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氰戊菊酯及其马拉硫磷复配剂型生物标志物的实验研究
作 者: 孟潇
导 师: 邵华
学 校: 济南大学
专 业: 劳动卫生与环境卫生学
关键词: 拟除虫菊酯 有机磷酸酯 生物监测 生物标志物 代谢产物 高效液相色谱法 气相色谱质谱联用法
分类号: S482
类 型: 硕士论文
年 份: 2013年
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内容摘要
在当今社会中,农药已被广泛应用于农业生产和公共卫生,它可以保护农作物并且控制由载体和中间宿主传播的疾病。直到十九世纪六十年代,如DDT这一类有机氯农药被广泛应用,但是由于它在人体和环境中可以蓄积,因此十九世纪七十年代在很多工业化城市中被禁止使用。现如今,拟除虫菊酯农药是应用最为普遍的农药,根据化学结构的不同可以将其分为两种类型:Ⅰ型,不含a-氰基,以氯菊酯为代表;Ⅱ型,含a-氰基,以氰戊菊酯为代表,由于Ⅱ型拟除虫菊酯在昆虫体内作用力更强,作用时间更久,并且在某些情况下它在环境中的稳定性更高,因此当今Ⅱ型应用最为广泛,研究报道也更多。为了增强药效,克服抗性,降低毒性和提高经济效益,拟除虫菊酯的制剂大多为与有机磷农药混配的形式。在哺乳动物中,拟除虫菊酯类、有机磷类杀虫剂均靠肝微粒体酶、酯酶的作用而解毒。当两者混配时,拟除虫菊酯竞争占据有机磷的代谢酶致后者排泄延缓而毒性增加。本研究选择氰戊菊酯作为拟除虫菊酯的代表,马拉硫磷作为有机磷酸酯的代表,其尿中代谢产物为分别为3-苯氧基苯甲酸(3-PBA)和三种二烷基磷酸盐(DAP)为其生物标志物进行研究,研究如下:1.建立了尿中氰戊菊酯及其代谢产物3-PBA的高效液色谱测定方法,该方法灵敏、准确、规范,各项指标均符合《生物监测方法研究规范》的要求。2.将10只Wistar大鼠按体重给予100mg/kg氰戊菊酯,一次性灌胃,收集灌胃后0-2h、2-6h、6-12h和12-24h尿样,应用高效液相色谱法测定大鼠尿液中氰戊菊酯及代谢产物3-PBA的含量,探讨氰戊菊酯在大鼠体内的代谢情况。由结果可知,氰戊菊酯在24h内可代谢完全,并且大鼠尿液中氰戊菊酯的排泄存在一定的性别差异。3.建立一种可靠的,敏感的、高选择性的毛细血管气相色谱质谱法同时测定氰戊菊酯与马拉硫磷混配剂型在大鼠尿中的代谢产物。3种有机磷农药代谢产物磷酸二甲酯(DMP)、二甲基硫代磷酸酯(DMTP)、二甲基二硫代磷酸酯(DMDTP)和1种氰戊菊酯代谢产物3-PBA在14分钟内得到良好分离,各项指标均符合要求。4.10只健康成年Wistar大鼠,随机分为2组,于给药前12h禁食,自由饮水,收集空白尿。实验依照氰戊菊酯和马拉硫磷的LDso(半数致死剂量)和实际农药混配的比例,第一组按照氰戊菊酯(40mg/kg)+马拉硫磷(200mg/kg)为1:3比例混配,第二组按照氰戊菊酯(80mg/kg)+马拉硫磷(400mg/kg)为1:3比例混配。采用灌胃染毒方式,一次性染毒。给药后2h自由进食与饮水,收集给药后12h的尿液。由结果可知,接触农药剂量大的大鼠,其尿中的代谢产物含量高。本研究的特点是:将生物标志物作为突破点,选择了氰戊菊酯和马拉硫磷两种常见农药,探索其在动物体内代谢产物的检测方法。这种方法的主要优势在于可以在相同条件下同时分析两种农药的代谢产物,并且在样品处理上节约了时间与经费。本课题对氰戊菊酯及其混配剂型的在人体内的代谢过程进行了系统研究并构建了动物模型,为大规模职业暴露人群的监测奠定了基础。
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全文目录
研究生导师和课题指导小组成员介绍 4-9 摘要 9-11 Abstract 11-14 主要符号表 14-15 前言 15-26 第一章 氰戊菊酯及其马拉硫磷复配剂型尿中代谢产物的方法建立 26-35 第一部分 氰戊菊酯及其尿中代谢产物3-苯氧基苯甲酸分析方法的建立 26-30 1. 材料与方法 26-27 1.1 仪器 26 1.2 主要材料和试剂 26-27 1.3 标准曲线 27 1.4 样品前处理 27 1.5 色谱条件 27 2 结果 27-30 2.1 色谱柱的选择 27-28 2.2 流动相的选择 28 2.3 样品前处理条件的选择 28 2.4 氰戊菊酯及3-PBA线性关系的考察 28-29 2.5 检出限 29 2.6 精密度 29 2.7 准确度 29-30 2.8 样品稳定性试验 30 第二部分 氰戊菊酯与马拉硫磷复配剂型尿中代谢产物分析方法的测定 30-35 1 材料与方法 30-32 1.1 仪器 30-31 1.2 主要材料和试剂 31 1.3 标准曲线 31 1.4 尿样处理 31 1.5 色谱质谱条件 31-32 2 结果 32-34 2.1 线性范围与线性方程 32 2.2 检出限 32 2.3 精密度 32-33 2.4 准确度 33 2.5 稳定性试验 33-34 3 讨论 34-35 4 结论 35 第二章 大鼠尿液中氰戊菊酯及其马拉硫磷复配剂型生物标志物的研究 35-52 第一部分 大鼠尿中氰戊菊酯及其代谢产物3-PBA的研究 35-41 1 材料与方法 35-37 1.1 仪器 35 1.2 主要材料和试剂 35-36 1.3 实验动物 36 1.4 动物实验设计 36 1.5 标准品储备液的配制 36 1.6 样品前处理 36 1.7 尿肌酐的测定 36-37 1.8 色谱条件 37 2 结果 37-40 2.1 方法专属性 37-38 2.2 氰戊菊酯及3-PBA线性关系的考察 38 2.3 检出限 38-39 2.4 精密度 39 2.5 准确度 39 2.6 样品稳定性试验 39-40 2.7 大鼠尿液中氰戊菊酯累积排泄百分率 40 3 讨论 40-41 第二部分 大鼠尿中氰戊菊酯与马拉硫磷混配剂型生物标志物的研究 41-52 1 材料与方法 41-43 1.1 仪器 41 1.2 主要材料和试剂 41-42 1.3 实验动物 42 1.4 动物实验设计 42 1.5 标准品储备液的配制 42 1.6 尿样处理 42-43 1.7 尿肌酐的测定 43 1.8 色谱质谱条件 43 2 结果 43-48 2.1 方法专属性 43-44 2.2 工作曲线与线性范围 44-45 2.3 检出限 45 2.4 精密度 45 2.5 准确度 45-46 2.6 稳定性试验 46-47 2.7 尿液排泄分析 47-48 3 讨论 48-51 4 结论 51-52 参考文献 52-56 综述 56-63 参考文献 61-63 攻读硕士期间已(待)发表论文 63-64 致谢 64
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中图分类: > 农业科学 > 植物保护 > 农药防治(化学防治) > 各种农药
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