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五角枫组织脱分化与器官再生的研究
作 者: 聂鹤云
导 师: 郑彩霞; 杨海灵
学 校: 北京林业大学
专 业: 生化与分子生物学
关键词: 五角枫 组织培养 愈伤组织诱导 器官发生 芽增殖 植物生长调节素
分类号: S792.99
类 型: 硕士论文
年 份: 2012年
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内容摘要
五角枫树种具有适应性强、抗逆性强、种间杂交能力强等优势,是中纬度地区广泛栽培的树种。五角枫具有重要的生态环保、食用、药用、保健、工业原料以及风景园林旅游资源价值。目前,五角枫主要通过播种或扦插繁殖,对于播种繁殖,其周期长,繁殖系数低,且容易发生变异;而扦插繁殖成活率的技术难题也一直未能突破。这导致了市场上的五角枫优良种苗供不应求。其快繁技术成为林木产业中亟待解决的一大问题。本文以五角枫为研究对象,对其组织脱分化与器官再生进行了初步的研究,主要研究结果如下:1、利用次氯酸钠对五角枫外植体进行消毒,可有效控制微生物的污染,易于获得无菌外植体并且利于其生长。五角枫外植体芽和种子的最佳消毒条件为,70%酒精浸泡30s, NaClO浓度为0.8%,消毒时间为25min。2、五角枫愈伤组织诱导中以幼叶为最佳诱导材料。通过对三种植物生长调节剂的研究发现,五角枫外植体愈伤组织高效诱导的最优组合是6-BA0.5mg/L+2,4-D1.0mg/L+NAA0.5mg/L。此外,正交试验结果的极差和方差分析发现,外植体和三种激素对五角枫愈伤组织诱导影响的主次关系为:D(外植体)>B(6-BA浓度)>C(2,4-D浓度)>A(NAA浓度)。3、外源生长调节物对愈伤增殖的作用影响大小依次为:6-BA、2,4-D、NAA、 TDZ。在这四种外源生长调节物中6-BA是对五角枫愈伤组织的增殖影响最大的因素,其用量的差异会显著影响愈伤诱导率。正交实验表明,五角枫愈伤组织的增殖的最佳组合为:MS基本培养基+6-BA1.0mg/L+2,4-D0.5mg/L+NAA0.5mg/L+TDZ1.5mg/L。4.植物生长调节物对五角枫器官发生也有显著的影响。研究发现,愈伤组织芽分化培养基为:MS+6-BA0.3mg/L+NAA0.05mg/L。芽增殖的较适培养基为MS+TDZ0.04mg/L。
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全文目录
摘要 3-4 ABSTRACT 4-9 1 绪论 9-23 1.1 研究背景 9 1.2 五角枫生物学特性和种质资源的研究 9-11 1.2.1 五角枫生理方面的研究 9-10 1.2.2 五角枫的抗逆性研究 10 1.2.3 栽培管理技术进展 10-11 1.2.4 五角枫应用研究进展 11 1.3 植物组织培养研究进展 11-22 1.3.1 国外植物组织培养研究进展 11-14 1.3.1.1 国外植物组培简介 11-12 1.3.1.2 愈伤组织诱导的研究进展 12-13 1.3.1.3 体细胞胚诱导的研究进展 13-14 1.3.2 国内植物组织培养研究进展 14-18 1.3.2.1 国内植物组织培养技术概述 14-15 1.3.2.2 愈伤组织诱导的研究进展 15-16 1.3.2.3 芽增殖的研究进展 16-17 1.3.2.4 组织器官发生的研究进展 17-18 1.3.3 影响槭树科植物组织培养的因子 18-22 1.3.3.1 外植体 18 1.3.3.2 植物生长调节剂 18-20 1.3.3.3 碳源 20-21 1.3.3.4 其他研究 21-22 1.4 研究的目的和意义 22-23 2 五角枫种子和外植体芽灭菌技术的优化 23-30 2.1 材料与方法 23-24 2.1.1 试验材料 23 2.1.2 试剂与仪器 23 2.1.3 试验方法 23-24 2.1.4 数据分析 24 2.2 结果与分析 24-29 2.2.1 不同消毒时间对外植体芽的消毒效果的影响 24-27 2.2.2 不同消毒时间对外植体消毒效果的影响 27-29 2.3 讨论 29 2.4 小结 29-30 3 五角枫组织脱分化的研究 30-35 3.1 材料与方法 30-31 3.1.1 五角枫种子的消毒与灭菌 30 3.1.2 五角枫无菌苗的获得 30 3.1.3 愈伤组织的诱导 30-31 3.2 试验结果 31-34 3.2.1 不同外植体产生愈伤组织的能力 31-32 3.2.2 不同激素配比对愈伤组织诱导的比较 32-34 3.3 讨论 34 3.4 小结 34-35 4 五角枫组织培养器官再生能力的研究 35-43 4.1 材料与方法 35-38 4.1.1 无菌体系的建立 35 4.1.2 五角枫组织脱分化及愈伤组织增殖 35-36 4.1.3 器官发生 36-38 4.2 试验结果 38-41 4.2.1 外源生长调节物对愈伤组织增殖的影响 38-39 4.2.2 外源生长调节物对愈伤组织再分化的影响 39-41 4.3 讨论 41-43 5 总结 43-45 5.1 结论 43 5.2 有待进一步加深的研究 43-45 参考文献 45-55 图版 55-57 个人简介 57-59 导师简介 59-61 致谢 61
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中图分类: > 农业科学 > 林业 > 森林树种 > 阔叶乔木 > 其他
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