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茯苓菌种制备技术及产地加工研究

作　者: 许甜甜
导　师: 金传山
学　校:
专　业: 中药学
关键词: 茯苓菌种产地加工茯苓多糖茯苓总三萜茯苓酸
分类号: TQ461
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

目的：建全茯苓的质量控制体系；筛选金寨优质茯苓菌种，在实验室条件下对茯苓菌种进行分离制备，将实验室分得的茯苓菌种在金寨进行大田生产，从而优选高产优质的茯苓菌种；通过对茯苓市售饮片的质量分析以及对金寨茯苓产业化生产工艺的考察，找出影响其质量的主要因素，优选茯苓产地加工生产工艺技术参数，为茯苓饮片的产业化生产提供稳定可行、参数可控的生产工艺。建立茯苓产地趁鲜切制产业化生产关键技术操作规程（SOP）。通过建立茯苓产地加工与炮制一体化的产业化生产模式，确保茯苓饮片的质量稳定可控。方法：1．采用紫外分光光度法，以葡萄糖为对照，测定茯苓中茯苓多糖的含量；采用紫外分光光度法，以茯苓酸为对照，测定茯苓中茯苓总三萜的含量；采用高效液相色谱法测定茯苓中茯苓酸的含量。2．通过优选金寨鲜茯苓菌核对其进行组织分离，在实验室条件下制备茯苓菌种的栽培种，通过大田生产优选高产优质的茯苓菌种。3．通过对市售茯苓质量进行分析，对茯苓产地的加工环节，如发汗时间、硫熏、切制等进行系统的质量跟踪分析，寻找影响茯苓饮片质量的因素。4．以茯苓多糖、茯苓总三萜、茯苓酸为质量控制指标，结合茯苓饮片的外观性状，系统考察茯苓产地加工工艺，考察茯苓饮片发汗时间、饮片厚度、饮片规格、干燥温度、干燥时间与干燥方法等影响因素，并通过中试生产初步建立茯苓饮片产地加工的关键技术操作规程（SOP）。结果：1．建立了以茯苓多糖、茯苓总三萜、茯苓酸为指标，综合控制茯苓饮片质量的方法，制定了茯苓多糖含量不低于70.0%，茯苓总三萜含量不低于0.20%，茯苓酸含量不低于0.05%为茯苓的质量指标，该方法精确稳定，能有效控制茯苓的质量。2．通过连续3年对茯苓鲜菌核进行组织分离，制备茯苓菌种，在实验室条件下已经掌握了茯苓菌种的制备过程，且在外观条件下可以通过“茯苓菌种的质量标准”对茯苓菌种的质量进行初步分析。但是在茯苓菌种的大田生产实验过程中实验室菌种的结苓情况尚不满意。3．通过对市售茯苓质量进行分析，对茯苓产地的加工环节进行系统的质量跟踪分析，初步建立了茯苓产业化生产工艺，其中茯苓丁的产业化工艺为：取鲜茯苓个，放置阴凉处，待发汗后去皮，置于茯苓丁切制机上切制，切制机设置成厚度在8mm左右、宽度8mm左右，直接切制成茯苓丁，再放置于烘房中60℃烘干，取出，放凉，包装。此加工工艺加工的茯苓丁质量较好。结论：本论文采用的茯苓控制方法精确稳定，能有效控制茯苓质量；茯苓菌种的制备分离规程已建立，但是高产优质的茯苓菌种的制备需要进一步研究；茯苓的产地加工方法科学、合理，初步实现了茯苓丁产地加工工艺规范化、产业化，质量稳定可控。

全文目录

中文摘要  8-10
ABSTRACT  10-13
缩略词中英文对照表  13-14
前言  14-18
第一章茯苓质量评价体系的建立  18-39
  1 茯苓多糖含量测定方法的建立  18-25
    1.1 实验仪器及试药  18
    1.2 对照品溶液的制备  18-19
    1.3 苯酚试液的制备  19
    1.4 最大吸收波长的确定  19-20
    1.5 供试品溶液提取方法的考察  20-21
    1.6 线性关系的考察  21-22
    1.7 稳定性试验  22-23
    1.8 精密度试验  23
    1.9 重复性试验  23-24
    1.10 回收率试验  24-25
    1.11 样品含量测定  25
  2 茯苓总三萜含量测定方法的建立  25-32
    2.1 仪器及试药  25-26
    2.2 对照品溶液的配置  26
    2.3 供试品溶液的制备  26
    2.4 茯苓总三萜提取方案的考察  26-27
    2.5 最大吸收波长的确定  27-28
    2.6 线性关系的考察  28-29
    2.7 精密度试验  29-30
    2.8 稳定性试验  30-31
    2.9 重复性试验  31
    2.10 回收率试验  31-32
    2.11 样品含量测定  32
  3 茯苓酸含量测定方法的建立  32-38
    3.1 实验仪器及试药  32
    3.2 供试品溶液提取方法的考察  32-34
    3.3 色谱条件  34-35
    3.4 线性关系的考察  35-36
    3.5 稳定性试验  36
    3.6 精密度试验  36
    3.7 重复性试验  36-37
    3.8 回收率试验  37-38
    3.9 样品含量测定  38
  4 小结  38-39
第二章安徽金寨地区优质茯苓菌种筛选及制备研究  39-61
  1 样品来源、试剂及仪器  39-40
    1.1 样品来源  39
    1.2 试剂  39-40
    1.3 仪器设备  40
  2 第一批实验室茯苓菌种的分离与制备  40-52
    2.1 培养基制备方法  40-41
    2.2 母种分离与培育方法  41-42
    2.3 原种制备  42
    2.4 栽培种制备  42
    2.5 菌种生长情况  42-45
    2.6 窖场和结苓情况以及茯苓质量分析  45-51
    2.7 第一次实验室菌种分离制备实验的分析  51-52
  3 第二批实验室茯苓菌种的分离与制备  52-59
    3.1 改进后茯苓菌种的制备方法  52-55
    3.2 改进后制备的茯苓菌种培养结果  55-57
    3.3 改进后菌种的结苓情况  57-59
  4 小结  59-61
第三章茯苓的产地加工研究  61-77
  1 茯苓市售药材质量分析  61-62
  2 茯苓产地加工工艺产业化生产关键技术研究  62-73
    2.1 茯苓去皮工艺的研究  63-64
    2.2 茯苓不同药用部位化学成分分析  64-65
    2.3 茯苓不同规格饮片的加工过程中各参数对茯苓质量的影响  65-69
    2.4 不同干燥方法对茯苓药材质量的影响  69-70
    2.5 不同烘干温度对茯苓质量的影响  70
    2.6 硫熏对茯苓质量的影响  70-73
    2.7 蒸制对茯苓质量的影响  73
  3 茯苓机械加工的中试试验  73-75
  4 茯苓传统加工与机械加工的比较  75-76
  5 小论  76-77
结语  77-79
附录茯苓饮片产地加工与炮制一体化工艺与质量标准（草案）  79-82
参考文献  82-84
综述  84-93
  参考文献  90-93
个人简历  93
攻读硕士学位期间发表的学术论文  93-94
致谢  94

茯苓菌种制备技术及产地加工研究

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