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桑肠杆菌VL4-3转化阿魏酸生产香兰素的研究

作　者: 喻林
导　师: 陈勇
学　校: 湖北大学
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: 桑肠杆菌香兰素阿魏酸发酵
分类号: TQ920.6
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要

香兰素是一种广泛应用的化合物,在化工、医药、食品和农业等领域都有广泛的应用。由于香兰素的化学合成法对环境有较大污染,其生物转化法已成目前研究热点。用生物转化法生产香兰素主要以丁香酚、异丁香酚、香草醇、香草胺、松柏醇、阿魏酸等天然化合物为其转化前体。本实验室从自然界中筛选出一株能够以阿魏酸为底物发酵生产香兰素的菌株,经鉴定该菌株为桑肠杆菌VL4-3(Enterobacter mori VL4-3)。本文以阿魏酸为底物,对该菌转化生产香兰素的发酵工艺进行了如下优化：(1)以高氏一号培养基为基础培养基,在摇瓶水平上通过单因素实验和正交试验对影响香兰素产量的碳源、氮源和无机盐进行了优化,优化后培养基配方为：麸皮10g/L,豆粕1g/L,硫酸亚铁0.5g/L,氯化钠0.5g/L。(2)以优化的发酵培养基为基础,考察了pH值、温度、摇床转速、装液量、接种量、底物加入量、光照/避光对发酵生产香兰素的影响,得到了摇瓶条件下最适发酵条件为：pH=8.0,接种量10%,摇瓶装液量10%,阿魏酸最大加入量10g/L,37℃,100rpm,避光培养12天。(3)在上述优化发酵条件为基础,考察了种子培养基种类、种子培养时间、种子培养转速、种子培养温度对香兰素产量的影响,得到了摇瓶条件下最适利,子培养基为牛肉膏蛋白胨培养基,最佳种子培养条件：25℃,100rpm,24h.在上述优化发酵条件下,发酵液中香兰素最大浓度为2262.43mg/L,最大转化率为28.87%。

全文目录

摘要  5-6
Abstract  6-10
第一章绪论  10-28
  1.1 香兰素的概况  10-11
    1.1.1 香兰素的理化性质  10
    1.1.2 香兰素的用途  10-11
  1.2 香兰素的生产方法  11-25
    1.2.1 化学合成法  12-16
    1.2.2 生物转化法  16-25
  1.3 香兰素的市场概况及趋势  25-26
  1.4 研究意义和主要研究内容  26-28
    1.4.1 研究意义  26-27
    1.4.2 主要研究内容  27-28
第二章材料与方法  28-35
  2.1 实验材料  28-31
    2.1.1 筛选样品来源  28
    2.1.2 仪器  28-29
    2.1.3 试剂  29-30
    2.1.4 培养基  30
    2.1.5 溶液及其配制方法  30-31
  2.2 试验方法  31-35
    2.2.1 菌种筛选  31-32
    2.2.2 菌株的鉴定方法  32
    2.2.3 发酵工艺的优化方法  32-35
第三章结果与讨论  35-50
  3.1 香兰素的色谱分析  35-37
  3.2 菌种的筛选  37-38
  3.3 菌种的鉴定  38
  3.4 发酵培养基对香兰素产量的影响  38-41
    3.4.1 碳源对香兰素产量的影响  38-39
    3.4.2 氮源对香兰素产量的影响  39-40
    3.4.3 无机盐离子对香兰素产量的影响  40-41
    3.4.4 碳源、氮源和无机盐相对含量对香兰素产量的影响  41
  3.5 发酵培养条件对香兰素产量的影响  41-46
    3.5.1 pH值对香兰素产量的影响  41-43
    3.5.2 发酵温度对香兰素产量的影响  43
    3.5.3 接种量、阿魏酸添加量和阿魏酸添加时间对香兰素产量的影响  43-44
    3.5.4 摇瓶装液量对香兰素产量的影响  44-46
    3.5.5 光照对香兰素产量的影响  46
  3.6 种子培养基和培养条件的优化  46-48
    3.6.1 种子液的培养温度对香兰素产量的影响  46-47
    3.6.2 种子培养基对香兰素产量的影响  47-48
    3.6.3 种子液的转速对香兰素产量的影响  48
  3.7 底物最大加入量对香兰素产量的影响  48-49
  3.8 优化结果的验证  49-50
结论  50-51
展望  51-52
参考文献  52-57
附录  57-58
致谢  58

桑肠杆菌VL4-3转化阿魏酸生产香兰素的研究

内容摘要

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