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黄芪甲甙对衰老HELF细胞端粒酶活性、细胞周期因子及klotho基因调控作用的实验研究

作　者: 郭蕾
导　师: 魏晓东；欧芹；张涛；张鹏霞
学　校: 佳木斯大学
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: 黄芪甲甙 端粒酶 klotho 细胞周期因子 衰老人胚肺成纤维细胞
分类号: R285
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要


目的:探讨黄芪甲甙(Astr)对衰老人胚肺成纤维细胞(HELF)的影响,通过HELF细胞活力、SA-β-gal活性、端粒酶活性和cyclinD1、cyclinE、CDK4、p16、p21、klotho mRNA表达的变化,说明黄芪甲甙对衰老HELF细胞作用的机制。方法:采用体外培养复制性衰老HELF细胞为研究对象,将细胞分成四组:青年组(35代),衰老组、黄芪甲甙组和对照组。HELF细胞进行体外常规培养,细胞从50代按照1μg黄芪甲甙/ml培养基开始加入黄芪甲甙,培养至53代,观察细胞形态,采用MTT法检测细胞活力,Dimiri氏法检测β-半乳糖苷酶活性,TRAP-PCR银染法检测端粒酶活性;RT-PCR法检测cyclinD1、cyclinE、CDK4、p16、p21、klotho mRNA表达。结果:与青年组比较:衰老组细胞活力明显降低,CDK4、klotho mRNA表达均明显降低(p<0.05),β-半乳糖苷酶活性,cyclinD1、cyclinE、p16、p21 mRNA表达均升高(p<0.05)。与衰老组和对照组相比:黄芪甲甙组细胞β-半乳糖苷酶活性明显降低,cyclinD1、cyclinE、p16、p21 mRNA的表达水平明显降低(p<0.05),而细胞活力、端粒酶活性和CDK4、klotho mRNA的表达明显提高(p<0.05)。结论:黄芪甲甙可发挥抗HELF细胞衰老作用,使衰老HELF细胞活力和端粒酶活性提高,β-半乳糖苷酶活性降低。其作用可通过上调CDK4、klotho基因mRNA的表达,从而抑制p21通路,降低cyclinD1、cyclinE、p16、p21 mRNA的表达水平,而实现其抗HELF细胞衰老的作用。

全文目录


一 中文摘要  5-6
二 英文摘要  6-7
三 前言  7-9
四 文献综述  9-29
五 材料与方法  29-39
六 结果  39-51
七 讨论  51-55
八 结论  55-56
九 参考文献  56-70
十 致谢  70-71
十一 英文缩写  71

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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药药理学
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