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醒脑解郁胶囊对卒中后慢性应激抑郁模型大鼠突触蛋白的影响

作　者: 杨茹
导　师: 闫咏梅
学　校: 陕西中医学院
专　业: 中西医结合临床
关键词: 卒中后抑郁模型醒脑解郁胶囊 SYT Real-Time PCR
分类号: R277.7
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
下　载: 49次
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内容摘要

目的：研究醒脑解郁胶囊对卒中后慢性应激抑郁模型大鼠海马区SYT及SYTmRNA在海马区域的分布以及表达量的影响。以探讨其治疗卒中后抑郁的作用机制，为卒中后抑郁提供新的、有效的治疗方法。方法：采用左侧大脑中动脉线栓法（MCAO）联合慢性不可预见的温和性刺激（CUMS）及孤养法复合造模法造成PSD大鼠模型。实验选取Sprague-Dawley（SD）雌雄各半的大鼠，根据旷野实验评分，将大鼠随机分为6组：A组模型对照组、B组空白对照组、C组百忧解组、D组醒脑解郁胶囊高剂量组、E组醒脑解郁胶囊中剂量组、F组醒脑解郁胶囊低剂量组。除空白组外其他组均采用复合造模法建立PSD模型。模型建立后，A、B组大鼠给予蒸馏水灌胃，C组大鼠给予百忧解灌胃，D、E、F组分别按高中低剂量给予醒脑解郁胶囊灌胃，每组连续给药28天，期间分别观察大鼠敞箱实验和蔗糖消耗行为学指标变化。于末次灌胃后第二天断头取脑，解剖并完整剥离海马，应用免疫组织化学方法观察大脑海马病理组织切片、采用实时荧光定量Real-TimePCR法检测大鼠海马SYTmRNA水平的表达，统计分析实验数据，探讨中药复方制剂醒脑解郁胶囊对卒中后抑郁大鼠海马突触蛋白的影响，并初步探讨其作用机制。结果：通过MACO法联合CUMS法及孤养复合模型法成功制备SD大鼠PSD模型,大鼠出现明显行为学改变，脑组织形态学结构明显改变，说明此法可以复制出较为理想的大鼠PSD模型。1.醒脑解郁胶囊对PSD模型大鼠行为学的影响大鼠造模后，模型组大鼠的体重增加缓慢，敞箱实验中的垂直运动、水平运动得分显著延长，糖水消耗明显下降，与空白组相比，具有显著差异性（P＜0.05），提示卒中后慢性应激抑郁能够影响大鼠的体重及行为学指标；治疗后，与模型组比较，醒脑解郁胶囊各组和百忧解组的各项指标均有明显改善、均能明显增加PSD大鼠体重，显著差异性（P＜0.05），而醒脑解郁胶囊高、中剂量与百忧解疗效无显著差异（P＞0.05）；提示两者均能改善PSD大鼠体重及行为学指标。2.醒脑解郁胶囊对PSD大鼠海马SYT免疫组织化学法结果结果显示：与空白组相比，模型组大鼠海马区内的SYT阳性表达颜色较浅，其平均光密度值减少，具有统计学意义（P＜0.01）。与模型组相比较，醒脑解郁胶囊各剂量组及百忧解组大鼠海马区SYT表达较模型组明显增强，平均光密度值显著增强。具有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01），但是与空白组相比，阳性细胞数和光密度值仍下降和减少（P＜0.05）。3.醒脑解郁胶囊对PSD大鼠海马SYTmRNA的影响与空白组比较，模型组大鼠海马的SYTmRNA表达明显下降，具有显著差异性（P＜0.05），与模型组比较，醒脑解郁胶囊高、中、低剂量组和百忧解组大鼠海马SYTmRNA表达显著增加，具有显著差异性（P＜0.05）结论：PSD模型大鼠食欲减退、活动能力下降、兴趣偏爱丧失、快感缺乏与临床PSD患者临床表现中的某些症状类似，经过灌胃治疗后可改善上述各项行为学的变化。说明模型复制成功。通过上调突触蛋白SYT及SYTmRNA在海马区的表达，增强突触可塑性发挥抗抑郁作用可能是醒脑解郁胶囊治疗PSD机制之一。

全文目录

中文摘要  3-5
Abstract  5-10
引言  10-12
第一部分卒中后抑郁症  12-27
  一、卒中后抑郁的流行病学研究  12-13
  二、卒中后抑郁中医学研究进展  13-19
    （一）病因病机论述  13-14
    （二）辨证分型  14-16
    （三）中医药治疗  16-19
  三、卒中后抑郁的西医研究进展  19-27
    （一）病因与发病学说  19-21
    （二）发病机制  21-24
    （三）临床表现  24
    （四）临床诊断  24-25
    （五）治疗  25-26
    （六）预防  26-27
第二部分实验部分  27-52
  技术路线  27-28
  一、实验一醒脑解郁胶囊对 PSD 大鼠行为学的影响  28-39
    （一）实验目的  28
    （二）实验材料  28-29
    （三）模型的制备  29-30
    （四）实验方法  30-31
    （五）统计学处理  31-32
    （六）实验结果  32-35
    （七）讨论  35-39
  二、实验二醒脑解郁胶囊对 PSD 大鼠海马突触蛋白 SYT 的影响  39-42
    （一）实验材料  39
    （二）实验动物  39
    （三）主要试剂及药物  39
    （四）主要实验仪器及工作液  39-40
    （五）免疫组化用脑组织处理  40-41
    （六）结果观察方法  41
    （七）统计学处理  41
    （八）实验结果  41-42
    （九）讨论  42
  三、实验三醒脑解郁胶囊对 PSD 大鼠海马突触蛋白 SYTMRNA 表达的影响  42-52
    （一）实验材料  42
    （二）实验动物  42
    （三）主要试剂及器材  42-43
    （四）实验动物取材  43
    （五）实验方法  43
    （六）操作步骤  43-46
    （七）统计学处理  46
    （八）实验结果  46-47
    （九）讨论  47-52
结论  52-53
参考文献  53-61
附录  61-63
致谢  63

醒脑解郁胶囊对卒中后慢性应激抑郁模型大鼠突触蛋白的影响

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