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脊髓胶质细胞在蜜蜂毒诱致的疼痛与炎症中作用的研究

作　者: 姚志国
导　师: 陈会生
学　校: 大连医科大学
专　业: 神经病学
关键词: 蜜蜂毒脊髓胶质细胞炎症疼痛
分类号: R741
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

研究背景:传统观点认为,疼痛(pain)的产生只与神经元和神经递质改变有关。20世纪早期,被忽略已久的临近神经元的脊髓胶质细胞(spinal cord glia)的特殊功能引起了人们的关注,并且提出脊髓胶质细胞可能在病理性疼痛产生和维持过程扮演重要角色。这一“崭新”认识,开始向传统“神经元中心”理论发起了挑战。近年来,越来越多的证据显示:脊髓胶质细胞在组织和神经损伤引起的炎症和疼痛中同样扮演着不可忽视的作用。周围组织损伤引起炎症反应(inflammatory reaction),如红肿(redness,edema),同时伴有疼痛行为的产生,如自发痛(spontaneous pain)、痛觉过敏(hyperalgesia)。我们以前的研究也显示大鼠后肢足底皮下注射蜜蜂毒(bee venom,BV)不但可引起持续性自发痛、热和机械性痛敏、镜像热痛敏等多种痛行为,而且还可引起注射爪明显的炎症反应,表现为明显的红肿和皮温升高等反应。对脊髓胶质细胞在炎性痛中作用的进一步研究和阐述,可能为临床抗炎镇痛治疗提供新的理论资料和思路。目的:采用局部皮下注射蜜蜂毒致炎疼痛模型,预先鞘内注射胶质细胞功能干扰剂米诺环素(Minocycline)和氟代柠檬酸(Fluorocitrate),观察其对皮下注射蜜蜂毒诱致的持续性自发痛反应、机械性痛敏以及炎症反应的影响,用以探讨脊髓胶质细胞在疼痛与炎症中的作用。材料和方法:我们采用蜜蜂毒制备炎性疼痛模型,探讨脊髓胶质细胞在大鼠的持续自发痛反应(persistent spontaneous nociception PSN)、机械性痛敏(mechanical hyperalgesia)及炎症反应中的作用。采用雄性SD大鼠,体重200-300g,米诺环素(小胶质细胞功能干扰剂)和氟代柠檬酸(胶质细胞代谢抑制剂)作为干扰胶质细胞功能的药物。在大鼠左后足底皮下注射蜜蜂毒前20分钟,分别鞘内注入米诺环素和不同剂量的氟代柠檬酸,而对照组鞘内注入相应的溶媒。分别观察大鼠在蜜蜂毒注射后1个小时内自发痛缩足反射,每5分钟为一个计时点。鞘内给药前和蜜蜂毒注射2小时后分别用electronic von Frey检测仪测量注射侧鼠爪的机械刺激反应阈值(paw withdrawal mechanical threshold, PWMT),应用PU足趾容积测量仪测量注射侧鼠爪的体积。结果:(1)对自发痛的影响:与对照组相对比,米诺环素组和低剂量、中剂量和高剂量的氟代柠檬酸对蜜蜂毒诱发的自发缩足反射均有明显的抑制作用;且氟代柠檬酸组呈明显的剂量依赖。(2)对机械痛敏的影响:与对照组相对比,预先鞘内注射米诺环素对机械性痛敏无影响,而不同剂量的氟代柠檬酸均能抑制蜜蜂毒诱致的机械性痛敏,并且有明显剂量依赖。(3)对炎症的影响:与对照组相对比,鞘内分别注射米诺环素和不同剂量的氟代柠檬酸对由蜜蜂毒引起的炎症反应,即鼠爪体积增加均无明显抑制作用。结论:(1)脊髓胶质细胞,尤其是小胶质细胞可能参与了蜜蜂毒诱致的自发痛行为。(2)脊髓胶质细胞(小胶质细胞和/或星形胶质细胞)参与蜜蜂毒诱致的机械性痛敏的发生。(3)脊髓胶质细胞没有参与蜜蜂毒诱致的炎症反应。

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中文摘要 6-8英文摘要 8-11前言 11-12材料和方法 12-13实验步骤 13-14结果 14-20讨论 20-23结论 23-24参考文献 24-27综述 27-35 参考文献 32-35附录 35-36致谢 36

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