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京尼平对壳聚糖/藻酸盐组织工程支架制备的影响

作　者: 史林
导　师: 文益民
学　校: 兰州大学
专　业: 骨科学
关键词: 京尼平壳聚糖藻酸盐交联温度组织工程材料
分类号: R318.08
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要

背景：美国的学者在20世纪80年代提出了“组织工程”的概念,组织工程是一门交叉学科,包括了生命科学、材料学等学科知识。组织工程研究主要包括：种子细胞、支架材料、细胞外基质。其中,支架材料是该领域近年来研究的热点。本实验通过冷冻干燥法制备壳聚糖/藻酸盐复合支架材料,并采用新型天然交联剂京尼平对材料进行交联,探究京尼平、紫外线两种交联方法对支架材料制备的影响。目的：1.比较京尼平和紫外线交联后的壳聚糖/藻酸盐复合支架材料的降解率、孔隙率、含水量、细胞毒性以及生物力学等特性；2.探究交联温度对京尼平交联壳聚糖/藻酸盐组织工程支架的影响。方法：取1只成年健康Wistar大鼠骨髓,分离、培养BMSCs.采用冷冻干燥法制备壳聚糖/藻酸盐复合支架。1.①按照交联方法不同分为：京尼平组、紫外线组。②扫描电镜下观察材料的表面结构以及检测材料的降解率、孔隙率、含水量、细胞毒性以及生物力学。2.运用冷冻干燥法制备壳聚糖/藻酸盐支架材料,分别在4℃、25℃、37℃条件,于0.5%京尼平溶液中交联24h,作为实验组。以未用京尼平交联的支架材料作为对照组,评价支架材料降解率、细胞毒性、孔隙率、含水量以及生物力学性能的特点。结果：1.①紫外线组与京尼平组均表现为多孔隙结构,无明显差异。②紫外线组降解率高于京尼平组。③京尼平组与紫外线组的孔隙率差异无统计学意义,含水量差异比较有统计学意义。④两组均表现为较低的细胞毒性,良好的生物相容性。⑤京尼平交联组的生物力学特性较紫外线组显著提高。2.①伴随交联温度升高,支架材料的颜色从浅紫色变为紫黑色,未交联的支架材料为白色；②降解率4周后在4℃组为21.54%±3.07%、25℃组为9.9%±1.2%、37℃组为8.98%±0.79%。其中,37℃和25℃组抗降解能力优于4℃组(P<0.05)。各实验组均优于对照组(P<0.01)。③弹性模量在4℃组为0.84±0.55,25℃组为1.44±0.06,37℃组为1.53±0.02,对照组为0.79±0.16。对照组与25℃组与37℃组之间差异计较有统计学意义(P<0.05)。④孔隙率、含水量、细胞毒性各实验组间未见明显差异。结论：1.京尼平交联的壳聚糖／藻酸盐复合支架材料,具有良好的生物学特性,为组织工程脊髓领域提供了非常具有潜力的材料。2.随着交联温度的提高,支架材料的抗降解能力、抗拉伸性能增加,且对支架材料的结构、细胞毒性、孔隙率以及含水量无明显影响。

全文目录

英文縮略词表  4-5
中文摘要  5-7
Abstract  7-12
前言  12-15
第一部分京尼平交联制备壳聚糖/藻酸盐复合支架材料  15-26
  材料与方法  15-17
    实验材料  15
    实验方法  15-17
      1. 壳聚糖/藻酸盐复合组织工程支架的制备以及交联  15
      2. 生物力学测试  15-16
      3. 含水量测定  16
      4. 降解率测定  16
      5. 孔隙率测定  16
      6. 细胞毒性测定  16-17
      7. 统计学处理  17
  结果  17-20
    1. 材料的外观以及扫描电镜观察  17
    2. 力学测试  17
    3. 降解率  17-18
    4. 孔隙率、含水量  18-19
    5. 细胞毒性试验  19-20
  讨论  20-22
  文章图片  22-23
  参考文献(REFERENCES)  23-26
第二部分交联温度对京尼平交联壳聚糖/藻酸盐组织工程支架的影响  26-37
  材料与方法  26-30
    实验材料  26-27
      1. 实验动物  26
      2. 主要实验仪器  26
      3. 主要实验试剂  26-27
      4. 主要溶液以及试剂的配制  27
    实验方法  27-30
      1. 骨髓间充质干细胞的分离和培养(BMSCsS)：贴壁法  27-28
      2. 壳聚糖/藻酸盐复合组织工程支架的制备以及交联  28-29
      3. 扫描电镜观察  29
      4. 降解率测定  29
      5. 细胞毒性测定  29
      6. 孔隙率测定  29
      7. 含水量测定  29-30
      8. 生物力学测试  30
      9. 统计学处理  30
  结果  30-32
    1 支架的孔径与结构  30
    2 降解率  30
    3 细胞毒性  30-31
    4 孔隙率  31
    5 含水量  31
    6 生物力学试验  31-32
  讨论  32-34
  全文结论  34-35
  文章图片  35-36
  参考文献(REFERENCES)  36-37
综述  37-45
  参考文献  42-45
个人简历和在学期间的研究成果  45

京尼平对壳聚糖/藻酸盐组织工程支架制备的影响

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