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黄粉虫体内脂类抗菌活性物质及凝集素的研究

作　者: 耿俊丽
导　师: 王国红
学　校: 福建师范大学
专　业: 动物学
关键词: 黄粉虫 脂类抗菌物 抗菌活性 凝集素 凝集活性
分类号: S899.9
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 64次
引　用: 3次
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内容摘要


通过不同溶剂:丙酮、石油醚、无水乙醇、苯、乙酸乙酯对黄粉虫幼虫和成虫匀浆物进行浸泡提取,并用5种指示菌对提取物进行抗菌效果检测,结果表明乙酸乙酯提取物抗菌效果最好。用乙酸乙酯对黄粉虫幼虫和成虫体内的抗菌物质进行提取,利用硅胶柱层析法和薄层层析法对粗提物进行分离,利用圆形纸片扩散抑菌法检测幼虫和成虫粗提物及各步纯化物对11种细菌的抗菌活性;利用菌丝生长速率法检测幼虫和成虫粗提物及各步纯化物对4种真菌的抗菌活性。结果表明:两类虫体的粗提物及各步纯化物对11种细菌和4种真菌均有显著抑菌效果,其中以乙醇洗脱组分的抑菌效果最强,对两类虫体的乙醇洗脱组分进行薄层层析,各筛选出一条抗细菌和真菌活性最强的条带,用气相色谱-质谱法（GC-MS）确定各条带的主要化学成分,并分析其抗菌机理。这些都为黄粉虫体内脂类抗菌活性物质的研究开发提供了理论依据,为寻找新型抗菌药物提供了重要来源。以11种人体及动物血红细胞检测黄粉虫幼虫、蛹、成虫提取液的凝集活力,并对其理化性质进行检测,结果显示三种虫态体内的凝集素粗品凝集活性存在差异,但都具有耐酸性、热敏感性、Zn2+、Cu2+依赖性、并且受L-鼠李糖与果糖溶液的抑制。采用（20%-30%）硫酸铵沉淀、DEAE-Sepharose离子交换层析、SephacrylS-200-HR分子筛层析法对黄粉虫幼虫体内的凝集素进行纯化,经不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳显示为单一条带,SDS-PAGE测得亚基分子量为76KDa,SephacrylS-200-HR凝胶过滤层析法测得其相对分子量为238KDa。通过对黄粉虫幼虫、蛹、成虫三种虫态的凝集素粗品凝集红细胞的特性及理化性质的研究,揭示了凝集反应发生的机理。并从黄粉虫幼虫中分离纯化出凝集素,对其进行较为详细的性质分析,这些都为以后对黄粉虫体内凝集素的开发利用提供了理论基础。

全文目录


中文摘要  2-3
Abstract  3-5
中文文摘  5-8
目录  8-10
绪论  10-20
  一、昆虫免疫的研究进展及应用前景  10-14
    1、细胞免疫  10
    2、体液免疫  10-13
    3、昆虫体内免疫物质的诱导  13
    4、昆虫免疫应用前景  13-14
  二、黄粉虫研究进展  14-17
    1、黄粉虫简介  15
    2、黄粉虫营养价值评定及开发利用  15-16
    3、黄粉虫化学防御系统的研究进展  16
    4、黄粉虫免疫酶的研究进展  16
    5、黄粉虫体内甲壳素和壳聚糖的研究进展  16-17
    6、黄粉虫抗菌肽研究进展  17
  三、本研究的目的和意义  17-20
第一章 黄粉虫脂类抗菌活性物质的研究  20-48
  1.1 前言  20-21
  1.2 材料和方法  21-25
    1.2.1 材料  21-22
    1.2.2 试验方法  22-25
  1.3 试验结果与分析  25-44
    1.3.1 不同溶剂提取物筛选的结果  25-26
    1.3.2 黄粉虫幼虫和成虫脂类物质抗细菌活性测定及化学成分分析  26-35
    1.3.3 黄粉虫幼虫和成虫脂类提取物抗真菌活性测定及化学成分分析  35-44
  1.4 讨论  44-48
    1.4.1 脂类抗菌物质的广谱抗菌性  44-45
    1.4.2 提取剂对提取物抗菌效果的影响  45
    1.4.3 柱层析纯化对抗菌效果的影响及原因分析  45-46
    1.4.4 黄粉虫幼虫和成虫抗菌活性物质化学成分的差异  46
    1.4.5 黄粉虫幼虫和成虫抗真菌活性物质化学成分的差异  46-48
第二章 黄粉虫凝集素的分离纯化及理化性质  48-64
  2.1 前言  48
  2.2 材料与方法  48-52
    2.2.1 试验材料  48-49
    2.2.2 试验方法  49-52
  2.3 结果与分析  52-62
    2.3.1 黄粉虫幼虫、蛹、成虫提取液样品中蛋白质含量测定  52
    2.3.2 动物红细胞凝集作用  52-53
    2.3.3 黄粉虫三种虫态的凝集素理化性质研究  53-56
    2.3.4 黄粉虫凝集素的分离纯化及部分理化性质检测  56-62
  2.4 讨论  62-64
    2.4.1 黄粉虫三个虫态的凝集素对不同类型红细胞的凝集  62
    2.4.2 有关黄粉虫三个虫态的凝集素理化性质的探讨  62-63
    2.4.3 凝集素的分离纯化  63-64
第三章 结论  64-66
  一.本试验取得的进展和创新点  64-65
  二.展望  65-66
附录  66-72
参考文献  72-82
攻读学位期间承担的科研任务与主要成果  82-84
致谢  84-85
个人简历  85

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中图分类: > 农业科学 > 畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂 > 养蜂、益虫饲养 > 益虫饲养 > 其他
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