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安徽省植物根结线虫鉴定及茶皂素对南方根结线虫杀线活性研究

作　者: 陈良宏
导　师: 吴慧平
学　校: 安徽农业大学
专　业: 植物病理学
关键词: 根结线虫 鉴定 茶皂素 南方根结线虫 杀线活性
分类号: S432.45
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要


植物根结线虫(Meloidogyne spp.)为专性内寄生植物线虫,是当前对全世界农业生产产生威胁最重要的病原物类群之一,每年对全世界重要的经济作物造成的损失就高达百亿美元。根结线虫病害的的防治以化学防治为主,其他防治方法为补充的治理策略。化学杀线剂一般品种单一、毒性大、环境相容性差、线虫容易产生抗性,已经越来越不能适应粮食安全和绿色环保的要求。抗病育种是一种经济、有效的防治根结线虫的方法,但目前一些抗性品种的抗性单一,易使线虫的小种发生变异,而且抗性材料匮乏满足不了现在的需求。生物农药虽然毒性低,对环境破坏小但受到环境因素影响很大,药效不稳定,而且容易破坏土壤微生物群落。植物源杀线剂防治植物线虫病害环保安全,是目前植物线虫病害防治的研究热点。茶皂素(Tea saponin, TS)是油茶生产中的生物副产物,是一类五环三萜类混合物,具有杀虫灭菌的作用,我们的前期研究中发现TS具有杀线虫的活性。前期调查发现:在安徽省Meloidogyne spp的种类鉴定中,依靠形态学特征,部分线虫不能准确鉴定到种,而线虫种类的确定是根结线虫病害诊断、防治的前提与基础。为了确认试验所用Meloidogyne spp的种类,我们在形态学鉴定的基础上进一步利用酯酶同工酶分析方法对安徽省太和Meloidogyne spp种群、潜山Meloidogyne spp种群、肥西Meloidogyne spp种群、合肥Meloidogyne spp种群的种类进一步进行了鉴定,以便找到实验的线虫材料。为了探讨98%TS对南方根结线虫(M. incognita)离体杀线活性,本文利用98%TS溶液M. incognita进行了离体杀线活性的测定,并将98%TS溶液对M. ncognita的离体杀线活性与水稻潜根线虫(Hirschmanniella. orayze)、甘薯茎线虫(Ditylenchus. destructor)、松材线虫(Bursaphelenchus .xyluplilus)进行了比较;为了观察98%TS溶液提取物对南方根结线虫2龄幼虫(J2)的形态的影响,在显微镜下观察了TS溶液对J2形态变化的影响;在室内,以瓜蒌为寄主进行了98%TS溶液对J2抑制侵染活性测定。用商品75%TS进行了M. incognita引起的番茄根结线虫病防效的初步测定。4个Meloidogyne spp种群种类形态学鉴定结果表明:太和根结线虫种群、潜山根结线虫种群、合肥市区根结线虫种群为M. incognita。肥西根结线虫种群为M. incognita疑似种,其会阴花纹是六边形,无明显高背弓,不具备M. incognita的典型特征。通过酯酶同工酶表型分析确定肥西根结线虫种群为M. incognita。另外,确认4个Meloidogyne spp安徽省田间出现时为单纯种。98%TS溶液对合肥Meloidogyne spp离体杀线活性测定结果表明: TS溶液对J2、B. xyluplilus、H. orayze、D. destructor有较强的杀线活性和击倒能力。98%TS溶液对J2的击倒率高于H. orayze、D. destructor,10mg/mL的TS对J2的击倒率达到100%。处理60小时,TS的浓度为10mg/mL时, J2的死亡率达到83.3%,高于H. orayze、D. destructor;此时,J2的LC50是2.56mg/mL(r=0.99),比H. orayze、D. destructor低。TS溶液对J2的杀线活性明显高于H.orayze、D.destructor。98%TS抑制线虫侵染的盆栽试验表明:98%TS溶液浸根处理和对线虫浸泡处理都能显著抑制线虫的侵染。瓜蒌幼苗在5.0 mg/mL的TS溶液浸泡2h,对J2侵染平均抑制率达到88.7%,具有显著抑制J2的侵染,浸泡的时间越长,抑制侵染的效果越好。7.5 mg/mL、10.0 mg/mLTS溶液对J2的口针和中食道球的形态能产生一定的影响;口针变细,中食道球收缩,口针周围有明显的泡状物。商品75%TS杀线制剂防效盆栽试验结果表明:TS杀线制剂能显著抑制J2侵染,降低土壤J2密度。处理30d,2gTS/1000g土杀线制剂、1gTS/1000g土杀线制剂、3%克百威在根结指数没有显著性差异(p=0.05), 2gTS/1000g土杀线制剂的根结指数为1.7。2gTS/1000g土杀线制剂、3%克百威在相对防效没有显著性差异(p=0.05),相对防效分别是73.1%、75.4%。处理60d后,相对防效有所降低, 2gTS/1000g土杀线制剂、3%克百威的相对防效分别为57.6%、63.1%。2gTS/1000g土杀线制剂的虫口抑制率最高达到80.1%。TS杀线制剂能促进番茄株高、地上鲜重、根长的增长,处理30d,2gTS/1000g土杀线制剂与3%克百威在株高、地上鲜重、根长方面不存在显著性差异(p=0.05)。2gTS/1000g土杀线制剂处理番茄的株高增长率、地上部分鲜重增长率、根长增长率分别是20.7%、43.5%、15.2%。处理60d,株高、地上鲜重、根长方面2gTS/1000g土杀线制剂与3%克百威存在显著性差异(p=0.05)。2gTS/1000土杀线制剂处理番茄的株高增长率、地上部分鲜重增长率、根长增长率都高于3%克百威,分别为28.9%、23.9%、23.0%。

全文目录


中文摘要  3-5
英文摘要  5-10
文献综述  10-20
  1 植物根结线虫(Meloidogyne spp)的分布与危害  11-12
    1.1 Meloidogyne spp 的分布  11
    1.2 Meloidogyne spp 的危害  11-12
  2 Meloidogyne spp 种类的鉴定方法  12-15
    2.1 Meloidogyne spp 种类鉴定的传统方法  12-13
      2.1.1 Meloidogyne spp 种类的形态学鉴定方法  12
      2.1.2 Meloidogyne spp种类细胞遗传学鉴定方法  12-13
      2.1.3 Meloidogyne spp种类同工酶电泳鉴定方法  13
    2.2 Meloidogyne spp种类的分子鉴定方法  13-15
      2.2.1 Meloidogyne spp种类PCR和PCR-RFLP鉴定方法  13-14
      2.2.2 Meloidogyne spp 种类RAPD 鉴定方法  14
      2.2.3 Meloidogyne spp种类AFLP鉴定方法  14-15
    2.3 Meloidogyne spp 的小种鉴定方法  15
  3 Meloidogyne spp 病害的防治方法  15-18
    3.1 Meloidogyne spp 病害农业防治方法  15-16
      3.1.1 轮作  15
      3.1.2 其他农业技术防治方法  15
      3.1.3 抗病育种  15-16
    3.2 物理防治方法  16
    3.3 化学防治方法  16
    3.4 生物防治方法  16-17
    3.5 植物源农药防治方法  17-18
  4 结论与展望  18-20
引言  20-22
材料与方法  22-29
  1 试验材料  22
    1.1 供试药剂  22
    1.2 供试线虫  22
    1.3 供试寄主  22
  2 试验方法  22-29
    2.1 4个Meloidogyne spp 的鉴定比较  22-25
      2.1.1 4个Meloidogyne spp 种群样本的采集  22
      2.1.2 4个Meloidogyne spp 种群的纯化与扩繁  22
      2.1.3 线虫的分离与收集  22-23
      2.1.4 4个Meloidogyne spp 种群的形态鉴定  23-24
      2.1.5 4个Meloidogyne spp 种群酯酶鉴定方法  24-25
    2.2 98%TS的制备方法  25
    2.3 98%TS溶液离体杀线活性室内测定的配制方法  25-26
      2.3.1 TS 溶液的配制方法  25
      2.3.2 2龄幼虫等线虫的分离与收集  25-26
      2.3.3 供试幼苗的培养  26
      2.3.4 98%TS溶液对2龄幼虫等线虫的杀线活性测定  26
      2.3.5 98%TS溶液抑制线虫侵染活性测定  26
      2.3.6 98%TS溶液对2龄幼虫形态的影响  26
    2.4 75%TS杀线剂对南方根结线虫防效盆栽试验  26-29
      2.4.1 75%TS杀线剂的制备方法  26-27
      2.4.2 75%TS杀线剂的施用方法  27
      2.4.3 75%TS杀线剂的防效指标测定与计算  27
      2.4.4 数据统计与分析方法  27-29
结果与分析  29-42
  1 4个Meloidogyne spp种群的鉴定  29-33
    1.1 4个Meloidogyne spp 种群的形态鉴定分析  29-32
      1.1.1 合肥种群Meloidogyne. spp 形态特征  29
      1.1.2 肥西Meloidogyne. spp 种群形态特征  29
      1.1.3 潜山Meloidogyne. spp 种群形态特征  29-30
      1.1.4 太和Meloidogyne spp 种群形态特征  30-32
    1.2 4个Meloidogyne. spp种群酯酶同工酶鉴定  32-33
  2 98%TS溶液对2龄幼虫等线虫离体杀线活性测定  33-37
  3 98%TS溶液抑制侵染活性测定  37
  4 98%TS溶液对2龄幼虫形态的影响  37-38
  5 75%TS杀线制剂防效盆栽试验防效  38-42
    5.1 75%TS杀线制剂抑制南方根结线虫侵染的效果  38-39
    5.2 75%TS杀线制剂对土壤中2龄幼虫群体的影响  39-40
    5.3 75%TS杀线制剂能增加番茄的生物量  40-42
讨论  42-45
结论  45-47
参考文献  47-52
致谢  52-53
作者简介  53

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中图分类: > 农业科学 > 植物保护 > 病虫害及其防治 > 植物病害及其防治 > 侵（传）染性病害 > 线虫病
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