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腹部火器伤后心脏iNOS的表达及其与心脏损伤相关机制的研究

作　者: 薛会朝
导　师: 冯德元；刘江伟
学　校: 石河子大学
专　业: 外科学
关键词: 火器伤内毒素诱导型一氧化氮合酶核转录因子-κB 心脏损伤
分类号: R82
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要

目的:本实验通过建立猪腹部肠管火器伤模型,观察伤后心脏结构和功能的变化,以及伤后血浆内毒素、心脏NF–κB、iNOS的表达、心肌细胞凋亡的动态变化,探讨心脏iNOS等细胞因子在腹部肠管火器伤后继发性心脏损伤中的作用,旨在为腹部火器伤后继发性心脏损伤的预防和治疗提供理论和实验依据。方法:采用健康长白仔猪42头,随机等分为7组:对照组和腹部肠管火器伤后1h、2h、4h、8h、12h和24h实验组。实验组在常温常湿环境下(温度22℃-24℃,相对湿度50%-60%)麻醉后军用54式手枪枪击致伤(射击点为脐水平后方2cm处右侧腹壁皱襞下缘无毛区),建立腹部肠管火器伤模型。对照组除不致伤外,其余步骤与实验组相同。各实验组于伤后相应时间点取材,对照组回实验室立即取材。在光镜下观察各组心脏组织学变化,同时测定血清中LDH、CK、CK-MB水平;采用显色基质鲎试剂法检测各组血浆内毒素水平;采用Tunnel法测定心肌细胞凋亡指数;免疫组织化学图像分析法测定各组心肌组织NF–κB、iNOS的表达。结果:(1)心脏外观正常,光镜下可见对照组及1h、2h组心肌细胞排列整齐,细胞染色一致.动、静脉内皮完整;其中1h、2h组心肌内毛细血管充血。4h、8h、12h、24h组心肌出现进行性加重的肌束间隙增宽、心肌细胞水肿、嗜酸性变。(2)实验组各组血清LDH、CK、CK-MB水平均明显高于对照组(P<0.01),总体分析1h、2h组各心肌酶指标上升速率较快;4h、8h、12h各指标上升速率减慢,但总体仍呈逐渐上升趋势;24h各指标再次快速升高。(3)实验组各组血浆内毒素水平均明显高于对照组(P<0.05),于伤后8h出现高峰,伤后12h仍维持在高峰值水平。(4)伤后各组心肌组织NF-κB的表达均明显高于对照组(P<0.01);NF-κB的表达在2h内快速上升,4h、2h组、1h组分别与前一组相比P<0.01;伤后8h至12h NF-κB平稳上升(P<0.05);伤后24h组NF-κB再次快速上升(P<0.01),达到最高峰值。(5)伤后各组心肌组织iNOS的表达均明显高于对照组(P<0.01);在2h内iNOS的表达快速增多;伤后4h和8h、12h时iNOS的表达平稳上升,但其IOD值均高于前一组(P<0.05);伤后24h组iNOS再次快速上升(P<0.01),达到最高峰值。(6)伤后2h内凋亡细胞急剧增多;2h到8h间凋亡细胞依然呈增多趋势,但增加较少,其中4h组与8h组凋亡细胞数相比无统计学意义;12h组、24h组凋亡细胞数增加幅度再次加大。(7)相关分析表明,腹部火器伤后猪心脏iNOS表达水平与血清LDH、CK、CK-MB水平、NF-κB的表达、心肌细胞的凋亡、血浆内毒素水平均呈正相关,相关系数分别为0.986、0.994、0.984、0.980、0.935、0.778(,P<0.01);心脏NF-κB表达水平与血清LDH、CK、CK-MB水平、心肌细胞的凋亡、血浆内毒素水平均呈正相关,相关系数分别为0.968、0.971、0.957、0.941、0.790,(P<0.01)。结论:(1)腹部肠管火器伤导致心脏出现结构和功能的损伤性变化,随着伤后时间的延长而加重。(2)腹部肠管火器伤可诱导心肌组织NF–κB、iNOS表达并介导心脏损伤。复杂的创伤、内毒素-细胞因子网络在促进腹部肠管火器伤后继发性心脏损伤的发生和发展中具有重要作用。

全文目录

中文摘要  6-8
英文摘要  8-10
主要符号表  10-11
前言  11-13
材料与方法  13-19
  1 材料  13-15
  2 方法  15-18
  3 数据处理  18-19
结果  19-25
  1 动物存活及剖腹探查情况  19
  2 心脏病理形态学变化  19
  3 血清心肌酶的变化  19-20
  4 心脏NF-κB 表达的变化  20-22
  5 心肌iNOS 的表达变化  22-23
  6 心肌细胞的凋亡表达变化  23-24
  7 相关性分析  24-25
讨论  25-32
  1 腹部肠管火器伤与心脏损伤  25-27
  2 NF-κB 在腹部火器伤肠管穿透后心脏损伤中的作用  27-28
  3 iNOS 在腹部火器伤肠管穿透伤后心脏中的表达及意义  28-29
  4 iNOS、NF-κB作为治疗靶点的探讨  29-32
结论  32-33
参考文献  33-37
附录  37-43
文献综述  43-49
  参考文献  46-49
致谢  49-50
作者简介  50-51
导师评阅表  51

腹部火器伤后心脏iNOS的表达及其与心脏损伤相关机制的研究

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