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鹅不食草化学成分及抗肿瘤活性研究
作 者: 朱艳平
导 师: 吴和珍
学 校: 湖北中医药大学
专 业: 中药学
关键词: 鹅不食草 化学成分 结构鉴定 抗肿瘤
分类号: R284
类 型: 硕士论文
年 份: 2012年
下 载: 109次
引 用: 1次
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内容摘要
鹅不食草[Centipeda minima (L.) A.Br.et Aschers.]系菊科(Compositae)石胡荽属植物,为常用中药,药用全草,收载于《中华人民共和国药典》(2010年版一部),具有通鼻窍,止咳的功效,用于治疗风寒头痛,咳嗽痰多,鼻塞不通,鼻渊流涕、风湿关节痛、疟疾、湿疮肿毒、跌打肿痛、毒蛇咬伤等。现代药理研究表明,鹅不食草具有较好的抗肿瘤活性。前期工作发现鹅不食草中短叶老鹳草素、二氢堆心菊灵和蒲公英甾醇具有较好的抗肿瘤活性,但抗肿瘤作用的物质基础尚不十分清楚。为了探讨鹅不食草抗肿瘤作用的物质基础,本论文在前期研究的基础上,以系统溶剂法将鹅不食草乙醇提取物依次萃取,分为乙酸乙酯部位、正丁醇部位等提取物。采用硅胶柱色谱、凝胶渗透色谱及MCI-GEL CHP20P柱色谱等方法,对鹅不食草抗肿瘤活性部位,即乙酸乙酯部位的化学成分进行了较系统的分离纯化,从中共分离得到11个单体化合物。通NMR. MS等波谱技术分别鉴定为p-谷甾醇(β-sitosterol, D1)、(22E,20S,24R)-5a,8a-桥二氧-麦角甾烷-6,22-二烯-3p-醇(5a,8a-epidioxy-(22E,20S,24R)-ergosta-6,22-dien-3β-o1、D2)、蒲公英甾醇乙酰酯(Taraxasteryl acetate, D3)、羽扇豆醇(Lupeol, D4)、短叶老鹳草素(Brevilin,D5)、菠菜甾醇(Spinasterol, D6)、β-胡萝卜苷(β-sitosterylpalmitate, D7)、3-甲氧基槲皮素(3-methoxyquercetin, D8、槲皮素(Quercetin, D9)、10-羟基-8,9-二氧戊环-麝香草酚(10-Hydroxy-8、9-dioxyisopropylidene-thymol, D10)、鹅不食草酚(Centipedaphenol, D11)。采用MTT法,以SGC-7901细胞为受试对象,对上述分离得到的单体化合物进行了抗肿瘤活性筛选,筛选出4个具有较明显抗肿瘤活性的化合物,分别是羽扇豆醇(Lupeol, D4)、短叶老鹳草素(Brevilin, D5)、3-甲氧基槲皮素(3-methoxyquercetin, D8)和槲皮素(Quercetin, D9)。它们的IC50分别为:53.9μg·mL-1、7.6μg·mL-1、47.5μg·mL-1、26.5μg·mL-1。另外,还筛选出3个具有一定抗肿瘤活性的化合物,分别为(22E,20S,24R)-5α,8α-桥二氧-麦角甾烷-6,22-二烯-3β-醇[5a,8a-epidioxy-(22E,20S,24R)-ergosta-6,22-dien-3β-o1, D2]、10-羟基-8,9-二氧戊环-麝香草酚(10-Hydroxy-8,9-dioxyisoprop-ylidene-thymol, D10)、鹅不食草酚(Centipedaphenol, D11),它们的IC50分别为:147.1μg·mL-1、176.3μg·mL-1、184.5μg·mL-1。从而为进一步研究鹅不食草抗肿瘤作用的物质基础提供了科学依据,同时也丰富了鹅不食草活性成分的研究内容。
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全文目录
摘要 6-8 ABSTRACT 8-10 缩略语释义 10-11 前言 11-13 第一章 综述 13-30 1 本草考证 13-14 2 鹅不食草生药学研究 14-15 3 鹅不食草化学成分研究 15-22 3.1 倍半萜类成分 15-16 3.2 三萜及其苷类 16-18 3.3 黄酮类成分 18-19 3.4 挥发油类成分 19-20 3.5 甾体类成分 20-21 3.6 其它类成分 21-22 4 鹅不食草药理活性研究 22-26 4.1 抗过敏作用 22-23 4.2 抗突变作用 23 4.3 抗肿瘤和细胞毒活性 23-24 4.4 抗炎作用 24-25 4.5 抗原生物作用 25 4.6 抗菌作用 25 4.7 其它作用 25-26 5 临床应用研究 26-28 5.1 治疗百日咳 26 5.2 治疗鼻炎和鼻窦炎 26-27 5.3 治疗疟疾 27 5.4 治疗关节扭伤、腰肌劳损、风湿疼痛 27 5.5 治疗偏头痛 27-28 5.6 治疗面神经麻痹 28 5.7 治疗结石症 28 6 研究目标和意义 28-30 第二章 鹅不食草乙酸乙酯部位化学成分的研究 30-44 1 实验部分 33-35 1.1 试药与仪器 33-34 1.2 提取分离 34-35 2 结构鉴定 35-44 2.1 化合物D1的鉴定 35-36 2.2 化合物D2的鉴定 36 2.3 化合物D3的鉴定 36-37 2.4 化合物D4的鉴定 37-38 2.5 化合物D5的鉴定 38-39 2.6 化合物D6的鉴定 39 2.7 化合物D7的鉴定 39-40 2.8 化合物D8的鉴定 40-41 2.9 化合物D9的鉴定 41 2.10 化合物D10的鉴定 41-43 2.11 化合物D11的鉴定 43-44 第三章 鹅不食草抗肿瘤活性的研究 44-53 1 实验材料与设备 44-46 1.1 实验材料与试剂 44-45 1.2 仪器与设备 45 1.3 细胞株 45-46 2 实验试剂及试药的配置 46-47 2.1 PBS缓冲液的配置 46 2.2 双抗的配置 46 2.3 RPMI1640完全培养基的配置 46 2.4 0.25%胰酶消化液配置 46 2.5 MTT溶液的配置 46-47 2.6 细胞冻存液的配置 47 2.7 试药的配置 47 3 实验方法 47-49 3.1 细胞培养 47-48 3.2 MTT法测细胞生长抑制率 48-49 4 结果与讨论 49-53 4.1 结果 49-52 4.2 讨论 52-53 结语与创新 53-54 参考文献 54-58 附图 58-63 已发表和待发表文章 63-64 致谢 64
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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药化学
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