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八珍猪肚药膳对脾虚型胃溃疡大鼠的实验研究

作 者: 徐君
导 师: 黄秋云
学 校: 福建中医药大学
专 业: 中药学
关键词: 八珍猪肚药膳 脾虚型胃溃疡 攻击因子 防御因子
分类号: R285.5
类 型: 硕士论文
年 份: 2013年
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内容摘要


目的:通过建立大鼠脾虚型胃溃疡模型,研究八珍猪肚药膳对胃溃疡愈合作用的影响,并探讨其可能的作用机制,为其临床应用提供实验依据。方法:以68只SD大鼠为实验对象,随机分为正常组(18只)和脾虚组(50),采用大黄结合饮食失节法复制大鼠脾虚模型,大黄给药9天后,两组各取10只对脾虚模型进行检测。主要通过观察大鼠一般状况:进食量、毛发、大便、活动情况等;体重变化;游泳时间;检测免疫功能方面的指标:胸腺及脾脏指数、白细胞介素-2(IL-2)、免疫球蛋白(IgA、IgM、IgG)。脾虚组剩余的40只大鼠随机分为模型组、八珍猪肚药膳低剂量组、八珍猪肚药膳中剂量、八珍猪肚药膳高剂量组、雷贝拉唑组,采用改良的乙酸涂抹法制备脾虚胃溃疡模型。造模3天后给药,饲喂28天后,取材收集胃液、血清及胃组织,通过对脾虚指标的改善情况、溃疡面积、组织肉眼观察及HE染色的病理形态对愈合情况进行评价。并通过检测胃液总酸度及胃蛋白酶活性,检测血清丙二醛(MAD)、超氧化物歧化酶(SOD)和一氧化氮(NO)、谷光氨肽过氧化物酶(GSH-Px)、胃泌素(GAS)、胃动素(MTL),检测组织中前列腺素E2(PGE2)、表皮生长因子(EGF)、血管内皮生长因子mRNA(VEGFmRNA)的表达情况探讨其可能的作用机理,各组数据均用x±s表示,用SPSS软件进行数据分析,单因素方差分析,均采用组间两两比较。结果:1.动物模型:采用大黄结合饮食失节法及改良的乙酸涂抹法制备脾虚胃溃疡模型。大黄给药后大鼠出现体重减轻、活动减少、便溏、被毛枯槁、拱背等现象,游泳时间缩短,胸腺、脾脏指数降低,IL-2、IgA、IgM、IgG等指标降低,给药后药膳组上述现象有所改善,各指标都有所回升,验证脾虚造模成功。大鼠胃壁涂抹乙酸后,胃壁颜色苍白,周围水肿充血。此溃疡模型肉眼及镜下观察,其表现与人类溃疡极为相似,且造模成功率高,方法简单,可操作性强,是目前普遍认可用于观察药物疗效的模型。2.肉眼及病理观察肉眼:模型组大鼠胃粘膜缺损,深达肌层。各用药组较模型组均有不同程度的愈合,药膳各组的溃疡面积均小于模型组,其中以高剂量组效果最好。病理观察:模型组大鼠粘膜破坏较严重,腺体排列紊乱,可见大量炎症细胞及炎性渗出物;给药组腺体排列较整齐,见少量炎症细胞,其中镜下观察以高剂量组最佳。3.对溃疡面积的影响与模型组相比,药膳低、中、高剂量组及雷贝拉唑组溃疡面积明显减小(P<0.05或P<0.01)。药膳高剂量组疗效优于雷贝拉唑组(P<0.05)。4.对胃液量、胃液酸度、胃蛋白酶活性的影响与正常组相比,模型组胃液量明显升高(P<0.01)。与模型组相比,药膳低剂量组的胃液量无明显变化(P>0.05),药膳中、高剂量组及雷贝拉唑组胃液量降低(P<0.05或P<0.01)。雷贝拉唑组、药膳高剂量组的胃液量无差异(P>0.05)。与正常组相比,模型组胃液总酸度明显降低(P<0.01)。与模型组相比,药膳低剂量组的胃液总酸度无明显变化(P>0.05),药膳中、高剂量组及雷贝拉唑组胃液总酸度降低(P<0.05或P<0.01)。雷贝拉唑组、药膳高剂量组的胃蛋白酶活性无差异(P>0.05)。与正常组相比,模型组胃蛋白酶活性明显升高(P<0.01)。与模型组相比,药膳低剂量组的胃蛋白酶活性无明显变化(P>0.05),药膳中、高剂量组及雷贝拉唑组的胃蛋白酶活性明显降低(P<0.05或P<0.01)。雷贝拉唑组、药膳高剂量组的胃蛋白酶活性无差异(P>0.05)。5.对丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽还原酶(GSH-Px)的影响与正常组相比,模型组血清SOD活性明显降低(P<0.01)。与模型组相比,药膳低、中、高剂量组以及雷贝拉唑组的血清SOD活性均明显升高(P<0.05或P<0.01)。与雷贝拉唑组相比,药膳高剂量组的血清SOD活性升高(P<0.01)。与正常组相比,模型组血清MDA含量明显升高(P<0.01)。与模型组相比,药膳低、中、高剂量组及雷贝拉唑组的血清MDA含量均降低(P<0.05或P<0.01)。雷贝拉唑组与药膳高剂量组的血清MDA无差异(P>0.05)。与正常组相比,模型组血清GSH-Px活性明显降低(P<0.01)。与模型组相比,药膳低、中、高剂量组以及雷贝拉唑组的血清GSH-Px活性均明显升高(P<0.05或P<0.01)。药膳高剂量组血清GSH-Px活性高于雷贝拉唑组(P<0.05)。6.对一氧化氮(NO)的影响与正常对照组相比,模型组血清NO含量明显降低(P<0.01)。与模型组相比,药膳中、高剂量组及雷贝拉唑组的血清NO含量均明显升高(P<0.05或P<0.01)。药膳高剂量组疗效优于雷贝拉唑组(P<0.05)。7.对胃泌素(GAS)、胃动素(MTL)的影响与正常组相比,模型组血清GAS含量明显升高(P<0.01)。与模型组相比,药膳中、高剂量组及雷贝拉唑组的血清GAS降低(P<0.05或P<0.01)。药膳高剂量组优于雷贝拉唑组(P<0.05)。与正常组相比,模型组血清MTL含量明显升高(P<0.01)。与模型组相比,药膳各剂量组及雷贝拉唑组的血清MTL含量无差别(P<0.05)。但数据显示药膳组及雷贝拉唑组有降低胃动素水平的趋势。8.对前列腺素E2(PGE2)、表皮生长因子(EGF)的影响与正常组相比,模型组PGE2含量明显降低(P<0.05)。与模型组相比,药膳低、中、高剂量组及雷贝拉唑组的PGE2含量有差异(P<0.05或P<0.01)。药膳高剂量组胃组织PGE2含量高于雷贝拉唑组(P<0.05)。与正常组相比,模型组EGF含量明显降低(P<0.05)。与模型组相比,药膳中、高剂量组及雷贝拉唑组的EGF含量有差异(P<0.05或P<0.01)。药膳高剂量组胃组织EGF含量高于雷贝拉唑组(P<0.01)。9.对血管内皮生长因子mRNA (VEGFmRNA)表达的影响与正常组相比模型组VEGFmRNA的相对表达量降低(2-ΔΔCT<0.5);与模型组相比,药膳低剂量组的VEGFmRNA的相对表达量无差异(0.5<2-ΔΔCT<2)药膳中高剂量组以及雷贝拉唑组VEGFmRNA的相对表达量增高(2-ΔΔCT>2)。结论:八珍猪肚药膳对胃溃疡具有较好促愈合作用,呈剂量依赖性。其机制可能与减轻胃粘膜的损伤(降低胃液量、胃液酸度、胃蛋白酶活性、GAS、MDA的含量),增强胃粘膜防御能力(提高SOD、GSH-Px、EGF、NO、PGE2、VEGFmRNA的含量及机体免疫功能)有关。

全文目录


中文摘要  6-9
ABSTRACT  9-13
前言  13-16
第一章 八珍猪肚药膳对脾虚型胃溃疡的治疗作用  16-34
  1 实验材料  16-17
    1.1 实验动物  16
    1.2 实验药品  16
    1.3 实验试剂  16
    1.4 实验仪器  16-17
  2 实验方法  17-21
    2.1 药物配制  17
    2.2 大鼠脾虚型胃溃疡模型的建立  17-18
    2.3 动物分组及给药  18
    2.4 样本采集及处理  18
    2.5 实验指标及其检测方法  18-21
    2.6 统计学处理  21
  3 实验结果  21-31
    3.1 脾虚模型的验证  21-22
    3.2 八珍猪肚药膳对脾虚型胃溃疡大鼠的影响  22-31
  4 讨论  31-33
    4.1 大鼠脾虚型胃溃疡实验动物模型的建立  31-32
    4.2 药效学评价  32-33
  5 小结  33-34
第二章 八珍猪肚药膳抗脾虚型胃溃疡的机制研究  34-55
  1 实验材料  34-35
    1.1 实验动物  34
    1.2 实验药品  34
    1.3 实验试剂  34-35
    1.4 实验仪器  35
  2 实验方法  35-43
    2.1 药物配制及给药  35-36
    2.2 大鼠脾虚型胃溃疡模型的建立  36
    2.3 动物分组及给药  36-37
    2.4 样本采集及处理  37
    2.5 实验指标及其检测方法  37-43
    2.6 统计学处理  43
  3 实验结果  43-50
    3.1 胃液量、胃酸及胃蛋白酶活性的变化  43-45
    3.2 SOD、MDA、GSH-Px的变化  45-47
    3.3 NO的变化  47-48
    3.4 GAS、MTL的的变化  48-49
    3.5 PGE_2、EGF的变化  49-50
    3.6 VEGFmRNA的表达  50
  4 讨论  50-54
    4.1 对脾虚型胃溃疡大鼠胃酸、胃蛋白酶活性的影响  51
    4.2 对脾虚型胃溃疡大鼠氧自由基的影响  51-52
    4.3 对脾虚型胃溃疡大鼠NO的影响  52
    4.4 对脾虚型胃溃疡大鼠胃肠激素的影响  52-53
    4.5 对脾虚型胃溃疡大鼠PGE_2、EGF、VEGFmRNA的影响  53-54
  5 小结  54-55
结论  55-56
参考文献  56-59
附录  59-61
致谢  61-62
文献综述  62-68
  参考文献  65-68
作者简历  68

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