、细胞免疫和体液免疫功能的影响。实验结果显示,PS1及PS2均能明显提高廓清指数K和T淋巴细胞转化率,但对脾细胞抗体形成水平并无明显影响。综上所述,PS1及PS2均具有显著的抗炎效果,并能明显促进小鼠非特异性免疫功能和细胞免疫功能,但对小鼠体液免疫功能却无明显影响。

全文目录

摘要  4-5
Abstract  5-8
1 绪论  8-18
  1.1 炎症及其发生的机理  8-10
  1.2 白细胞介素6 及肿瘤坏死因子α  10-13
  1.3 中药抗炎以及天然多糖的研究与应用  13-15
  1.4 茯苓及其多糖的研究进展  15-17
  1.5 本课题研究内容  17-18
2 茯苓多糖的提取纯化及其分析  18-26
  2.1 实验材料  18
  2.2 实验方法  18-21
  2.3 实验结果  21-24
  2.4 讨论  24-26
3 茯苓多糖对炎症因子IL-6 及TNF-α的影响  26-36
  3.1 实验材料  26
  3.2 实验方法  26-32
  3.3 实验结果  32-34
  3.4 讨论  34-36
4 茯苓多糖对小鼠免疫功能的影响  36-43
  4.1 实验材料  36
  4.2 实验方法  36-39
  4.3 实验结果  39-41
  4.4 讨论  41-43
5 总结与展望  43-45
  5.1 课题总结  43-44
  5.2 课题展望  44-45
致谢  45-46
参考文献  46-50

茯苓多糖的抗炎效果及其对小鼠免疫功能影响的初步研究

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