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苦荞麦中黄酮类化合物分析方法的建立

作　者: 李欣
导　师: 王步军
学　校: 中国农业科学院
专　业: 农产品质量与食物安全
关键词: 苦荞麦黄酮类化合物提取纯化高效液相色谱液质联用
分类号: S517
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

苦荞麦（Tartary Buckwheat），学名“鞑靼荞麦”（Fagopyrum tararicum），为我国的特色农作物之一，主要在内蒙古、甘肃、宁夏、四川、贵州、云南、山西等地种植。苦荞麦具有很高的营养价值，其中蛋白质、脂肪、维生素及微量元素等含量均高于小麦、大米、小米、高粱、玉米等，并含有其它谷物中不具有的黄酮类化合物，这些物质在人体的生理代谢中起着极为重要的作用。本研究以四川苦荞麦为主要材料，通过对其提取、纯化、测定方法的研究讨论，旨在建立苦荞麦中黄酮类化合物的分析测定方法，为苦荞麦的深入研究打好基础并为评价苦荞麦粉及其制品的质量提供理论依据和检测手段。首先对苦荞麦中黄酮类化合物常用的四种提取方法进行比较。并对恒温水浴振荡提取和超声提取法通过各项参数的选择和优化，最终确定了恒温水浴振荡提取法最佳条件为乙醇浓度80％，料液比30：1，60℃提取3 h，超声提取法优化的提取条件为乙醇浓度80％，料液比40：1，60℃提取30 min。恒温水浴振荡提取和超声提取法两种方法在最佳优化条件下的总黄酮得率相差很小。由于超声提取法大大节省了时间，所以在本研究的后续部分都采用超声提取法对苦荞麦中黄酮类化合物进行提取。建立了用于测定苦荞麦中芦丁、槲皮素、山萘酚含量的高效液相色谱法，通过对流动相、pH、色谱柱、流速、柱温等条件的优化，最终建立了基线稳定、出峰时间、峰形、分离度理想的测定方法，并对方法进行精密度、稳定性、重复性和回收率等方法学验证，结果表明该方法用于测定苦荞麦中芦丁、槲皮素、山萘酚的含量结果稳定准确。通过静态吸附实验从三种常用于黄酮类化合物富集的大孔树脂中选择出吸附量较大、解吸较容易的HPD100型大孔树脂，再对HPD100树脂利用动态吸附实验，选择大孔树脂的工艺参数，即吸附流速为2 mL/min，洗脱条件为70 %乙醇浓度，洗脱速率3 mL/min，洗脱液体积3 BV。在该条件下通过大孔树脂富集的黄酮类化合物用于液质联用分析。利用超高效液相色谱串联质谱对苦荞麦中含有的芦丁、槲皮素、山萘酚进行确证性鉴定，初步建立了超高效液相色谱串联质谱法测定这三种物质的方法。利用高效液相色谱-飞行时间质谱对苦荞麦黄酮富集物进一步分离，对质谱图进行定性分析，得到了苦荞麦中可能含有的槲皮素-3-芸香糖双葡萄苷、山萘酚-3-芸香糖苷、金丝桃苷、槲皮素-7-O-鼠李糖苷或山萘酚-3-O-葡萄糖苷等四种黄酮类化合物。

苦荞麦中黄酮类化合物分析方法的建立

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