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雷公藤角斑病菌的生物学特性研究

作　者: 谢婉凤
导　师: 郭文硕；冯丽贞
学　校: 福建农林大学
专　业: 森林保护学
关键词: 雷公藤角斑病福木假尾孢生物学特性化学防治
分类号: S435.671
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
下　载: 23次
引　用: 4次
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内容摘要

角斑病是严重影响雷公藤(Tripterygium wilfordii)生产的一种主要病害,尤其在湿热气候条件下发病更重。病菌侵染后雷公藤植株大量叶片提前脱落,出现弱株或死株,使得根、叶产量下降。本研究通过分离雷公藤角斑病菌,根据病菌形态特征及致病性试验,参照刘锡琎和郭英兰分类方法,鉴定所分离菌为福木假尾孢(Pseudocercospora elaeodendri)。进一步扩增此病菌的基因间隔序列(internal transcribed sequence, ITS),测序后于基因数据库(NCBI)中进行同源性比对,结果未发现数据库中有福木假尾孢菌ITS序列的报道,但试验菌株与紫丁香中分离的未定种名的假尾孢菌(Pseudocercospora sp.)序列相似性为100%,可初步认为二者是同一种菌;在此基础上,从基因数据库中选取19个相似性高的菌株的ITS序列与试验菌株构建系统发育树,结果显示试验菌株仅与紫丁香中分离的假尾孢菌聚为一类,分子系统发育的研究结果佐证了形态分类学的结论。对福木假尾孢的生物学特性研究表明:菌丝日生长速率几乎相同,培养20 d后菌落开始老化。菌丝生长适温为27℃~29℃,最适培养基为胡萝卜,pH值为4.5~9均适合,光照条件对菌丝生长没影响;供试培养基中燕麦培养基产孢最多,31℃利于产孢,最适产孢pH值为6,暗条件适合产孢;分生孢子在3h开始萌发,芽管平均长度为6.6μm,7 h萌发率在90%以上,芽管平均长度为32.5μm。孢子可在其任意位置最先萌发,两端细胞最先萌发的概率为82%左右。孢子萌发可产生1~7个芽管,且萌发时隔膜处会向内缢缩。最适萌发温度为29℃~31℃。最适pH值为3,雷公藤汁液及暗培养条件对孢子萌发有促进作用,同时萌发需要一定的湿度。显微观察结果表明:雷公藤叶上表皮无气孔,下表皮气孔密度为214.55个·mm-2 ,人工培养菌落在2 d后可产孢,孢子接种雷公藤叶片24 h时萌发的芽管通过气孔直接侵入。用8种真菌杀菌剂防治雷公藤角斑病,室内孢子毒力试验表明:浓度70 mg·L-1嘧霉胺及100 mg·L-1的异菌脲、甲基硫菌灵、三唑酮对分生孢子萌发的抑制率均小于10%。孢子萌发抑制效果以75%百菌清WP最好,EC50=0.49 mg·L-1,EC= 0.78 mg·L-1,其次是25%腐霉利WP,80%代森锰锌WP。以75%百菌清WP及25%腐霉利WP作野外病苗防治试验结果表明25%腐霉利WP500倍的防治效果较好。

全文目录

摘要  6-7
Abstract  7-9
1 前言  9-14
  1.1 雷公藤  9
  1.2 雷公藤病害  9-10
  1.3 假尾孢菌分类的研究历史  10
  1.4 假尾孢菌的研究现状  10-12
  1.5 福木假尾孢  12
  1.6 分子鉴定在真菌分类中的应用  12-13
  1.7 雷公藤角斑病的防治  13-14
  1.8 本研究的研究内容  14
2 材料与方法  14-24
  2.1 材料  14-16
  2.2 方法  16-24
    2.2.1 病原菌分离  16
    2.2.2 病原菌形态鉴定与培养特征  16-17
    2.2.3 病原菌分子鉴定及系统发育学研究  17-21
    2.2.4 分离菌致病性测定  21
    2.2.5 菌丝生长速率及影响因素  21
    2.2.6 产孢条件研究及影响因素  21-22
    2.2.7 分生孢子萌发规律及特点  22-23
    2.2.8 雷公藤角斑病显微研究  23
    2.2.9 雷公藤角斑病防治剂筛选  23-24
3 结果与分析  24-47
  3.1 病原菌分离  24-25
  3.2 病原菌显微观察与培养特征  25-26
  3.3 病原菌分子鉴定及系统发育学研究  26-36
  3.4 致病性测定结果  36
  3.5 菌丝生长速率及影响因素  36-39
  3.6 产孢条件研究及影响因素  39-41
  3.7 分生孢子萌发规律及特点  41-43
  3.8 雷公藤角斑病菌显微研究  43-46
  3.9 雷公藤角斑病防治剂筛选  46-47
4 讨论  47-49
5 结论  49-50
6 不足之处  50-52
参考文献  52-57
附图  57-60
致谢  60

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