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rhBMP-2用于兔腰椎融合过程中相关因子的表达

作 者: 王磊磊
导 师: 金格勒
学 校: 新疆医科大学
专 业: 外科学
关键词: 重组人骨形态发生蛋白-2 转化生长因子β 胰岛素生长因子Ⅰ 肿瘤坏死因子α 实时荧光定量逆转录聚合酶链反应
分类号: R687.3
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
下 载: 3次
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内容摘要


目的:定量分析重组人骨形态发生蛋白-2用于兔腰椎融合过程中不同时间点关键因子转化生长因子β胰岛素生长因子Ⅰ肿瘤坏死因子α的基因表达水平,并探讨人骨形态发生蛋白-2与转化生长因子β、胰岛素生长因子Ⅰ及肿瘤坏死因子α在骨愈合过程中的相互关系。方法:新西兰大白兔60只,随机分为3组(自体骨组、复合骨组、异体骨组),三组兔腰5、6椎体横突之间分别植入自体骨、重组人骨形态发生蛋白-2/异体骨复合骨及异体骨,术后7d,14d,21d,28d,35d,分别取三组腰5、6椎体横突间融合骨痂,应用实时荧光定量RT-PCR检测转化生长因子β、胰岛素生长因子Ⅰ及肿瘤坏死因子α的基因表达量。结果:转化生长因子β的表达:术后第7d,复合骨组的表达低于自体骨组,但差异无显著性意义(P>0.05)。复合骨组转化生长因子βmRNA表达量于术后第14d高于自体骨组(P<0.05)。术后21d,三组的表达量均达到峰值,且复合骨组(3.1163±0.1051)高于自体骨组(2.2349±0.2822)及异体骨组(1.3340±0.2795)(P<0.05)。术后28 d和35d,三组转化生长因子β的表达量均开始降低,但复合骨组仍均高于自体骨组和异体骨组(P<0.05);胰岛素生长因子Ⅰ的表达:复合骨组胰岛素生长因子Ⅰ表达量在术后7d时低于自体骨组,且差异具有统计学意义(P<0.05),但其增长速度高于自体骨组,并于术后21d高于自体骨组(P<0.05)。术后28d,三组胰岛素生长因子Ⅰ的表达量均达到峰值,复合骨组表达量(4.2720±0.4293)高于自体骨组(2.6645±0.1702)和异体骨组(1.6034±0.1704),差异具有统计学意义(P<0.05)。术后35d,复合骨组胰岛素生长因子Ⅰ的表达量有所下降,但仍均高于自体骨组和异体骨组(P<0.05);肿瘤坏死因子αmRNA的表达:术后7d,14d,21d及28d,复合骨组肿瘤坏死因子αmRNA低于自体骨组,但差异无统计学意义(P>0.05),同时复合骨组和异体骨组的表达量均低于异体骨组,且差异具有统计学意义(P<0.05)。术后35d,三组肿瘤坏死因子α的表达量均达到峰值,此时复合骨组(1.9714±0.2719)和自体骨组(2.6911±0.1299)肿瘤坏死因子α的表达量均低于异体骨组(3.4902±0.3664),差异具有统计学意义(P<0.05),但是自体骨组合复合骨组之间仍无统计学差异。结论:重组人骨形态发生蛋白-2/异体骨复合骨是一种良好的骨移植材料,其能缓慢,持续,稳定的释放重组人骨形态发生蛋白-2,一方面有效地促进了转化生长因子f3及胰岛素生长因子Ⅰ的表达,另一方面重组人骨形态发生蛋白-2的干预也下调了肿瘤坏死因子α的表达,从而更好地发挥诱导成骨效能。

全文目录


摘要  7-9
Abstract  9-11
前言  11-13
研究内容与方法  13-24
  1 实验动物  13
  2 骨移植材料制备  13-14
  3 技术路线图  14-15
  4 实验设计  15
  5 实验模型  15-16
  6 标本采集  16
  7 总RNA的提取及鉴定  16-18
  8 DNase Ⅰ处理除去基因组DNA  18-19
  9 cDNA合成  19-20
  10 Real time PCR定量检测  20-24
结果  24-31
讨论  31-42
小结  42-43
致谢  43-44
参考文献  44-50
综述  50-56
  参考文献  54-56
攻读硕士学位期间发表的学术论文  56-57
导师评阅表  57

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中图分类: > 医药、卫生 > 外科学 > 骨科学(运动系疾病、矫形外科学) > 矫形外科手术学 > 骨骼手术
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