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覆盆子多酚提取工艺及不同溶剂提取物抗氧化抑菌活性

作　者: 张乃丹
导　师: 张有做
学　校: 浙江农林大学
专　业: 农业推广
关键词: 覆盆子多酚提取抗氧化抑菌
分类号: R284.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

本研究以覆盆子(Fructus Rubi)为原料，利用超声波技术研究了超声波作用时间、料液比、乙醇体积分数和超声波功率等因素对覆盆子总酚提取的影响规律，采用响应面法实验设计方法，获得覆盆子总酚提取工艺的最佳参数组合，结果表明超声波辅助提取覆盆子总酚的最优工艺条件为：超声波功率为400w，乙醇浓度50%，提取时间6.54min，总酚提取率为9.17%。用不同的溶剂提取覆盆子，测定覆盆子提取物的总黄酮和总多酚。研究了覆盆子不同溶剂提取物的抗氧化及抑菌活性。以水、乙醇、正丁醇、甲醇酸和乙酸乙酯为溶剂提取覆盆子，测定了各相的总黄酮和总多酚，结果显示覆盆子水相中黄酮含量为49.6mg/g，乙醇相中黄酮总含量为96mg/g，正丁醇相中总黄酮含量207mg/g，甲醇酸相中总黄酮含量为548mg/g，乙酸乙酯相中总黄酮含量为263mg/g；覆盆水相中总酚含量为72.3mg/g，乙醇相中总酚总含量为127mg/g，正丁醇相中总酚含量261.5mg/g，甲醇酸相中总酚含量为653mg/g，乙酸乙酯相总酚含量为362mg/g。结果表明覆盆子甲醇酸相总酚、总黄酮提取率最高，其次为乙酸乙酯相。研究了不同溶剂提取物的抗氧化活性，结果显示：根据不同溶剂覆盆子提取液IC50值，测得还原力：BHT>甲醇酸>乙酸乙酯>正丁醇>乙醇>水； DPPH.清除率：BHT>甲醇酸>乙酸乙酯>正丁醇>乙醇>水，随着浓度的增大，DPPH.清除率越来越强，当提取液浓度达到0.4mg/mL时，甲醇酸相、乙酸乙酯相接近BHT，具有良好的抗氧化性；抗油脂氧化率：BHT>甲醇酸>乙酸乙酯>正丁醇>乙醇>水。随着浓度的增大，抗油脂氧化率越来越强，当浓度达到0.4mg/mL时，甲醇酸接近BHT。乙酸乙酯相与甲醇酸相抗油脂氧化作用接近。分析覆盆子水和乙醇提取物的抑菌活性，抑菌顺序：金黄色葡萄球菌>枯草芽孢杆菌>大肠杆菌>黑曲霉，对酵母、根霉、青霉抑菌作用不明显，乙醇提取物最低抑菌浓度：大肠杆菌0.16mg/mL，枯草芽孢杆菌0.08mg/mL，金黄色葡萄球菌0.04mg/mL，黑曲霉0.64mg/mL；水提取物最低抑菌浓度：大肠杆菌0.21mg/mL，枯草芽孢杆菌0.14mg/mL，金黄色葡萄球菌0.08mg/mL，黑曲霉0.72mg/mL， pH在3-9内，温度在80℃以内，抑菌效果稳定，抑菌率随作用时间的延长，浓度的增加而增加。

全文目录

摘要  4-5
ABSTRACT  5-10
引言  10-12
1 文献综述  12-22
  1.1 悬钩子属植物  12
  1.2 覆盆子简介  12-16
    1.2.1 覆盆子  12-14
    1.2.2 覆盆子价值  14
    1.2.3 覆盆子中的有效成分  14-16
  1.3 黄酮  16-17
    1.3.1 黄酮简介  16-17
    1.3.2 覆盆子中黄酮的相关研究报道  17
  1.4 总酚  17-22
    1.4.1 总酚简介  17-19
    1.4.2 植物多酚的生物活性  19-21
    1.4.3 覆盆子中总酚的相关研究报道  21-22
2 响应面法优化超声波辅助提取覆盆子总酚  22-30
  2.1 材料与仪器  22
  2.2 实验方法  22-23
    2.2.1 覆盆子总酚超声波辅助提取  22
    2.2.2 总酚含量的测定  22
      2.2.2.1 总酚标准曲线的制作  22
      2.2.2.2 覆盆子总酚含量和提取率测定  22
    2.2.3 覆盆子总酚超声波辅助提取工艺优化  22-23
  2.3 结果与分析  23-29
    2.3.1 超声波辅助提取覆盆子总酚单因素试验  23-25
      2.3.1.1 超声波功率对覆盆子总酚提取率的影响  23
      2.3.1.2 乙醇浓度对覆盆子总酚提取率的影响  23-24
      2.3.1.3 超声时间对覆盆子总酚提取率的影响  24
      2.3.1.4 料液比对覆盆子总酚提取率的影响  24-25
    2.3.2 响应面优化超声波辅助覆盆子总酚提取工艺试验  25-29
      2.3.2.1 响应面分析因素水平设定及试验结果分析  25-27
      2.3.2.2 响应面分析及优化  27-29
      2.3.2.3 最优提取工艺的确定  29
  2.4 小结  29-30
3 覆盆子不同溶剂提取物抗氧化活性研究  30-38
  3.1 材料与仪器  30
  3.2 实验方法  30-33
    3.2.1 样品预处理方法  30
    3.2.2 样品中总黄酮的测定方法  30-31
      3.2.2.1 标准曲线的绘制  30-31
      3.2.2.2 样品中总黄酮的测定  31
    3.2.3 样品中总酚的测定方法  31-32
      3.2.3.1 标准曲线的绘制  31
      3.2.3.2 样品中总酚的测定  31-32
    3.2.4 还原力测定实验方法  32
    3.2.5 DPPH 自由基清除率测定实验方法  32
    3.2.6 抗油脂氧化测定实验方法  32-33
  3.3 结果与分析  33-36
    3.3.1 样品中总黄酮、总酚测定结果  33-34
    3.3.2 还原力实验结果  34
    3.3.3 DPPH 自由基清除实验结果  34-35
    3.3.4 抗油脂氧化实验结果  35
    3.3.5 总酚总黄酮与覆盆子不同溶液提取物的抗氧化活性的相关性  35-36
  3.4 小结  36-38
4 覆盆子水乙醇提取物抑菌活性研究  38-49
  4.1 材料  38
    4.1.1 材料与仪器  38
  4.2 实验方法  38-39
    4.2.1 覆盆子样品制备  38
    4.2.2 实验准备  38-39
      4.2.2.1 培养基的制备  38
      4.2.2.2 供试菌种活化及菌悬液制备  38
      4.2.2.3 滤纸片的制备  38-39
    4.2.3 抑菌圈直径测定(滤纸片法)  39
    4.2.4 最低抑菌浓度的测定  39
    4.2.5 覆盆子抑菌影响因素研究  39
      4.2.5.1 pH 值对覆盆子抑菌效果的影响  39
      4.2.5.2 温度对覆盆子抑菌效果的影响  39
      4.2.5.3 覆盆子对不同菌的作用时间与抑菌率之间的关系  39
  4.3 结果与分析  39-48
    4.3.1 抑菌圈直径测定结果  39-40
    4.3.2 最低抑菌浓度的测定结果  40-42
    4.3.3 覆盆子抑菌影响因素的测定结果  42-48
      4.3.3.1 pH 值对覆盆子抑菌效果的影响测定结果  42
      4.3.3.2 温度对覆盆子抑菌效果影响的测定结果  42-43
      4.3.3.3 覆盆子对不同菌的作用时间与抑菌率之间的关系测定结果  43-48
  4.4. 小结  48-49
5 最终结论、创新点、展望  49-52
  5.1 最终结论  49-50
  5.2 创新点  50
  5.3 展望  50-52
参考文献  52-55
个人简介  55-56
致谢  56

覆盆子多酚提取工艺及不同溶剂提取物抗氧化抑菌活性

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