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健脾止遗片药物中有效成分的研究

作　者: 刘伟
导　师: 任慧霞
学　校: 山东大学
专　业: 微生物与生化药学
关键词: 尿失禁健脾止遗片血管活性肠肽鸡肠酶联免疫吸附法
分类号: R286.0
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 8次
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内容摘要

健脾止遗片是国家批准的用于治疗小儿遗尿症的中成药,主要成分是鸡肠和鸡内金,临床已应用多年,具有良好的效果。该药虽批准用于小儿遗尿症,但近些年,不少中老年尿失禁患者也使用,同样也取得满意效果。由健脾止遗片的基础研究得知,鸡肠用于治疗尿失禁,我国许多古代中医药书籍如《本经》、《别录》、《本草纲目》等都有记载,现代药学研究发现鸡肠提取物可调节兔膀胱逼尿肌和括约肌的收缩,使中枢对膀胱的传入冲动感知更为敏捷,但其有效成分一直未知,前期虽然对其成分进行了初步分离,发现有以上生物学功能的物质是一些小分子的肽类,究竟是何种肽?仍然是个迷。因此本课题的目的是对健脾止遗片中有效成分进行提取、分离纯化、分析测定。进一步确定健脾止遗片的有效成分,了解其临床疗效的物质基础,研究提取物和各分离组分对家兔膀胱括约肌的作用、血管活性肠肽的含量。以有效成分为指标研究鲜鸡肠和干鸡肠的提取工艺,比较和优化成产工艺条件,探讨鸡全肠不同部位、不同提取条件对血管活性肠肽的含量的影响。本课题参照健脾止遗片的生产工艺对鸡肠提取物用一定浓度的醇溶液、SephadexG-10柱层析分离,用酶联免疫吸附法跟踪测定其中血管活性肠肽的含量,并采用肌张能活性测定方法分析各分离组分对家兔膀胱括约肌的作用。结果提取物经柱层析分离得到七个洗脱峰,只第六个峰中含有血管活性肠肽：第二个峰对家兔膀胱括约肌具有强烈的收缩作用,第六个峰使家兔膀胱括约肌肌条收缩的振幅和频率都减小,这一结果与血管活性肠肽在膀胱中作为抑制性神经递质的研究一致,确定了血管活性肠肽为健脾止遗片的有效成分之一。本课题用酶联免疫吸附法考察了考察了鸡肠加工处理条件的合理性,比较了鸡肠不同部位血管活性肠肽的含量及不同处理方法对鸡肠提取物中血管活性肠肽含量的影响。结果表明鸡肠全长均含有丰富的VIP,在鸡肠药用加工处理时可以不必区分各部位,用鸡肠全长即可；本研究结果正明VIP对热较稳定,提取工艺采用加热提取比较合理,即可灭活某些相关的酶,避免破坏相关活性肽,又保证了VIP的提取率；研究结果提示应注意避免在酸性条件下提取,否则VIP将全部被破坏。本课题以血管活性肠肽的含量等为评定指标采用正交设计对健脾止遗片生产中的鸡肠提取工艺进行了优化,并对鲜鸡肠与干鸡肠提取工艺进行了比较,结果优化出的最佳鲜鸡肠提取工艺条件为：溶剂用量2倍,提取2次,每次1h。在此工艺条件下,鲜鸡肠与干鸡肠提取效果相当,鲜鸡肠提取工艺可代替干鸡肠提取工艺。本课题研究结果一是阐明了中医用鸡肠治疗小孩尿床的机理,二是明确了健脾止遗片中的活性成分,同时也为中药—健脾止遗片药物的生产工艺的改进、质量标准的修改、制剂的改进提出了理论依据和实验数据。

全文目录

中文摘要  6-8
ABSTRACT  8-10
符号说明  10-11
第一章前言  11-29
  1 尿失禁的分类  11-13
  2 尿失禁的病因  13-15
  3 尿失禁的治疗  15-21
  4 健脾止遗片的研究进展  21
  5 血管活性肠肽的生物学功能  21-24
  6 神经肽在尿失禁中的研究进展  24-26
  7 鸡肠、健脾止遗片与血管活性肠肽  26-28
  8 本课题主要研究内容和解决的问题  28-29
第二章鸡肠中血管活性肠肽的提取与测定  29-33
  1 材料  29-30
  2 方法  30
  3 结果  30-31
  4 讨论  31-33
第三章健脾止遗片中血管活性肠肽的分离纯化及其对家兔膀胱括约肌作用的研究  33-42
  1 材料  33
  2 方法  33-36
  3 结果  36-40
  4 讨论  40-42
第四章健脾止遗片提取工艺的研究  42-47
  1 材料  42
  2 方法  42-43
  3 结果  43-45
  4 讨论  45-47
第五章课题总结及展望  47-49
  1 课题总结  47-48
  2 课题展望  48-49
参考文献  49-53
致谢  53-54
攻读学位期间发表的学术论文目录  54-55
学位论文评阅及答辩情况表  55

健脾止遗片药物中有效成分的研究

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