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河南省部分地区鸡源志贺氏菌的分离鉴定、耐药性及PCR检测

作　者: 庞歌
导　师: 许兰菊；朱金凤
学　校: 河南农业大学
专　业: 预防兽医学
关键词: 河南省 鸡源志贺氏菌 分离鉴定 耐药性实验 PCR检测
分类号: S858.31
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要


为了对河南省部分地区鸡源志贺氏菌性腹泻进行准确诊断,并为有效防治该病提供可靠依据。本试验对来自河南省郑州、商丘、周口、驻马店等18个地区98个鸡场的114只疑似为鸡源志贺氏菌性腹泻病鸡的156份病料进行了病原菌分离鉴定和耐药性试验研究。通过细菌的分离培养、形态染色、生化试验、血清学鉴定、PCR检测、致病性试验,结果从分离出的273株细菌中鉴定出34株志贺氏菌。通过药敏试验发现34个分离株对14种药物产生了不同程度的耐药性。1.细菌分离培养、形态染色、生化试验：分离培养、染色特性符合志贺氏菌的特点且生化试验标准的为34株,分离率为11.89%(34/286)。2.致病性试验结果显示实验组小鸡都被感染了所攻的细菌,感染发病率均达到80%以上,死亡率在0-100%之间。进而表明了34个志贺氏菌分离菌株对雏鸡均具有致病作用。3.血清学鉴定：经志贺氏菌多价阳性血清平板凝集试验均为阳性,更进一步确定了所分离菌株均为鸡源志贺氏菌。4.药敏试验：采用Kirby-Bauer法对研究分离鉴定的34株鸡源志贺氏菌分离株进行14种抗菌药物(头孢唑啉、罗红霉素、庆大霉素、环丙沙星等)的耐药性检测,结果显示：所有分离的34株志贺氏菌分离株对罗红霉素产生了严重的耐药性,耐药菌株占分离株总数的100%(34/34),其次为复方新诺明和诺氟沙星其耐药率达到97.1%(33/34)；环丙沙星耐药率为94.1%(32/34)；氯霉素耐药率为88.2%(30/34)；34个分离株对其他药物均呈不同程度耐药性,耐药菌株占分离株总数的23.6%(8/34)-88.2%(30/34)。试验结果表明：不同地区的分离菌株对各种药物的耐药性不同,同一地区的分离菌株对各种药物的耐药性也存在显著差异。5.采用本实验室根据志贺氏菌ipaH基因建立的PCR方法对分离得到的34株志贺氏菌进行检测,结果34株志贺氏菌均可扩增出预期大小的目的条带,且为志贺氏菌ipaH基因阳性。

全文目录


致谢  4-7
摘要  7-8
1 文献综述  8-18
  1.1 志贺氏菌病病原学  8-9
  1.2 流行病学  9-10
  1.3 志贺氏菌的致病性研究  10-12
    1.3.1 志贺氏菌对鸡的致病性研究  10
    1.3.2 志贺氏菌的致病机理  10-11
    1.3.3 志贺氏菌侵染过程的分子机制  11-12
  1.4 诊断技术  12-15
    1.4.1 细菌分离鉴定  12
    1.4.2 血清学诊断方法  12-13
    1.4.3 分子生物学方法  13-15
  1.5 志贺氏菌的耐药性研究进展  15-16
    1.5.1 抗生素耐药形成  15-16
    1.5.2 志贺氏菌对喹诺酮类耐药的研究  16
  1.6 防治  16-17
    1.6.1 鸡源志贺氏菌病的免疫预防  16
    1.6.2 分子生物学方面技术的应用  16-17
    1.6.3 药物治疗新进展  17
    1.6.4 新型治疗技术  17
  1.7 研究的目的意义  17-18
2 引言  18-19
3 材料与方法  19-24
  3.1 材料  19-20
    3.1.1 病料来源  19
    3.1.2 培养基  19
    3.1.3 革兰氏染液  19
    3.1.4 志贺氏菌多价阳性血清  19
    3.1.5 实验用动物  19
    3.1.6 药敏纸片  19-20
    3.1.7 PCR材料  20
    3.1.8 仪器设备  20
  3.2 方法  20-24
    3.2.1 病料采集  20
    3.2.2 培养基的制备  20
    3.2.3 细菌分离、染色与镜检  20
    3.2.4 细菌的纯化培养  20-21
    3.2.5 生化鉴定  21
    3.2.6 血清学鉴定  21
    3.2.7 动物致病性试验  21-22
    3.2.8 鸡源志贺氏菌分离株药敏试验  22-23
    3.2.9 分离鸡源志贺氏菌菌株的PCR检测  23-24
4 结果与分析  24-36
  4.1 细菌的分离鉴定  24-32
  4.2 鸡源志贺氏菌药敏试验的结果及分析  32-35
    4.2.1 鸡源志贺氏菌药敏试验的结果  32-34
    4.2.2 34株鸡源志贺氏菌耐药性与敏感性分析  34-35
    4.2.3 34株鸡源志贺氏菌多重耐药性分析  35
  4.3 鸡源志贺氏菌PCR检测结果  35-36
5 结论和讨论  36-38
  5.1 鸡源志贺氏菌的分离鉴定  36
  5.2 鸡源志贺氏菌分离株耐药性  36-37
  5.3 鸡源志贺氏菌的PCR检测  37-38
参考文献  38-43
ABSTRACT  43

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中图分类: > 农业科学 > 畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂 > 动物医学（兽医学） > 各种家畜、家禽、野生动物的疾 > 家禽 > 鸡
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