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维生素D对自发性高血压大鼠血压调节机制研究

作　者: 秦晓伟
导　师: 徐新娟
学　校: 新疆医科大学
专　业: 内科学
关键词: 维生素D 自发性高血压大鼠肾素-血管紧张素-醛固酮系统炎症甲状旁腺激素
分类号: R544.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

目的：为探讨维生素D长期规律用药对自发性高血压大鼠血压的影响。方法：我们选用自发性高血压大鼠20只随机分成两组，实验组给予维生素D3μg/kg溶于0.5ml丙二醇中腹腔注射，每周两次，总计12周；对照组以等容积的丙二醇腹腔注射，每周两次，总计12周。实验过程中，每周进行尾动脉无创血压测量监测大鼠血压动态变化。12周后将大鼠腹腔动脉采血处死，收集血清，酶联免疫法（ELISA）检测25（OH）D3、钙、甲状旁腺激素、白介素-6(IL-6)、基质金属蛋白酶-9、肾素、血管紧张素和醛固酮的的浓度；收集心脏、肾脏，计算肾脏/体重之比和心脏/体重之比；RT-PCR法检测实验组和对照组的肾脏肾素及肾素受体mRNA的表达水平；免疫组化观察肾脏和心脏的肾素受体的分布部位及分布强度；HE染色观察大鼠心脏、肾脏和血管高血压病理改变。结果：12周后，与对照组相比，实验组血压明显降低[（156.4±8.8）vs（170.8±8.4）mmHg,P＜0.05]；实验组自身前后比较血压明显下降；对照组自身前后相比血压有所升高。实验组的血25（OH）D3、钙浓度与对照组相比明显升高[（104.19±0.02）vs（74.22±0.03）ng/ml，（2.26±0.12）vs（2.11±0.19）mmol/l，P＜0.05]，IL-6、MMP-9实验组比对照组明显降低低[（9.80±3.62）vs（35.56±25.1），（56.57±16.03）vs（98.78±19.79），P<0.05]。甲状旁腺激素水平明显降低[（268.98±25.09）vs（324.24±39.68），P＜0.05]。肾素、醛固酮的水平降低[（214.14±24.04）vs（248.845±25.99）pg/ml，（142.49±37.51）vs（184.84±35.69）pg/ml，P＜0.05]。实验组的心脏/体重之比要小于对照组（0.0049±0.0008,P＜0.05），肾脏体重之比无明显差别。RT-PCR结果显示肾脏中的肾素mRNA表达水平低于对照组[（0.133±0.007）vs(0.316±0.012)，P＜0.05]；肾素受体差异无统计学意义[（0.366±0.013）vs(0.400±0.017)，P＞0.05]。免疫组化发现肾素受体在心、肾和血管等分布广泛，肾素受体IOD值在两组表达无差异[（83166±4708）vs（100833±9703）；（89666±7004）vs（93000±4939），P＞0.05]。HE染色显示实验组高血压病理改变明显轻于对照组。对照组大鼠可以看出明显的高血压靶器官改变：肾脏肾小动脉管壁明显增粗，肾小球细膜增生，肾小球有代偿性肥大，个别肾小球萎缩，肾小球和血管周围可见大量炎性细胞浸润；心脏心肌细胞肥大且排列紊乱，心肌细胞横截面直径显著增大，小动脉壁可见纤维性增生；主动脉管腔扩大，管壁成不规则增厚，可见炎性细胞浸润。同对照组相比，实验组的组织病理改变没有那么明显，同正常组织相比无明显区别。结论：维生素D调节血压可以从调节甲状旁腺激素、肾素-血管紧张素-醛固酮系统、炎症因子这三方面的作用调控血压，使血压保持在一个对机体有益的水平。

全文目录

摘要  8-10
ABSTRACT  10-12
前言  12-14
研究内容与方法  14-29
  1 材料  14-16
    1.1 研究对象  14
    1.2 分组  14
    1.3 主要试剂和仪器  14-16
      1.3.1 主要药物  14-15
      1.3.2 主要试剂  15
      1.3.3 主要仪器  15-16
  2 实验方法  16-27
    2.1 无创尾动脉血压监测  16-17
      2.1.1 器材  16
      2.1.2 步骤  16-17
    2.2 心脏/体重之比、肾脏/体重之比  17
      2.2.1 手术材料和器材  17
      2.2.2 手术步骤  17
    2.3 血清指标的检测  17-23
      2.3.1 实验步骤  17-23
      2.3.2 实验原理  23
    2.4 RNA 的提取  23-24
      2.4.1 主要试剂  23
      2.4.2 主要步骤  23
      2.4.3 主要原理  23-24
    2.5 RT-PCR  24-26
      2.5.1 主要试剂  24
      2.5.2 主要步骤  24-26
      2.5.3 实验原理  26
    2.6 HE 染色  26
      2.6.1 主要试剂  26
      2.6.2 主要步骤  26
      2.6.3 实验原理  26
    2.7 免疫组化  26-27
      2.7.1 主要试剂  26-27
      2.7.2 主要步骤  27
      2.7.3 实验原理  27
  3 质量控制  27-28
  4 统计分析  28-29
技术路线图  29-30
结果  30-34
讨论  34-41
小结  41-42
致谢  42-43
参考文献  43-49
附录  49-52
综述  52-58
  参考文献  55-58
攻读硕士学位期间发表的学位论文  58-59
导师评阅表  59

维生素D对自发性高血压大鼠血压调节机制研究

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