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Flot-2在胃癌中的表达及其对胃癌细胞增殖和侵袭能力的影响

作　者: 谢定芳
导　师: 曹培国
学　校: 中南大学
专　业: 临床医学
关键词: Flot-2 胃癌增殖侵袭
分类号: R735.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

目的：研究Flot-2在胃癌中的表达及其对胃癌细胞增殖和侵袭能力的影响。方法：1.采用免疫组织化学法检测90例胃癌组织及90例癌旁组织织中Flot-2蛋白的表达情况,分析Flot-2的表达与临床病理因素、预后之间的关系。2.将Flot-2siRNA借助脂质体转入胃癌AGS及SGC7901细胞。实验分为实验组(转染Flot-2siRNA的AGS及SGC7901细胞)、阴性对照组(转染NC-siRNA的AGS及SGC7901细胞)及空白对照组(未转染的AGS及SGC7901细胞)。使用RT-PCR检测Flot-2mRNA的表达情况。运用MTT实验及Transwell侵袭实验分别观察其对细胞增殖及侵袭的情况。结果：1.与癌旁组织相比,胃癌组织中Flot-2呈高表达(P<0.05)；胃癌组织中Flot-2蛋白表达强弱与病理分级、浸润深度、有无淋巴结转移、TNM分期有关(P<0.05),并且Flot-2蛋白表达与病理分级(r=0.370,P<0.001)、浸润深度(r=0.391,P<0.001)、淋巴结转移(r=0.526,P<0.001)、TNM分期(r=0.720,P<0.001)呈正相关；单因素分析显示：Flot-2高表达组的5年生存率明显低于低表达组(P=0.000); Cox多因素分析显示：Flot-2是胃癌的独立预后因素之一(P<0.05)。2.与阴性对照组比较,Flot-2siRNA组Flot-2mRNA表达量明显下降(P<0.01)；与空白对照组及阴性对照组比较,Flot-2siRNA组细胞增殖明显受到抑制(P<0.01),细胞的侵袭能力显著下降(P<0.01)。结论：(1)胃癌组织中Flot-2蛋白的高表达与胃癌的侵袭、转移密切相关,可能成为胃癌的预后指标。(2)沉默Flot-2基因表达后,胃癌AGS和SGC7901细胞的增殖及侵袭能力减弱。

全文目录

摘要  4-6
Abstract  6-8
目录  8-10
符号说明  10-11
1 前言  11-15
2 FLOT-2在胃癌组织中的表达及其与临床病理因素、预后的关系  15-24
  2.1 引言  15
  2.2 材料与方法  15-17
    2.2.1 组织来源及临床资料  15
    2.2.2 主要试剂及器材  15-16
    2.2.3 实验方法及步骤  16-17
    2.2.4 统计学方法  17
  2.3 结果  17-21
    2.3.1 Flot-2蛋白在胃癌组织及癌旁组织中的表达  17-18
    2.3.2 胃癌组织中Flot-2蛋白表达水平与临床病理因素的关系  18-19
    2.3.3 Flot-2的表达与胃癌患者预后的关系  19-21
  2.4 讨论  21-24
3 RNA干扰技术沉默FLOT-2表达后对胃癌细胞增殖、侵袭的影响  24-41
  3.1 引言  24
  3.2 材料和方法  24-31
    3.2.1 实验材料  24-25
    3.2.2 实验方法  25-30
    3.2.3 统计学方法  30-31
  3.3 结果  31-37
    3.3.1 胃癌细胞总RNA的抽取  31
    3.3.2 Real-time PCR测定siRNA转染胃癌细胞后Flot-2 mRNA的表达水平  31-33
    3.3.3 Flot-2沉默对胃癌细胞生长、增殖的影响  33-35
    3.3.4 Flot-2沉默对胃癌细胞侵袭能力的影响  35-37
  3.4 讨论  37-41
    3.4.1 RNA干扰技术  37-38
    3.4.2 siRNA载体及转染试剂的选择  38-39
    3.4.3 Flot-2沉默对胃癌细胞生长、增殖的影响  39
    3.4.4 Flot-2沉默对胃癌细胞侵袭的影响  39-41
4 结论  41-42
参考文献  42-46
综述  46-57
  参考文献  52-57
附录  57-59
攻读硕士学位期间的研究成果  59-60
致谢  60

Flot-2在胃癌中的表达及其对胃癌细胞增殖和侵袭能力的影响

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