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不同发育阶段WHBE兔红细胞免疫特性研究

作　者: 潘永明
导　师: 张才乔；陈民利
学　校: 浙江大学
专　业: 基础兽医
关键词: WHBE兔红细胞免疫红细胞膜免疫调控抗氧化抗衰老抗肿瘤日本大耳白兔比较医学
分类号: S852.4
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要

本文通过对不同发育阶段白毛黑眼(WHBE)兔外周血和骨髓红细胞免疫学的变化研究,结合红细胞膜结构和功能、红细胞免疫调控淋巴细胞、自然杀伤(NK)细胞活性与粘附肿瘤细胞能力等指标,探讨红细胞免疫与衰老、肿瘤的关系,并与日本大耳白兔比较,揭示WHBE兔红细胞功能的潜在特性,为WHBE兔在生物医学研究领域中的应用提供实验依据。研究结果：(1) WHBE兔外周血和骨髓红细胞C3b受体花环率(E-C3bRR)、红细胞免疫粘附促进因子(RFER)与年龄呈显著负相关,而红细胞免疫复合物花环率(E-ICR)、循环免疫复合物(CIC)和红细胞免疫粘附抑制因子(RFIR)与年龄呈显著正相关；且老年WHBE兔骨髓E-C3bRR和RFER活性明显高于日本大耳白兔。说明机体衰老引起WHBE兔红细胞免疫功能增龄性降低,且WHBE兔红细胞免疫功能略高于日本大耳白兔。(2) WHBE兔红细胞膜超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)、Na+-K+-ATPase、Ca2+-Mg2+-ATPase、谷草转氨酶(GOT)、唾液酸酶(SA)、胆固醇(CHO)、乳酸(Lac)、高密度脂蛋白(HDL-C)和低密度脂蛋白(LDL-C)与年龄和红细胞免疫功能密切相关,日本大耳白兔的变化规律亦类似,说明WHBE兔衰老过程中体内自由基生成增多,抗氧化能力下降以及糖、脂代谢的紊乱,导致红细胞结构和形态的损害,影响红细胞功能的发挥,最终引起机体红细胞免疫功能的降低。(3)青年WHBE兔红细胞促淋巴细胞增殖能力(SI)明显高于幼年和老年组；WHBE兔红细胞促NK细胞活性随增龄性升高,并与红细胞免疫功能显著相关,且老年雌性WHBE兔红细胞促NK细胞活性的能力明显高于日本大耳白兔,说明红细胞参与调控淋巴细胞和NK细胞活性,其中青年动物的红细胞能更好地促进淋巴细胞的免疫调控,而老年动物的免疫活性细胞较多地处于预激活状态,对刺激显示良好的免疫应答能力。(4) WHBE兔红细胞免疫粘附肿瘤细胞的能力(EIAT)随增龄而降低,并与CIC和红细胞免疫功能显著相关,且老年WHBE兔EIAT显著高于日本大耳白兔,说明WHBE兔红细胞具有粘附、识别和杀伤肿瘤细胞的作用,且与红细胞免疫功能的降低和CIC的升高密切相关。以上研究结果表明,WHBE兔和日本大耳白兔红细胞免疫功能既有随增龄性变化规律的共性,又有其品种间的差异,且WHBE兔红细胞免疫功能略高于日本大耳白兔,表明WHBE兔具有独特的红细胞生物学特性,为WHBE兔在生物医学研究领域中的应用尤其以红细胞为对象的研究中提供良好的实验材料和生物学参考数据,同时为人类衰老和红细胞免疫低下的研究奠定理论基础。

全文目录

中文摘要  10-12
Abstract  12-14
主要缩略词表  14-16
第一章文献综述兔红细胞免疫学研究及应用进展  16-24
  1 兔红细胞免疫功能的指标  17
  2 兔红细胞免疫功能与人类疾病或疾病动物模型  17-20
  3 增强兔红细胞免疫功能的实验研究  20-21
  4 小结与展望  21-22
  5 本研究的目的、意义和主要内容  22-24
    5.1 本研究的目的、意义  22-23
    5.2 本研究的主要内容  23-24
第二章 WHBE兔红细胞免疫功能研究  24-35
  1 材料  24-25
    1.1 实验动物和饲养条件  24-25
    1.2 主要仪器及试剂  25
  2 方法  25-28
    2.1 血样的采集  25-26
    2.2 外周血和骨髓红细胞悬液制备  26
    2.3 致敏、未致敏酵母菌悬液制备  26
    2.4 外周血和骨髓红细胞C_(3b)受体花环率及免疫复合物花环率测定  26
    2.5 外周血红细胞免疫粘附调节因子活性测定  26-27
    2.6 外周血血清和骨髓血浆循环免疫复合物测定  27
    2.7 数据统计学处理  27-28
  3 结果  28-32
    3.1 WHBE兔外周血和骨髓红细胞免疫粘附能力的测定  28-30
    3.2 WHBE兔外周血红细胞免疫调节因子活性测定  30
    3.3 WHBE兔外周血血清和骨髓血浆循环免疫复合物测定  30-31
    3.4 年龄与红细胞免疫功能的相关性  31-32
  4 讨论  32-35
第三章 WHBE兔红细胞膜结构及功能的影响  35-48
  1 材料  35-36
    1.1 实验动物和饲养条件  35
    1.2 主要仪器及试剂  35-36
  2 方法  36-37
    2.1 血样的采集  36
    2.2 红细胞收集和红细胞膜的制备  36
    2.3 指标测定  36
    2.4 数据统计学处理  36-37
  3 结果  37-44
    3.1 WHBE兔红细胞膜超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量的测定  37-38
    3.2 WHBE兔红细胞膜谷胱甘肽过氧化物酶活性的测定  38-39
    3.3 WHBE兔红细胞膜ATP酶活性的测定  39-40
    3.4 WHBE兔红细胞膜谷草转氨酶的测定  40-41
    3.5 WHBE兔血清唾液酸酶含量的测定  41-42
    3.6 WHBE兔乳酸和血糖的测定  42
    3.7 WHBE兔血清甘油三酯和胆固醇含量的测定  42-43
    3.8 WHBE兔血清高密度脂蛋白和低密度脂蛋白含量的测定  43
    3.9 年龄、红细胞免疫功能与红细胞膜结构及功能的相关性  43-44
  4 讨论  44-48
第四章 WHBE兔红细胞调控淋巴细胞、NK细胞活性研究  48-54
  1 材料  48-49
    1.1 实验动物和饲养条件  48
    1.2 主要仪器及试剂  48-49
  2 方法  49-50
    2.1 实验兔红细胞促淋巴细胞增殖转化试验  49
    2.2 实验兔红细胞促NK细胞活性试验  49-50
    2.3 数据统计学处理  50
  3 结果  50-52
    3.1 不同发育阶段WHBE兔红细胞促淋巴细胞增殖转化能力的影响  50-51
    3.2 不同发育阶段WHBE兔红细胞促NK细胞活性的影响  51-52
    3.3 年龄、红细胞免疫功能与WHBE兔红细胞促淋巴细胞增殖转化能力、红细胞促NK活性的相关性  52
  4 讨论  52-54
第五章 WHBE兔红细胞免疫粘附肿瘤细胞能力的研究  54-59
  1 材料  54
    1.1 实验动物和饲养条件  54
    1.2 主要仪器及试剂  54
  2 方法  54-56
    2.1 红细胞免疫粘附肿瘤细胞实验  54-55
    2.2 数据统计学处理  55-56
  3 结果  56-58
    3.1 不同发育阶段WHBE兔红细胞免疫粘附肿瘤细胞能力测定  56
    3.2 年龄、红细胞免疫功能与EIAT的关系  56-58
  4 讨论  58-59
结论  59-60
本研究创新点及后续研究工作  60-61
参考文献  61-67
攻读硕士学位期间发表和录用的学术论文  67-68
致谢  68

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