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柑橘黄酮抗氧化及协同作用研究

作　者: 盛雪飞
导　师: 陈健初
学　校: 浙江大学
专　业: 食品安全
关键词: 抗坏血酸抗氧化性协同增效作用抗氧化活性茶多酚抗氧化能力天然抗氧化剂复合抗氧化剂协同作用机理天然提取物
分类号: R285
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

近年来研究表明,柑橘幼果中黄酮类化合物种类丰富,含量较高,但每年6月份有许多柑橘幼果脱落,为了综合利用柑橘幼果落果资源,用乙醇溶液提取四种柑橘幼果中的黄酮,制备干燥粉状黄酮提取物,分析提取物中黄酮类化合物的种类和含量,并用四种抗氧化体系分析其抗氧化活性,研究不同浓度七种柑橘黄酮单体的抗氧化活性以及不同浓度单体间两两组合的协同抗氧化效应,最后对柑橘黄酮提取物、黄酮单体与茶多酚、抗坏血酸之间的抗氧化协同增效作用进行研究。(1)选用胡柚,瓯柑,椪柑,温州蜜橘四种柑橘幼果落果作为实验原料,制备柑橘黄酮提取物,研究了其中黄酮类化合物的种类和含量。结果显示,不同品种柑橘黄酮提取物中含有黄酮类化合物的种类和含量各不相同。总黄酮含量大小顺序为:胡柚(385.61 mg/g DW)＞瓯柑(228.57 mg/g DW)＞椪柑(161.04 mg/gDW)＞温州蜜橘中(67.35 mg/g DW),胡柚中含量最高的黄酮为柚皮苷(220.87mg/g DW),瓯柑中为新橙皮苷(121.3 mg/g DW),椪柑中为橙皮苷(59.3 mg/gDW),温州蜜橘中为橙皮苷(49.74 mg/g DW),温州蜜橘黄酮提取物得率最高。用DPPH,FRAP,ABTS,TBARS四种抗氧化体系对四种柑橘幼果黄酮提取物的抗氧化活性进行评价,四种体系中,柑橘幼果黄酮提取物在100-2000μg/ml浓度下,抗氧化活性随着浓度增加而增强。FRAP,ABTS,TBARS三种抗氧化体系中,四种柑橘黄酮提取物的抗氧化活性顺序为:胡柚＞瓯柑＞椪柑＞温州蜜橘。与提取物中总黄酮的含量顺序一致。DPPH体系中,四种柑橘黄酮提取物的抗氧化活性顺序为:胡柚＞椪柑＞瓯柑＞温州蜜橘。可见不同体系抗氧化活性有差别。(2)用DPPH,FRAP两种抗氧化体系评价不同浓度七种柑橘黄酮单体(槲皮素,芦丁,橙皮素,橙皮苷,新橙皮苷,柚皮素,柚皮苷)的抗氧化能力,并选用其中六种黄酮单体(槲皮素,芦丁,橙皮素,橙皮苷,柚皮素,柚皮苷)不同浓度组合分析抗氧化协同增效作用。结果显示,DPPH,FRAP两体系中,在0-1.0 mmol/l浓度范围内,七种柑橘黄酮单体的抗氧化活性随着浓度的增加而增强。七种黄酮单体的抗氧化活性顺序都为:槲皮素＞芦丁＞新橙皮苷＞橙皮素＞橙皮苷＞柚皮素＞柚皮苷。黄酮糖苷与对应的苷元的抗氧化活性相近,且苷元的抗氧化活性大于糖苷。DPPH体系中,分析不同浓度六种黄酮单体抗氧化协同效应,发现槲皮素和芦丁不仅本身具有很好的抗氧化活性,与其他黄酮单体组合时,具有较好的协同增效作用。(3)用DPPH,FRAP两种抗氧化体系评价不同浓度胡柚和瓯柑两种柑橘黄酮提取物与不同浓度的茶多酚、抗坏血酸之间的抗氧化协同作用,以及七种柑橘黄酮单体与不同浓度的茶多酚、抗坏血酸之间的抗氧化协同作用。结果显示,两体系中,天然抗氧化剂之间存在一定抗氧化协同增效作用。抗氧化协同增效作用与抗氧化体系,抗氧化物质本身的抗氧化能力,以及抗氧化物质的有效浓度有关。在DPPH体系中,胡柚黄酮提取物只在低浓度(400μg/ml)时与茶多酚表现抗氧化协同增效作用,瓯柑黄酮提取物与茶多酚之间在各个浓度下无协同增效性。在FRAP体系中,两种柑橘黄酮提取物与茶多酚之间在各个浓度下均表现出不同的抗氧化协同增效性。提取物在高浓度(1600μg/ml)下增效性更明显(P＜0.05)。在DPPH体系中,胡柚黄酮提取物只在低浓度(400μg/ml)时与抗坏血酸表现抗氧化协同增效作用,瓯柑黄酮提取物与抗坏血酸之间在各个浓度下均表现抗氧化协同增效性。在FRAP体系中,两种柑橘幼果黄酮提取物在高浓度(1600μg/ml)时与抗坏血酸组合均表现良好的抗氧化协同作用(P＜0.05)。研究黄酮单体与茶多酚,抗坏血酸之间的抗氧化协同作用时发现,在DPPH体系中,槲皮素和芦丁这两种高效抗氧化剂与茶多酚之间未表现出协同增效作用,另外五种黄酮单体与茶多酚组合均表现出一定抗氧化协同效应。在FRAP体系中,槲皮素和芦丁与茶多酚表现出显著的协同增效作用(P＜0.05)。其他几种单体与茶多酚之间的协同作用则表现的不明显。黄酮单体与抗坏血酸组合,在两种体系中都表现出良好的协同增效作用(P＜0.05),且随着抗氧化剂的有效浓度增高,协同增效作用越明显。

全文目录

致谢  4-6
摘要  6-8
ABSTRACT  8-11
目录  11-13
第一章文献综述  13-34
  1.1 概述  13
  1.2 天然抗氧化剂研究进展  13-19
    1.2.1 抗坏血酸  14-15
    1.2.2 VE  15-16
    1.2.3 茶多酚  16
    1.2.4 类胡萝卜素  16-17
    1.2.5 天然植物提取物  17-19
  1.3 黄酮类化合物的抗氧化作用研究进展  19-22
    1.3.1 黄酮类化合物抗氧化作用机理  19-20
    1.3.2 黄酮类抗氧化剂的研究现状  20-22
  1.4 柑橘中黄酮类化合物的种类和分布  22-23
  1.5 体外评价抗氧化能力的方法  23-25
    1.5.1 DPPH法  23-24
    1.5.2 FRAP法  24
    1.5.3 ABTS法  24-25
    1.5.4 TBARS法  25
  1.6 不同抗氧化剂之间的协同作用机理,以及其研究进展  25-32
    1.6.1 抗氧化剂之间协同作用机理  26-27
    1.6.2 抗氧化剂协同作用的评价方法  27-28
    1.6.3 天然抗氧化剂在化学体系中协同作用的研究进展  28-31
    1.6.4 天然抗氧化剂在生物体系中协同作用的研究进展  31-32
  1.7 本文研究目的、意义、研究内容  32-34
    1.7.1 研究目的、意义  32
    1.7.2 研究内容  32-34
第二章柑橘幼果黄酮提取物制备分析及其抗氧化活性研究  34-46
  2.1 材料与方法  34-38
    2.1.1 材料  34
    2.1.2 主要试剂与设备  34-35
    2.1.3 柑橘幼果黄酮提取物的制备方法  35-36
    2.1.4 HPLC法分析柑橘幼果黄酮提取物中黄酮类化合物的种类和含量  36
    2.1.5 四种抗氧化体系测定四种柑橘幼果黄酮提取物抗氧化特性  36-38
  2.2 结果与分析  38-44
    2.2.1 不同柑橘幼果黄酮提取物制备得率  38-39
    2.2.2 柑橘幼果原料以及黄酮提取物中黄酮的种类和含量  39-41
    2.2.3 DPPH体系中不同浓度四种柑橘幼果黄酮提取物的抗氧化能力  41-42
    2.2.4 FRAP体系中不同浓度的四种柑橘幼果黄酮提取物的抗氧化能力  42-43
    2.2.5 ABTS体系中不同浓度的四种柑橘幼果黄酮提取物的抗氧化能力  43
    2.2.6 TBARS体系中不同浓度的四种柑橘幼果黄酮提取物的抗氧化能力  43-44
  2.3 小结与讨论  44-46
第三章黄酮单体抗氧化活性及单体间协同效应  46-54
  3.1 材料与方法  46-47
    3.1.1 材料  46
    3.1.2 主要试剂与设备  46
    3.1.3 抗氧化实验方法  46-47
    3.1.4 黄酮单体间抗氧化协同效应的研究设计方法  47
    3.1.5 抗氧化协同作用分析方法  47
  3.2 结果与分析  47-52
    3.2.1 DPPH体系中不同浓度七种柑橘黄酮单体抗氧化活性  47-49
    3.2.2 FRAP体系中七种柑橘黄酮单体抗氧化能力  49-50
    3.2.3 DPPH体系中六种柑橘黄酮单体间抗氧化协同效应  50-52
  3.3 小结与讨论  52-54
第四章黄酮提取物及黄酮单体与茶多酚、抗坏血酸之间的抗氧化协同效应  54-67
  4.1 材料与方法  54-55
    4.1.1 材料  54
    4.1.2 主要试剂与设备  54
    4.1.3 抗氧化实验方法  54
    4.1.4 柑橘黄酮提取物及黄酮单体与茶多酚、抗坏血酸的抗氧化协同作用研究设计  54-55
    4.1.5 统计分析方法  55
  4.2 结果与分析  55-64
    4.2.1 两种抗氧化体系中不同浓度茶多酚和抗坏血酸的抗氧化能力  55-56
    4.2.2 DPPH体系中两种柑橘幼果黄酮提取物与茶多酚的抗氧化协同效应  56-58
    4.2.3 DPPH体系中两种柑橘幼果提取物与抗坏血酸的抗氧化协同效应  58-60
    4.2.4 FRAP体系中两种柑橘幼果提取物与茶多酚的抗氧化协同效应  60-61
    4.2.5 FRAP体系中两种柑橘幼果提取物与抗坏血酸的抗氧化协同效应  61-62
    4.2.6 DPPH体系中柑橘黄酮单体与茶多酚和抗坏血酸的抗氧化协同效  62-63
    4.2.7 FRAP体系中柑橘黄酮单体与茶多酚和抗坏血酸的抗氧化协同效应  63-64
  4.3 小结与讨论  64-67
结论与展望  67-70
参考文献  70-78
作者简历  78
研究生期间主要成果  78

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