学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

葛根异黄酮的发酵提取工艺及其抗氧化性研究

作　者: 刘改霞
导　师: 顾振新
学　校: 南京农业大学
专　业: 食品科学
关键词: 葛根异黄酮 发酵 提取 纯化 抗氧化
分类号: TQ920.6
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
下　载: 16次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载
 

内容摘要


葛根为豆科葛属植物野葛(Pueraria lobata(Wild.)Ohwi)的根,属于“药食同源”植物,主要成分为纤维素、淀粉、异黄酮类化合物以及丰富的矿质元素等,其中葛根异黄酮(Radix pueraria isoflavones, RPI)为其主要功能性成分。RPI是一类植物雌激素,具有改善心脑血管代谢机能、抗衰老、抗癌、抗疲劳、抗氧化、增强机体免疫力以及解酒保肝等多种功能。葛根素(Puerarin)占RPI总量的50%以上,常被用作评价葛根品质的指标,并已广泛用于临床。本文考察了HPLC测定发酵液中葛根素的方法；以葛根为培养基主要原料,筛选适合发酵法提取RPI的菌种,优化了培养基组分及培养条件；采用大孔树脂对发酵产物进行纯化,比较了不同提取方法所得RPI的抗氧化活性。研究结果如下：1、对HPLC测定发酵液中葛根素含量的方法进行考察,结果表明此法稳定性好,精密度和加标回收率均较高,葛根素含量在40～200μg/mL之间线性相关(R2=0.9996),适用于发酵液中葛根素含量的测定。2、以葛根素提取量为指标,筛选后确定米根霉-酵母混合菌为最适发酵菌种；采用Plackett-Burman试验分析液料比、氮源和无机盐等因素对RPI产量的影响,其中液料比、蛋白胨和KH2PO4具有显著正效应,通过响应面试验对其进行水平优化。结果表明,液料比30：1、蛋白胨8.49 g/L、KH2PO4 6.89 g/L时,RPI和葛根素提取量分别可达到31.98和16.18 mg/g·DW。3、考察了糖化温度、后发酵温度、培养基初始pH、接种比例、装液量等因素对RPI提取量的影响；在单因素试验的基础上,以RPI为指标,采用响应面试验设计,对培养基初始pH、装液量和糖化温度进行了优化,得到最佳培养条件为：初始pH 6.88、装液量80 mL、糖化温度36.2℃、后发酵温度28℃、接种比例6%：6%,在此条件下RPI和葛根素提取量分别可达到40.29和18.36 mg/g·DW。4、比较了不同极性大孔树脂对发酵液中RPI的吸附和解吸能力,确定NKA-Ⅱ型大孔树脂效果最佳；测定了NKA-Ⅱ吸附RPI的动力学曲线,考察了不同吸附温度对RPI吸附量的影响,以及不同解吸剂浓度对RPI解吸量的影响,结果表明：最适纯化工艺为吸附时间8 h、吸附温度25℃、解吸剂60%乙醇溶液；经抗氧化试验比较,发酵法所得RPI清除DPPH和超氧阴离子自由基的活性均高于水提法和醇提法,清除羟自由基活性则相对较低。

全文目录


摘要  8-9ABSTRACT  9-11引言  11-12第一章 文献综述  12-26  1 葛根异黄酮的理化特性  12-13  2 葛根异黄酮对人体的功能  13-14    2.1 对心脑血管系统的调节作用  13    2.2 对内分泌系统的调节作用  13    2.3 抗肿瘤作用  13    2.4 抗氧化作用  13-14    2.5 解酒护肝作用  14    2.6 增强记忆力作用  14    2.7 其他作用  14  3 葛根异黄酮制备方法  14-17    3.1 浸渍法  15    3.2 渗漉法  15    3.3 回流提取法  15    3.4 超声辅助萃取法  15-16    3.5 微波辅助萃取法  16    3.6 酶解法  16-17    3.7 微生物发酵法  17  4 葛根异黄酮的纯化  17-20    4.1 沉淀法  17-18    4.2 溶剂萃取法  18    4.3 大孔树脂吸附分离法  18-19    4.4 高效液相色谱法  19    4.5 超滤膜法  19-20    4.6 其它方法  20  5 立题目的与意义  20-21  6 主要研究内容  21  参考文献  21-26第二章 HPLC测定葛根素方法的建立  26-32  1 材料与方法  26-27    1.1 试验材料  26    1.2 主要试剂  26    1.3 主要仪器  26-27    1.4 试验方法  27      1.4.1 色谱条件  27      1.4.2 样品制备  27      1.4.3 标准曲线  27      1.4.4 稳定性试验  27      1.4.5 精密度试验  27      1.4.6 加标回收率试验  27  2 结果与分析  27-29    2.1 标准曲线  27-28    2.2 稳定性  28-29    2.3 精密度  29    2.4 加标回收率  29  3 讨论  29-30  4 本章小结  30  参考文献  30-32第三章 发酵法提取葛根异黄酮的培养基优化  32-48  1 材料与方法  32-37    1.1 试验菌种及材料  32    1.2 主要试剂  32-33    1.3 主要仪器  33-34    1.4 试验方法  34-36      1.4.1 菌种筛选试验  34        1.4.1.1 种子液制备  34        1.4.1.2 培养基制备  34        1.4.1.3 培养条件  34      1.4.2 酵母菌生长曲线  34-35      1.4.3 培养基优化试验  35-36        1.4.3.1 发酵条件  35        1.4.3.2 Plackett-Burman试验  35-36        1.4.3.3 响应面试验  36    1.5 测定指标与方法  36-37      1.5.1 葛根异黄酮含量  36-37      1.5.2 葛根素含量  37      1.5.3 酵母菌生物量  37    1.6 数据处理与统计分析  37  2 结果与分析  37-42    2.1 发酵菌种确定  37-38    2.2 酵母菌生长曲线  38    2.3 培养基优化  38-42      2.3.1 Plackett-Burman试验结果  38-40      2.3.2 响应面试验结果  40-42      2.3.3 验证性试验  42  3 讨论  42-43  4 本章小结  43  参考文献  43-48第四章 发酵法提取葛根异黄酮的培养条件优化  48-60  1 材料与方法  48-51    1.1 试验菌种及材料  48    1.2 主要试剂  48-49    1.3 主要仪器  49    1.4 试验方法  49-50      1.4.1 糖化温度试验  49      1.4.2 后发酵温度试验  49      1.4.3 接种比例选择  49      1.4.4 初始pH选择  49-50      1.4.5 摇瓶装液量试验  50      1.4.6 响应面试验  50    1.5 测定指标与方法  50-51      1.5.1 葛根异黄酮含量  50      1.5.2 葛根素含量  50-51    1.6 数据处理与统计分析  51  2 结果与分析  51-56    2.1 米根霉糖化温度对葛根异黄酮产量的影响  51    2.2 后发酵温度对葛根异黄酮产量的影响  51-52    2.3 接种比例对葛根异黄酮产量的影响  52    2.4 初始pH对葛根异黄酮产量的影响  52-53    2.5 装液量对葛根异黄酮产量的影响  53    2.6 培养条件响应面优化  53-56    2.7 验证性试验  56  3 讨论  56-57  4 本章小结  57  参考文献  57-60第五章 大孔树脂纯化葛根异黄酮工艺  60-72  1 材料与方法  60-64    1.1 试验菌种及材料  60-61    1.2 主要试剂  61    1.3 主要仪器  61    1.4 大孔树脂预处理及再生  61-62    1.5 大孔树脂纯化葛根异黄酮  62-63      1.5.1 吸附率及解吸率试验  62      1.5.2 吸附动力学试验  62-63      1.5.3 温度与吸附量试验  63      1.5.4 解吸剂浓度与解吸量试验  63    1.6 葛根异黄酮抗氧化试验  63-64      1.6.1 样品制备  63      1.6.2 清除DPPH自由基活性试验  63-64      1.6.3 清除超氧阴离子自由基活性试验  64      1.6.4 清除羟自由基活性试验  64    1.7 测定指标与方法  64    1.8 数据处理与分析  64  2 结果与分析  64-68    2.1 大孔树脂纯化葛根异黄酮结果分析  64-67      2.1.1 大孔树脂对葛根异黄酮的吸附率及解吸率比较  64-65      2.1.2 大孔树脂对葛根异黄酮的吸附动力学曲线  65      2.1.3 温度对大孔树脂吸附葛根异黄酮能力的影响  65-66      2.1.4 解吸剂浓度对葛根异黄酮解吸率的影响  66      2.1.5 葛根异黄酮提取量及纯度比较结果  66-67    2.2 抗氧化试验结果  67-68      2.2.1 清除DPPH自由基能力  67      2.2.2 清除超氧阴离子自由基活性  67-68      2.2.3 清除羟自由基活性  68  3 讨论  68-69  4 本章小结  69  参考文献  69-72全文结论  72-76致谢  76

相似论文

  1. 基于SVM的高速公路路面浅层病害的自动检测算法研究,U418.6
  2. 苹果多酚对γ射线引起的免疫系统损伤防护作用研究,S661.1
  3. 空间目标ISAR成像仿真及基于ISAR像的目标识别,TN957.52
  4. 胆囊炎和肾病综合症脉象信号的特征提取与分类研究,TP391.41
  5. Q学习在基于内容图像检索技术中的应用,TP391.41
  6. 直推式支持向量机研究及其在图像检索中的应用,TP391.41
  7. 中医舌诊中舌形与齿痕的特征提取及分类研究,TP391.41
  8. 空间交会接近视觉测量方法研究,TP391.41
  9. 图像实时采集、存储与处理方法研究,TP391.41
  10. 唇读中的特征提取、选择与融合,TP391.41
  11. 多币种纸币处理技术的研究与实现,TP391.41
  12. 基于类Harr特征和最小包含球的纸币识别方法的研究,TP391.41
  13. 基于图像的路面破损识别,TP391.41
  14. 移动机器人视觉检测和跟踪研究,TP242.62
  15. 高光谱与高空间分辨率遥感图像融合算法研究,TP751
  16. 海红果醋加工技术的研究,TS264.22
  17. 扩展青霉TS414脂肪酶在毕赤酵母的表达、纯化及其催化外消旋萘普生酯化拆分的研究,Q814
  18. 米曲霉FS-1脂肪酶发酵优化、分离纯化与酶学特性的研究,TQ925.6
  19. 灰黄霉素产生菌FS80的诱变与选育研究,TQ927
  20. 金花茶多糖的分离纯化及化学结构的研究,S567.19
  21. 白骨壤果实中黄酮类化合物的提取、分离纯化及抗氧化活性研究,S793.9

中图分类: > 工业技术 > 化学工业 > 其他化学工业 > 发酵工业 > 一般性问题 > 发酵工艺
© 2012 www.xueweilunwen.com