学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

不同条件CO_2气腹手术对裸鼠卵巢癌种植转移的影响及其机制的研究

作　者: 徐舒翔
导　师: 刘彦
学　校: 第二军医大学
专　业: 妇产科学
关键词: CO2 腹腔镜气腹卵巢癌 Real Time PCR Cell Counting Kit-8 裸鼠 CO2 ELISA 透射电镜
分类号: R737.31
类　型: 博士论文
年　份: 2012年
下　载: 78次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

目的：通过建立离体模拟的不同条件腹腔镜二氧化碳（CO₂）气腹的手术环境以研究离体环境CO₂气腹环境本身对人卵巢腺癌细胞株（SKOV₃）细胞生长增殖的影响，从而对腹腔镜用于在体卵巢癌手术的安全性作出初步评价。方法：1、建立离体环境腹腔镜CO₂气腹模型。实验分5组：空白对照组、开腹对照组、恒压3mmHg气腹手术组、恒压8mmHg气腹手术组、脉冲8mmHg气腹手术组。每组干预2小时。2、Cell Counting Kit-8（CCK-8）试剂盒法检测离体环境不同条件CO₂气腹对卵巢癌细胞生长增殖的影响。3、实时荧光定量聚合酶链反应（Real Time-PCR）法检测离体环境不同条件CO₂气腹对卵巢癌细胞中血管内皮生长因子-C（VEGF-C）、黏附分子CD44变异体6（CD44v6）及E钙黏连蛋白（E-cad）的基因信使核糖核酸（mRNA）表达的影响。结果：1、离体腹腔镜CO₂气腹环境和开腹环境对卵巢癌SKOV₃细胞增殖生长都有一定的抑制作用，而且随着压力的升高，其抑制作用越明显。虽然低气压（3mmHg）气腹组比开腹组对离体卵巢癌细胞生长增殖影响更小，但无明显统计学意义（P＞0.05）。两种气腹机对离体卵巢癌细胞生长增殖的影响也无明显统计学意义（P＞0.05）。2、离体腹腔镜CO₂气腹环境和开腹环境对卵巢癌SKOV₃细胞VEGF-C、CD44v6及E-cad基因mRNA表达都有一定的抑制作用，而且随着压力的升高，其抑制作用越明显。虽然低气压（3mmHg）气腹组比开腹组对离体卵巢癌细胞生长增殖影响更小，但无明显统计学意义（P＞0.05）。脉冲气腹机对离体卵巢癌细胞VEGF-C、CD44v6及E-cad基因表达的抑制作用更大，具有明显统计学意义（P＜0.05）。结论：CO₂气腹环境本身对卵巢癌细胞生长增殖无促进作用，可进一步用于在体实验研究。目的：以人源卵巢癌细胞构建裸鼠卵巢癌动物模型。予荷瘤裸鼠行不同条件的腹腔镜CO₂气腹干预，观察描绘荷瘤裸鼠生存曲线，并与开腹组对照，进一步研究探讨腹腔镜不同CO₂气腹条件对卵巢癌预后的影响。方法：1、通过腹腔注射稳定传代的人源SKOV₃细胞建立在体的裸鼠卵巢癌模型。2、Real Time-PCR内参法检测移植接种的肿瘤遗传学种属特点。3、将30只裸鼠随机分为5组：空白对照组、开腹对照组、恒压3mmHg气腹手术组、恒压8mmHg气腹手术组、脉冲8mmHg气腹手术组，每组6只。各实验组干预时间为1h；对照组不经气腹处理。干预后继续在无特定病原体环境（SPF级）自然饲养直至死亡。结果：1、本次实验裸鼠卵巢癌模型造模成功，模型具备实体瘤和腹水瘤两者的特点。2、移植接种的裸鼠实体瘤和腹水瘤均为鼠源肿瘤。3、开腹组及不同条件CO₂气腹组对卵巢癌预后均存在不良影响，而且随着压力增高，这种影响更大。但开腹与低气压（3mmHg）气腹组之间无明显差异。在高气腹压力情况下（8mmHg），脉冲气腹机比恒压气腹机对卵巢预后影响更大。结论：开腹（开关术、无减瘤操作）及气腹干预（无减瘤操作）对卵巢癌预后均存在不良影响，而且随着压力增高，这种影响更大。但开腹与低气压（3mmHg）气腹组之间无明显差异。在高气腹压力情况下（8mmHg），脉冲气腹机比恒压气腹机对卵巢预后影响更大。目的：在构建裸鼠卵巢癌动物模型后，予荷瘤裸鼠行不同条件的腹腔镜CO₂气腹干预，通过Real Time-PCR法和ELISA法研究在体气腹环境对卵巢癌组织基因VEGF-C、CD44v6和E-cad表达的mRNA和蛋白的相对情况；通过显微电镜了解腹腔镜气腹对腹膜局部的超微结构影响改变。并与开腹组对照，进一步研究探讨腹腔镜不同CO₂气腹条件对卵巢癌预后影响的机制方法：1、Real time PCR法检测不同条件CO₂气腹对裸鼠卵巢癌组织中VEGF-C、CD44v6及E-cad基因mRNA表达的影响2、酶联免疫法（ELISA）检测不同条件CO₂气腹干预术前与术后7天裸鼠卵巢癌腹水中VEGF-C、CD44v6及E-cad蛋白含量的变化。3、透射电镜法观察不同条件CO₂气腹对裸鼠腹膜超微结构的影响结果：1、腹腔镜CO₂气腹和开腹使卵巢癌SKOV₃细胞VEGF-C和CD44v6的表达上调，但干预各组间无明显统计学意义（P＞0.05）；使E-cad的表达下调，但干预各组间无明显统计学意义（P＞0.05）。2、与对照组比较，开腹以及不同CO₂气腹条件对组织中VEGF-C、CD44v6及E-cad蛋白表达的改变（术后7天与术前表达改变）无明显统计学意义（P＞0.05）。3、CO₂气腹对腹膜间皮细胞存在不可逆的损害，这种损害随着压力的升高而加重。脉冲气腹组的损害最为严重，内皮细胞形态不完整，崩解断裂多见，细胞间隙巨大，微绒毛断裂。各层均可见到大量肿瘤细胞浸润。结论：与传统开腹手术相比，目前没有证据表明CO₂气腹手术对卵巢癌细胞种植转移的生物学特性存在影响。但CO₂气腹压力过高可能导致腹膜间皮细胞及基底细胞受损，从而降低了腹膜的防御能力。

全文目录

摘要  6-9
Abstract  9-14
中英文缩略词表  14-16
前言  16-23
  参考文献  21-23
第一部分  23-45
  1. 实验材料和方法  23-33
  2. 结果  33-38
  3. 讨论  38-43
  4. 参考文献  43-45
第二部分  45-58
  1. 实验材料和方法  45-51
  2. 结果  51-53
  3. 讨论  53-56
  4. 参考文献  56-58
第三部分  58-86
  1. 实验材料和方法  58-69
  2. 结果  69-82
  3. 讨论  82-85
  4. 参考文献  85-86
综述  86-95
  参考文献  93-95
附录  95-96
致谢  96-97

不同条件CO_2气腹手术对裸鼠卵巢癌种植转移的影响及其机制的研究

内容摘要

全文目录

相似论文