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高压氧对大鼠颅脑爆震伤后皮层脑组织自噬现象变化的实验研究

作　者: 汤宏
导　师: 刘家传
学　校: 安徽医科大学
专　业: 外科学
关键词: 大鼠爆震伤模型自噬高压氧凋亡皮质
分类号: R651.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

背景颅脑爆震伤是现代战争及日常生活中常见的外伤类型,也是目前国内外军事医学研究的重点内容。颅脑爆震伤后神经细胞的水肿、变性、坏死等一系列变化,使得颅脑损伤机制错综复杂。自噬(autophagy)是细胞的一种高度保守降解途径,将细胞内无用的大分子如长寿命蛋白质、细胞器等运送至溶酶体,降解成有生物活性的小分子,并将这些小分子重新利用和维持细胞内环境稳定的过程。近年来发现自噬在颅脑损伤后表达增强,可能与颅脑损伤后神经元自我保护作用有关。高压氧是一种无创性治疗颅脑损伤的辅助性方法,其疗效是肯定的,但其具体作用机制至今尚不清楚。本课题拟建立大鼠颅脑爆震伤模型,研究伤后及高压氧治疗后自噬的变化,并且观察高压氧治疗对脑皮质神经细胞自噬与凋亡的影响。目的(1)建立大鼠颅脑爆震伤模型；(2)大鼠颅脑爆震伤后脑皮质自噬表达变化的研究；(3)高压氧治疗对大鼠颅脑爆震伤后脑皮质自噬与凋亡的影响。方法(1)通过600mgTNT当量的电雷管在垂直距离8cm、10cm、12cm处进行爆炸,于伤后24h行头颅MRI检查,6h、24h、3d、7d行检测损伤区光镜、电镜下病理变化,选择合适的爆炸距离,建立稳定的动物模型；(2)用600mgTNT电雷管在大鼠头部正上方垂直距离12cm处爆炸,于伤后6h、24h、3d、7d分别采用RT-PCR和Western blotting方法检测脑皮层中Beclin-1的表达情况；(3)用600mgTNT电雷管在大鼠头部正上方垂直距离12cm处爆炸,高压氧治疗组(HBO)分别于伤后3h、22h、及以后每天同一时间行HBO处理,分别于6h、24h、3d、7d采用RT-PCR和Western blotting方法检测皮质脑组织中Beclin-1和Caspase-3的表达情况结果(1)8cm组大鼠几乎在当天全部死亡,10cm组大鼠存活时间也较短,少有存活7天,12cm组大鼠存活时间在7天以上,且伤后24小时MRI提示挫伤区存在血肿及挫裂伤,病理学提示皮质、脑膜、脑室周围、神经元胞体、线粒体等均出现不同程度水肿；(2)在伤后6h脑皮层中Beclin-1的表达上升,伤后3d表达最强,伤后7d表达有所下降；(3)与对照组相比,Beclin-1和Caspase-3在爆震伤组及HBO组表达均增加,而HBO组中Beclin-1和Caspase-3表达则较爆震伤组有所减少。结论(1)600mgTNT电雷管在距离大鼠头部垂直12cm处可制作稳定的大鼠颅脑爆震伤模型；(2)大鼠颅脑爆震伤后,脑皮层中Beclin-1表达呈波峰状,提示自噬现象在颅脑爆震伤后增强,可能参与颅脑爆震伤神经元损伤后的应激反应；(3)高压氧通过降低细胞的自噬和凋亡表达,可能是治疗颅脑损伤的机制之一。

全文目录

缩略词表  4-6
中文摘要  6-8
Abstract  8-11
前言  11-13
第一部分大鼠颅脑爆震伤模型的建立  13-22
  1 材料与方法  13-15
  2 实验结果  15-20
  3 讨论  20-21
  4 结论  21-22
第二部分大鼠颅脑爆震伤后脑皮层自噬变化的实验研究  22-38
  1 材料与方法  22-33
  2 实验结果  33-35
  3 讨论  35-37
  4 结论  37-38
第三部分高压氧对大鼠颅脑爆震伤后皮质脑组织自噬与凋亡变化的影响  38-50
  1 材料与方法  38-45
  2 结果  45-48
  3 讨论  48-49
  4 结论  49-50
全文总结  50-51
参考文献  51-54
附录  54-55
致谢  55-56
综述自噬现象与脑损伤的研究进展  56-63
  参考文献  61-63

高压氧对大鼠颅脑爆震伤后皮层脑组织自噬现象变化的实验研究

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