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鲟鱼胆汁层析法分离条件的研究
作 者: 龚世伟
导 师: 陈金芳
学 校: 武汉工程大学
专 业: 化学工艺
关键词: 鲟鱼 胆汁酸 薄层层析 柱层析 水解
分类号: R284.2
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
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内容摘要
湖北宜昌天峡鲟业有限公司是国内外鲟鱼品种最多、规模最大的种质资源库。本课题选用鲟鱼胆汁作为研究对象,先应用薄层层析筛选和优化洗脱剂,再用硅胶柱层析法对鲟鱼胆汁的有效成分进行分离,比较了不同的洗脱剂体系、不同的硅胶粒径和填料高度对分离效果的影响,并对分离物的结构进行分析鉴定。实验用粒径为0.048~0.075mm(200~300目)的硅胶,先用氯仿/甲醇(5:1,v/v)进行洗脱,接着用石油醚/丙酮/乙醇(3:1:1,V/V/V),最后用水洗脱,分离效果不太理想,只分离出单一的组分1,组分2、3在大部分流份中同时洗脱出来,未实现组分1、2的完全分离。实验依次用氯仿、氯仿/乙醇(15:1,v/v)、石油醚/丙酮/乙醇(3:1:1,v/v/v)、乙醇/丙酮/水(4:2:1,v/v/v)、水作洗脱剂,可以分离出鲟鱼胆汁中的6种主要组分。别采用0.075~0.150mm(100~200目)硅胶,填料高度为290mm和采用0.048~0.075mm (200~300目)硅胶,填料高度为390mm进行两次分离。由两次实验结果表明,减小硅胶的粒径,增加硅胶填料的高度,可以大大提高分离效果。综合各分离组分的紫外可见吸收光谱和红外光谱测定结果,可初步推断组分1为游离型石胆酸,组分2可能为游离型胆酸或鹅去氧胆酸,两者在鲟鱼胆汁中仅微量存在;组分3无法推断是什么物质,有待进一步深入研究;组分4为牛磺胆酸或牛磺鹅去氧胆酸,以钠或钾盐的形式存在于鲟鱼胆汁中;组分5为甘氨鹅去氧胆酸,以酸的形式存在于鲟鱼胆汁中;组分6为胆绿素的钠或钾盐。采用稀碱法对人工养殖鲟鱼的胆汁进行提取工艺的研究,以总胆汁酸为考察对象,对影响产率的因素进行了单因素试验,并在此基础上通过正交试验,确定鲟鱼胆汁酸提取的最佳工艺: NaOH用量,9%;温度,120℃;时间,17h。
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全文目录
摘要 4-5 Abstract 5-10 引言 10-12 第1章 文献综述 12-30 1.1 胆汁概述 12-18 1.1.1 胆汁的成分、性质 12-13 1.1.2 动物胆汁主要活性组分的理化性质 13-18 1.2 胆汁中活性组分的提取、分离鉴定方法 18-21 1.2.1 胆色素的提取方法 18-19 1.2.2 胆汁酸的分离鉴定方法 19-21 1.3 动物胆汁的药用研究 21-24 1.3.1 祖国医学对胆汁类药物的认识 21-22 1.3.2 胆汁的现代研究及应用 22-24 1.4 鱼类胆汁的性质 24-27 1.4.1 鱼类胆汁的外观 24-25 1.4.2 鱼类胆汁的胆汁色素与pH 值 25 1.4.3 鱼胆汁的主要化学成分 25-26 1.4.4 胆毒鱼类与胆汁的毒性 26 1.4.5 鱼胆汁的展望 26-27 1.5 课题的研究意义与研究内容 27-30 1.5.1 课题的研究意义 27-28 1.5.2 研究主要内容和方法 28-30 第2章 薄层层析分离鲟鱼胆汁 30-38 2.1 实验原料和试剂 30-31 2.2 实验过程 31-32 2.2.1 胆汁样品液的制备 31 2.2.2 硅胶板的制备 31 2.2.3 显色剂的选择 31-32 2.2.4 点样、展开与显色 32 2.3 结果与讨论 32-35 2.3.1 单元溶剂系统 32-33 2.3.2 二元溶剂系统 33-34 2.3.3 三元溶剂系统 34-35 2.3.4 洗脱剂体系的确定 35 2.4 本章小结 35-38 第3章 硅胶柱层析分离鲟鱼胆汁 38-62 3.1 实验原料和仪器 38-39 3.2 实验过程 39-41 3.2.1 装柱 40 3.2.2 样品的制备及加样 40 3.2.3 洗脱并收集流份 40-41 3.2.4 薄层层析检测流份 41 3.3 结果与讨论 41-60 3.3.1 洗脱剂分离胆汁 41-49 3.3.2 分离物结构表征和分析 49-50 3.3.3 紫外可见光谱分析 50-51 3.3.4 红外光谱分析 51-60 3.5 本章小结 60-62 第4章 鲟鱼胆汁的水解 62-70 4.1 实验材料 62-63 4.2 实验方法 63 4.3 结果与讨论 63-69 4.3.1 NaOH 水解鲟鱼胆汁工艺的确定 63-65 4.3.2 氨水水解鲟鱼胆汁工艺的确定 65-67 4.3.3 正交试验确定人工养殖鲟鱼胆汁提取的最佳工艺条件 67-69 4.4 本章小结 69-70 第5章 结论与建议 70-72 5.1 结论 70-71 5.2 建议 71-72 参考文献 72-78 攻读硕士学位期间发表论文 78-80 附录一 缩略词表 80-82 附录二 部分化合物的红外图谱 82-86 附录三 色带移动距离与时间的关系图数据表 86-88 致谢 88
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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药化学 > 有效成分的分离与提取
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