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干红辣椒的深度加工技术及辣椒碱的镇痛功能研究
作 者: 吉恬
导 师: 李学刚
学 校: 西南大学
专 业: 食品科学
关键词: 辣椒碱 辣椒红色素 提取和纯化 镇痛
分类号: TS201
类 型: 硕士论文
年 份: 2008年
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内容摘要
辣椒碱(Capsaicin)是茄科植物辣椒(Capsicum frutescens)果实中的主要呈辣物质。作为优质辣味剂已被广泛地应用于食品的各种调味,同时它还应用于医药、农业等其它行业中。在医药工业上是生产镇痛药、戒毒药的原料,在军事上更是生产催泪武器的原料,具有极其广泛的应用,有“软黄金”之誉。自上世纪70年代起,人们开始对红辣椒干进行深度加工,主要是以其为原料提取分离辣椒红色素(Chilired或Papmica colour)。辣椒红色素是一种安全无毒的天然食用色素,其主要成分是辣椒红素和辣椒玉红素,皆是类胡萝素,能够被人体消化吸收,并在人体内转化为维生素A。因此,它不仅安全无任何毒副作用,而且还具有一定的营养保健和医疗作用。正因为如此,在倡导安全与健康消费的今天,它被广泛运用于饮食、糕点、饮料、化妆品、医药、儿童玩具等的着色,备受世界各国的重视。我国辣椒资源丰富,种类繁多,从红辣椒中提取辣椒碱具有广阔的前景。本论文正是依据这种情况,以重庆市售红辣椒为原料,优化了辣椒碱的提取工艺参数;提出了一种新的辣椒碱纯化方法;探索了测定辣椒碱含量的分析方法;研究了辣椒红色素的提取和纯化方法和稳定性;同时,对辣椒碱对小鼠的镇痛功能做了研究。主要研究内容及结果如下:1.研究了辣椒碱的提取的最佳工艺条件,实验结果表明:从提取效率和经济成本这两方面来考虑,提取的最优条件为:选择10%NaOH乙醇溶液(乙醇浓度为30%),原料皮粉粒度60目,料液比1∶10g/mL,提取时间4h,提取温度70℃,提取后的溶液经浓缩可得到辣椒碱总含量为1.32%辣椒油树脂。2.研究了辣椒碱的纯化工艺条件,实验结果表明:硅胶柱层析法为最佳纯化方法。以辣椒油树脂为原料,在室温(25℃下)湿法装柱,用不同浓度梯度的乙醇溶液洗脱。分别收集洗脱液,浓缩;用无水乙醚进行重结晶得到白色辣椒碱晶体,该工艺中辣椒碱类化合物的回收率88%左右,且制得的晶体中辣椒碱总含量达到96.2%。3.研究了HPLC法测定辣椒碱含量的方法。实验结果表明:HPLC的测定条件为:色谱柱:HiQsiL C18(5μm,25mm×4.6mm);柱温:40℃;流动相:甲醇-0.80磷酸水溶液(80:20);流速:0.6ml/ml;检测波长:270nm;进样量:20μl,出峰时间:7.763min。对辣椒碱的检出限分别为5μ/ml-60μ/ml。在辣椒碱标准品对照的情况下,确定采用HPLC法来测定辣椒碱样品中辣椒碱的含量为最佳。4.对辣椒红色素的提取、纯化及稳定性进行了研究。在提取辣椒红色素之前对辣椒油树脂进行皂化处理;再用硅胶柱层析法进行辣椒红色素的纯化。实验结果表明:用1%、3%、5%、15%丙酮及纯丙酮做梯度洗脱,分别收集,合并洗脱液,蒸发溶剂,得到色价660左右的辣椒红色素。同时,实验还表明:辣椒红色素在高温、光照、氧的作用下不稳定,辣椒红色素宜于低温、避光、除氧的条件下保存;色素耐酸碱性好,在室内自然光下不容易褪色,然而当色素暴露在阳光下2h左右会褪色成无色。一般的金属(铜除外)对色素色价的影响很小。5.辣椒碱镇痛功能的研究。考察了小鼠扭体实验。结果表明:辣椒碱对由化学刺激引起的机体疼痛有很好的镇痛效果,是盐酸吗啡镇痛效果的80倍以上;除此之外,对辣椒碱作为吗啡依赖小鼠戒断的治疗药物做了初步研究,实验结果表明,辣椒碱对吗啡依赖小鼠有很好的戒断作用。同时,由于辣椒碱是一种从绿色植物中提取的天然物质,比其他化学合成的毒品戒断药物;如美沙酮等,对机体本身无成瘾性,这也是其作为吗啡戒断特效药的原因之一
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全文目录
摘要 8-10 Abstract 10-12 第一章 文献综述 12-28 1.1 辣椒的本草研究 12 1.2 辣椒的药理作用及其研究 12-13 1.3 辣椒碱的研究概况 13-18 1.3.1 辣椒碱的来源及分布 13-14 1.3.2 辣椒碱的结构和理化性质 14-15 1.3.2.1 名称和分子结构 14-15 1.3.2.3 理化性质 15 1.3.3 辣椒碱的生理功能 15-17 1.3.3.1 辣椒碱的镇痛作用 15-16 1.3.3.2 辣椒碱的心脑血管效应 16 1.3.3.3 辣椒碱的抗炎作用 16 1.3.3.4 脂质过氧化调节作用 16 1.3.3.5 对消化系统的作用 16-17 1.3.3.6 对血压的影响 17 1.3.3.7 抗癌的双重作用 17 1.3.3.8 杀菌和杀虫作用 17 1.3.4 辣椒碱的应用 17-18 1.3.4.1 医药领域 17 1.3.4.2 军事领域 17 1.3.4.3 农药领域 17-18 1.3.4.4 涂料领域 18 1.3.4.5 食品添加剂领域 18 1.3.4.6 减肥保健 18 1.3.4.7 饲料工业 18 1.4 辣椒碱的分析测定方法 18-20 1.4.1 气-质联用法 18-19 1.4.2 可见分光光度法 19 1.4.3 亚硝酸钠比色法 19 1.4.4 高效液相色谱法(HPLC) 19-20 1.4.5 FAO紫外双比色法 20 1.5 辣椒碱提取和分离纯化方法 20-21 1.5.1 辣椒碱的提取方法 20-21 1.5.1.1 有机溶剂提取法 20-21 1.5.1.2 酸碱法 21 1.5.1.3 超临界CO_2萃取法 21 1.5.1.4 酶法 21 1.5.1.5 细胞培养法 21 1.5.1.6 化学合成法 21 1.6 辣椒红色素的研究概况 21-24 1.6.1 辣椒红色素的来源及分布 22 1.6.2 辣椒红色素的成分 22-23 1.6.3 辣椒红色素的结构式和理化性质 23 1.6.3.1 辣椒红色素的结构式 23 1.6.3.2 辣椒红色素的理化性质 23 1.6.4 辣椒红色素的生理功能 23 1.6.5 辣椒红色素的稳定性 23-24 1.6.5.1 光照对辣椒红色素稳定性的影响 23 1.6.5.2 温度对辣椒红色素稳定性的影响 23 1.6.5.3 酸碱度(pH)对辣椒红色素稳定性的影响 23-24 1.6.5.4 溶剂对辣椒红色素稳定性的影响 24 1.6.5.5 金属离子对辣椒虹色素稳定性的影响 24 1.6.6 辣椒红色素的应用 24 1.7 辣椒红色素的提取研究概况 24-26 1.7.1 油溶法 24-25 1.7.2 溶剂法 25 1.7.3 超临界CO_2流体萃取法(SFE-CO_2) 25 1.7.4 超声波溶剂提取法 25 1.7.5 溶剂微波提取法 25-26 1.7.6 酶法提取 26 1.8 辣椒红色素的测定方法 26-27 1.8.1 辣椒红色素的定性分析方法 26 1.8.2 辣椒红色素的定量分析方法 26-27 1.9 引言 27-28 第二章 辣椒碱的提取,分离和纯化工艺研究 28-42 2.1 前言 28 2.2 实验材料与设备 28-29 2.2.1 实验材料 28 2.2.2 实验仪器及设备 28-29 2.3 辣椒碱提取实验方案设计 29-31 2.3.1 干红辣椒的预处理 29 2.3.2 脱色处理 29 2.3.3 有机溶剂的选择 29-30 2.3.4 乙醇提取辣椒碱工艺研究方案 30-31 2.3.4.1 最佳乙醇浓度确定实验 30 2.3.4.2 最佳提取温度确定实验 30 2.3.4.3 最佳提取时间确定实验 30 2.3.4.4 最佳皮粉粒度确定实验 30 2.3.4.5 最佳料液比确定实验 30-31 2.3.5 实验数据用EXCEL和RPSS软件分析和处理 31 2.4 实验结果与讨论 31-34 2.4.1 提取溶剂的确定 31 2.4.2 不同乙醇浓度确定试验 31-32 2.4.3 料液比的确定 32 2.4.4 皮粉粒度的确定 32 2.4.5 乙醇提取时间的确定 32-33 2.4.6 乙醇提取温度的确定 33 2.4.7 实验结果 33-34 2.5 树脂法制备高纯度辣椒碱工艺的研究 34-36 2.5.1 提取高纯度辣椒碱的预处理工艺流程 34 2.5.2 树脂法提取高纯辣椒碱工艺流程 34 2.5.3 树脂法制备高纯度辣椒碱设计方案 34-35 2.5.3.1 树脂预处理,装柱及再生 34-35 2.5.4 树脂的选择 35 2.5.4.1 树脂的基本性质 试验所用大孔树脂的基本性质,其基本见表2-2 35 2.5.4.2 不同树脂对辣椒碱的吸附效果 35 2.5.4.3 不同树脂对辣椒碱解吸效果 35 2.5.5 对D600的吸附性能的研究 35-36 2.5.5.1 样液的浓度对D600大孔树脂静态吸附性能的影响 35 2.5.5.2 D600对辣椒碱提取液的静态吸附曲线 35-36 2.5.5.3 pH值对D600静态吸附性能的影响 36 2.5.5.4 流速对D600大孔树脂动态吸附性能的影响 36 2.5.5.5 D600对辣椒碱的动态吸附曲线 36 2.5.6 解析条件单因素试验 36 2.5.6.1 不同pH值下的静态洗脱效果 36 2.5.6.2 D600的洗脱解析曲线的绘制 36 2.5.7 统计分析 36 2.6 结果与讨论 36-39 2.6.1 不同树脂对辣椒碱吸附解析效果 36-37 2.6.2 对D600吸附性能的研究 37-39 2.6.2.1 样液的浓度对D600大孔树脂静态吸附的影响 37 2.6.2.2 D600对辣椒碱的静态吸附曲线 37-38 2.6.2.3 pH值对D600静态吸附性能的影响 38 2.6.2.4 流速对D600动态吸附性能的影响 38-39 2.6.3 解析条件单因素试验 39 2.6.3.1 不同PH值下的洗脱效果 39 2.7 结晶溶剂的选择确定试验 39-40 2.7.1 结晶温度的选择确定实验 40 2.8 结果与讨论 40-42 第三章 辣椒红色素提取,分离纯化工艺的研究 42-52 3.1 前言 42 3.2 提取辣椒红色素粗品的方案设计 42-45 3.2.1 有机溶剂萃取制备辣椒油树脂的工艺流程 42 3.2.2 溶剂萃取法制备辣椒红色素粗品方法的研究 42-44 3.2.2.1 干红辣椒的预处理 43 3.2.2.2 萃取溶剂的选择 43 3.2.2.3 溶剂种类对萃取率的影响 43-44 3.2.3 试验结果与讨论 44-45 3.3 丙酮提取辣椒红色素方法的研究 45-48 3.3.1 辣椒红色素粗品的预处理 45-48 3.3.1.1 乙醇浓度对辣椒红素色价的影响 45 3.3.1.2 NaOH浓度对皂化的影响 45-46 3.3.1.3 皂化时间对辣椒红色素的影响 46 3.3.1.4 皂化温度对辣椒红色素粗品的影响 46-47 3.3.1.5 料液比对辣椒红素色价的影响 47-48 3.4 结果与讨论 48 3.5 柱层析法制备高纯度辣椒红色素实验方案设计 48-50 3.5.1 洗脱溶剂的确定 48-49 3.5.2 树脂的静态筛选 49 3.5.3 洗脱剂的选择 49 3.5.4 树脂动态流速对吸附的影响 49 3.5.5 洗脱流速的选择确定实验 49 3.5.6 树脂法最优整体工艺条件的确定实验方案 49 3.5.7 正交实验设计 49-50 3.6 结果与讨论 50-52 第四章 辣椒碱和辣椒红色素的分析方法研究 52-60 4.1 前言 52 4.2 材料和设备 52-53 4.2.1 主要材料 52 4.2.2 实验主要仪器及设备 52-53 4.3 实验方法设计 53-54 4.3.1 辣椒碱标准液的配制 53 4.3.2 检测条件的确定 53 4.3.3 辣椒碱标准曲线的绘制 53-54 4.3.4 方法的精密度和重现性 54 4.3.5 方法的准确度 54 4.3.6 稳定性试验 54 4.4 数据处理 54 4.5 HPLC法测定辣椒碱实验方案设计 54-56 4.5.1 HPLC法测定辣椒碱检测条件的确定 54 4.5.2 HPLC法测定辣椒碱的标准曲线的绘制 54-55 4.5.3 HPLC法的精密度和重现性 55-56 4.5.4 HPLC法的准确度 56 4.5.5 HPLC法的稳定性 56 4.5.6 干红辣椒原料中辣椒碱含量的测定 56 4.6 结果与讨论 56-57 4.7 辣椒红色素色价测定实验方案设计 57-60 4.7.1 试验主要材料和设备 57 4.7.1.1 材料 57 4.7.1.2 设备 57 4.7.2 辣椒红色素色价的测定 57-60 4.7.2.1 辣椒红色素待测液的配制 57 4.7.2.2 辣椒红色素色价的测定方法 57-60 第五章 辣椒碱镇痛功能研究 60-72 5.1 辣椒碱的镇痛机理研究 60 5.2 辣椒碱镇痛作用机制 60-61 5.2.1 辣椒碱受体及其作用机理 60-61 5.2.2 离子通道和离子流 61 5.2.3 神经肽释放 61 5.3 辣椒碱镇痛功能的应用 61-62 5.3.1 临床上应用辣椒碱的现状 61-62 5.3.2 不良反应 62 5.3.3 临床应用的研究方向 62 5.3.3.1 与其他药物联合应用 62 5.3.3.2 改变给药方式 62 5.3.3.3 选择辣椒碱的衍生物 62 5.4 辣椒碱镇痛功能研究实验设计方案 62-65 5.4.1 小鼠扭体实验的筛选 62-63 5.4.2 不同醋酸浓度对小鼠扭体实验的影响 63 5.4.3 不同室温对小鼠扭体实验的影响 63 5.4.4 不同性别小鼠对扭体实验的影响 63 5.4.5 结果与讨论 63-64 5.4.5.1 不同醋酸浓度对小鼠扭体实验的影响 63-64 5.4.5.2 不同环境温粗对小鼠扭体实验的影响 64 5.4.6 结论 64-65 5.5 小鼠扭体实验方案设计 65-67 5.5.1 小鼠扭体实验 65 5.5.2 材料和试剂 65-66 5.5.2.1 材料 65 5.5.2.2 辣椒碱注射液的配制 65-66 5.5.3 扭体实验的步骤 66 5.5.4 辣椒碱的镇痛率计算公式 66-67 5.5.5 结果与讨论 67 5.6 辣椒碱对吗啡成瘾小鼠戒断作用的实验 67-72 5.6.1 材料和试剂 67-68 5.6.2 吗啡成瘾小鼠模型的建立 68-69 5.6.2.1 观察指标 68 5.6.2.2 统计学方法 68-69 5.6.3 辣椒碱对吗啡成瘾小鼠自主活动的影响 69-70 5.6.4 辣椒碱对吗啡成瘾小鼠体重的影响 70 5.6.5 辣椒碱对吗啡成瘾小鼠自主活动的影响 70-71 5.6.6 辣椒碱对吗啡成瘾小鼠跳跃次数的影响 71 5.6.7 结果与讨论 71-72 参考文献 72-76 致谢 76-78 附件:硕士期间发表的论文 78
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