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NF-κB与iNOS在肾上腺疾病组织中的表达特点及意义

作 者: 李萍
导 师: 胡卫列
学 校: 南方医科大学
专 业: 泌尿外科
关键词: 肾上腺皮质增生 肾上腺皮质腺瘤 嗜铬细胞瘤 核转录因子-κB 诱导型一氧化氮合酶
分类号: R586
类 型: 硕士论文
年 份: 2010年
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内容摘要


研究目的:检测NF-κB(nuclear transcription facrorκB,核转录因子κB)与iNOS(inducible nitric oxide synthase,诱导型一氧化氮合酶)在人肾上腺疾病组织中的表达差异,探讨其在肾上腺疾病发生过程中所起的作用及临床意义。方法与结果:一:肾上腺皮质增生、皮质腺瘤和正常肾上腺组织的获取及组织总RNA的提取在无菌条件下,收集所有标本于冻存管中,保存于-196℃液氮中。总共获取肾上腺皮质增生22例,肾上腺皮质腺瘤15例,正常肾上腺组织标本12例。按Trizol说明书提取组织总RNA。结果:病例组标本均经病理证实。每例标本均得到总RNA。二:RT-PCR检测NF-KB与iNOS基因的表达情况将49例标本的总RNA逆转录为cDNA,然后将cDNA产物进行PCR扩增NF-κB和iNOS基因,进行琼脂糖凝胶电泳。结果:人肾上腺皮质增生及腺瘤组织中NF-κB与iNOS的mRNA表达阳性率均显著高于正常组(P<0.05);增生组及腺瘤组之间NF-κB与iNOS的mRNA表达阳性率均无明显差异(P>0.05),三:定量PCR检测NF-κB与iNOS基因的表达水平将49例总RNA标本的逆转录产物进行定量PCR反应,采用样点拟合法分析结果得到标本中NF-κB、iNOS以及内参的阈值循环数(Ct)值。结果:人肾上腺皮质增生及腺瘤组织中NF-κB与iNOS的mRNA水平显著高于正常组(P均<0.05);增生组及腺瘤组之间NF-κB与iNOS的mRNA表达无明显差异(P>0.05),NF-κB与iNOSmRNA之间的表达呈正相关(r=0.984P<0.05)。四:免疫组化标本获取及各组中NF-KB与iNOS蛋白的表达情况选取广州军区总医院2008年7月-2009年9月提供的常规石蜡包埋组织块,连续切片,片厚5μm,一张做HE染色,其余分别进行NF-κB、iNOS染色。结果:其中肾上腺皮质增生、皮质腺瘤各13例,嗜铬细胞瘤15例,正常肾上腺组织10例。各病例组间NF-κB和iNOS蛋白表达阳性或强阳性,正常组中不表达或弱阳性。在嗜铬细胞瘤组织中NF-κB和iNOS蛋白表达强度显著高于肾上腺皮质增生与皮质腺瘤组(P均<0.05),且后者表达强度显著高于正常组(P均<0.05)结论:1.人肾上腺皮质增生、皮质腺瘤及嗜铬细胞瘤组织中,高表达的NF-κB mRNA及NF-κB蛋白与其发生发展密切相关;2.人肾上腺皮质增生、皮质腺瘤及嗜铬细胞瘤组织中,高表达的iNOS mRNA及iNOS蛋白与其发生发展密切相关;3.NF-κB与iNOS基因的表达,及由其控制的相应蛋白表达,在发病过程中相互作用、相互制约,这可能是治疗和诊断肾上腺疾病新的靶点。

全文目录


摘要  3-5
ABSTRACT  5-9
前言  9-12
材料与方法  12-19
结果  19-30
讨论  30-36
参考文献  36-40
附录  40-50
在读期间撰写论文情况  50-51
致谢  51-53
统计学合格证明  53

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中图分类: > 医药、卫生 > 内科学 > 内分泌腺疾病及代谢病 > 肾上腺疾病
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