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棉籽粕中棉酚提取及固态发酵产生棉籽肽的研究

作　者: 田庆
导　师: 王瑞明
学　校: 山东轻工业学院
专　业: 轻工技术与工程
关键词: 棉粕醋酸棉酚提取黑曲霉固态发酵
分类号: S816
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

本研究主要针对增加棉粕的利用价值，综合开发棉粕的衍生产品。首先采用传统苯胺工艺及新型乙醚提取技术从棉粕中提取棉酚，将精制后的醋酸棉酚用现代波谱和光谱仪器对其进行结构表征，比对提取结果，并进一步研究了醋酸棉酚得抗氧化及对细胞增殖抑制活性的影响。之后收集提取棉酚后的棉粕，进行黑曲霉AS3.350固态发酵，生产棉籽肽，并对其各项指标进行测定，确定最佳发酵工艺条件，为工业化生产提供理论依据。主要结果如下：（1）提取精制醋酸棉酚，苯胺法提取纯度为99.2%、提取率为63.4%，乙醚索氏提取法提取纯度为96.7%、提取率为57.5%。（2）醋酸棉酚保存条件为避光、低温、乙醚浸泡。（3）醋酸棉酚对人T淋巴瘤细胞系细胞（Hut-102）有一定的抑制作用，其半数抑制浓度为4.04μmol/L，且抑制效果随时间的延长逐渐增加。（4）黑曲霉在察氏培养基中生长16h时，菌体进入生长旺盛阶段，适于接种固态发酵基质。（5）黑曲霉固态发酵最优发酵条件为：棉粕含量90%，PH5.9，温度31℃，发酵时间96h；此时肽转化率为67.5%、蛋白酶酶活475U/g。

全文目录

目录  5-8
摘要  8-9
ABSTRACT  9-10
第1章绪论  10-18
  1.1 棉籽饼粕简介  10-13
    1.1.1 棉籽饼粕的生产及加工概况  10-11
    1.1.2 棉籽饼粕的营养价值  11-12
    1.1.3 棉籽粕的抗营养因子  12-13
  1.2 棉酚的提取方法及应用概况  13-14
    1.2.1 棉酚的提取方法  13
      1.2.1.1 苯胺沉淀法  13
      1.2.1.2 碱液提取法  13
      1.2.1.3 色腺体浮选法  13
      1.2.1.4 丙酮水稀释法  13
    1.2.2 棉酚的应用  13-14
      1.2.2.1 抗生育作用  14
      1.2.2.2 抗肿瘤作用  14
      1.2.2.3 抗病毒作用  14
      1.2.2.4 棉酚在工业上的应用  14
      1.2.2.5 棉酚在农业上的应用  14
  1.3 固态发酵技术及棉籽肽研究概况  14-15
    1.3.1 固态发酵技术简介  14-15
    1.3.2 棉籽肽研究概述  15
      1.3.2.1 小肽的营养作用  15
      1.3.2.2 小肽的生理活性作用  15
  1.4 立题依据及研究内容  15-18
    1.4.1 立题依据  15-16
    1.4.2 研究内容  16-18
第2章醋酸棉酚的制备  18-24
  2.1 引言  18
  2.2 材料与方法  18-20
    2.2.1 材料与试剂  18
    2.2.2 主要仪器与设备  18
    2.2.3 苯胺法制备醋酸棉酚  18-20
      2.2.3.1 制备原理  18-19
      2.2.3.2 试验操作步骤  19-20
    2.2.4 乙醚索氏提取制备醋酸棉酚  20
      2.2.4.1 制备原理  20
      2.2.4.2 试验操作步骤  20
    2.2.5 醋酸棉酚分析  20
  2.3 结果与讨论  20-23
    2.3.1 产量及纯度比较  20-21
    2.3.2 红外光谱扫描  21-22
    2.3.3 核磁共振扫描  22-23
  2.4 小结  23-24
第3章棉酚抗氧化及细胞增殖抑制研究  24-28
  3.1 引言  24
  3.2 材料与方法  24-25
    3.2.1 药品及试剂  24
    3.2.2 主要仪器与设备  24-25
    3.2.3 溶液配制  25
    3.2.4 醋酸棉酚抗氧化试验  25
    3.2.5 醋酸棉酚细胞增殖抑制试验  25
  3.3 结果与分析  25-27
    3.3.1 醋酸棉酚抗氧化试验  25-26
    3.3.2 醋酸棉酚的细胞增殖抑制研究  26-27
      3.3.2.1 醋酸棉酚浓度对细胞增殖抑制的影响  26
      3.3.2.2 醋酸棉酚作用时间对细胞增殖抑制的影响  26-27
  3.4 小结  27-28
第4章黑曲霉生长曲线测定  28-32
  4.1 引言  28
  4.2 材料与方法  28-29
    4.2.1 原料  28
    4.2.2 主要仪器与设备  28
    4.2.3 生长曲线材料准备及配置  28
    4.2.4 试验方法  28-29
  4.3 结果与分析  29-30
  4.4 小结  30-32
第5章黑曲霉发酵棉粕制备棉籽肽的研究  32-47
  5.1 引言  32
  5.2 材料与方法  32-34
    5.2.1 原料  32
    5.2.2 主要仪器设备  32
    5.2.3 试剂配制  32
    5.2.4 实验方法  32-34
      5.2.4.1 固态发酵工艺流程  32-33
      5.2.4.2 还原糖及总糖的测定  33
      5.2.4.3 蛋白酶酶活的测定  33-34
      5.2.4.4 肽转化率的测定  34
      5.2.4.5 pH 值的测定  34
  5.3 结果与分析  34-45
    5.3.1 固态发酵过程动态变化  34-38
      5.3.1.1 总糖、还原糖  34-36
      5.3.1.2 蛋白酶酶活  36-37
      5.3.1.3 肽转化率  37
      5.3.1.4 PH 值  37-38
    5.3.2 单因素试验  38-45
      5.3.2.1 棉粕含量、温度、PH 值对蛋白酶酶活的影响  38-39
      5.3.2.2 棉粕含量、温度、PH 值对肽转化率的影响  39-40
      5.3.2.3 棉粕含量、温度、PH 值对还原糖的影响  40-42
      5.3.2.4 棉粕含量、温度、PH 值对总糖的影响  42-45
  5.4 小结  45-47
第6章发酵棉粕饲喂效果的研究  47-53
  6.1 引言  47
  6.2 材料与方法  47-49
  6.3 结果与分析  49-50
  6.4 小结  50-53
结论  53-55
参考文献  55-59
致谢  59-60
硕士期间发表论文  60

棉籽粕中棉酚提取及固态发酵产生棉籽肽的研究

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