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酵母双杂交法对STK11羧基端互作蛋白的筛选

作　者: 陈琼琼
导　师: 施小六
学　校: 中南大学
专　业: 消化内科
关键词: STK11/LKB1 STK11/LKB1羧基端 酵母双杂交 互作蛋白
分类号: Q78
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要


PJ综合征(Peutz-Jeghers syndrome, PJS)是一种常染色体显性遗传疾病(OMIM,175200),发病率约为1/8300-280000。其主要的临床表现为胃肠道错构瘤样息肉、皮肤粘膜色素斑,故又称之为黑斑息肉综合征。本病患者的多种肿瘤易感性为其另一备受关注的主要原因。目前,PJS唯一被确认的致病基因是STK11基因(又名LKB1基因),STK11/LKB1基因位于19p13.3,整个基因跨度23kb,cDNA全长2158bp,编码区1302bp,有10个外显子和11个内含子。STK11/LKB1是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,参与了个体胚胎发育及细胞极化等重要生命活动的调控,在抑制肿瘤细胞增殖、调节细胞能量代谢等方面亦发挥了重要作用,并与P53、Wnt及AMPK等多种信号系统相关。其表达丰度在个体发育的不同阶段存在组织与时相差异性。STK11/LKB1基因大部分的致病性突变与其催化活性域的突变致使的STK11/LKB1激酶功能丧失相关,但是许多报道证实在部分PJS病人和散发肿瘤患者中,也存在STK11/LKB1羧基端的突变。STK11/LKB1羧基端非催化区是由8、9号外显子编码的,包括了309-433氨基酸,由124个残基组成的。羧基端非催化调节区域包含了异戊烯化基序。目前已验证STK11/LKB1羧基端有五个磷酸化位点：两个残基是自磷酸化位点(Thr336和Thr402),其他三个是被上游激酶磷酸化的位点(Ser325, Thr363, Ser428)。有研究发现：过表达STK11/LKB1羧基端可以干扰STK11/LKB1的功能,表明STK11/LKB1羧基端具有重要的调节作用,可能通过与下游的蛋白质相互作用来实现其调节功能,其羧基端突变可能影响了这种结合能力。本研究利用Clontech公司的第四代酵母双杂交系统MatchmakerTM Gold Yeast Two-Hybrid System初步筛查出STK11/LKB1羧基端的互作蛋白PGM1(葡萄糖磷酸变位酶1),为后续的STK11/LKB1羧基端功能的研究奠定了基础。

全文目录


中文摘要  4-5
英文摘要  5-8
英文缩略词表  8-9
第一章 前言  9-12
第二章 材料与方法  12-28
第三章 结果  28-38
第四章 讨论  38-43
第五章 结论  43-44
参考文献  44-48
综述  48-59
致谢  59

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中图分类: > 生物科学 > 分子生物学 > 基因工程（遗传工程）
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