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GLI1基因siRNA腺病毒载体的构建及其治疗胰腺癌的实验研究

作　者: 郭杰芳
导　师: 许国铭；李兆申；金震东
学　校: 第二军医大学
专　业: 内科学
关键词: 胰腺癌基因治疗 Hedgehog信号通路转录因子 GLI1 RNAi 非增殖型腺病毒
分类号: R735.9
类　型: 博士论文
年　份: 2007年
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内容摘要

本研究旨在将RNA干扰技术与基因治疗相结合,探讨腺病毒介导的GLI1siRNA在胰腺癌治疗中的作用。首先通过逆转录多聚酶链式反应检测五株人胰腺癌细胞中GLI1、PTCH1基因的表达;接着将完整的GLI1siRNA表达框架插入腺病毒穿梭质粒,与BJ5183-AdEasy-1同源重组后转染293细胞,获得表达GLI1siRNA的重组腺病毒Ad-U6-GLI1siRNA;然后通过定量多聚酶链式反应和免疫印迹检测GLI1siRNA腺病毒对胰腺癌细胞GLI1基因及蛋白表达的影响,通过MTT及流式细胞术检测其对胰腺癌细胞增殖及凋亡的影响;最后通过建立裸鼠胰腺癌皮下移植瘤,进一步观察GLI1siRNA腺病毒对胰腺癌的体内治疗效果。本研究发现五株人胰腺癌细胞均表达不同程度GLI1和PTCH1;GLI1siRNA腺病毒能有效地抑制胰腺癌细胞GLI1基因及蛋白的表达;在体内外均有效地抑制胰腺癌的生长,治疗适应症广,疗效好,毒副反应少,具有良好的应用前景。

全文目录

摘要  4
英文摘要  4-6
英文缩略词表  6-8
详细摘要  8-19
前言  19-21
第一部分人胰腺癌细胞株GL11及PTCH1基因表达的检测  21-37
  材料与方法  21-30
  结果  30-33
  讨论  33-35
  参考文献  35-37
第二部分 GL11基因siRNA腺病毒载体的构建  37-57
  材料和方法  37-47
  结果  47-52
  讨论  52-55
  参考文献  55-57
第三部分GL11基因siRNA腺病毒对胰腺癌细胞增殖及凋亡的影响  57-82
  材料与方法  57-63
  结果  63-77
  讨论  77-80
  参考文献  80-82
第四部分GL11 基因siRNA 腺病毒治疗裸鼠胰腺癌移植瘤的实验研究  82-99
  材料与方法  82-86
  结果  86-95
  讨论  95-97
  参考文献  97-99
小结  99-100
综述一动脉粥样硬化相关自身抗体的研究进展  100-106
综述二 Toll 样受体与动脉粥样硬化  106-112
在读期间发表论文  112
参编专著  112-113
致谢  113

GLI1基因siRNA腺病毒载体的构建及其治疗胰腺癌的实验研究

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