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沙眼衣原体18KDa粘连蛋白的初步研究

作　者: 李元
导　师: 汪美先；马文煜
学　校: 第四军医大学
专　业: 医学微生物学
关键词: 沙眼衣原体 18KDa粘连蛋白基因克隆表达单克隆杭体中和作用
分类号: R374
类　型: 博士论文
年　份: 1995年
下　载: 33次
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内容摘要

沙眼衣原体是真核细胞内寄生的微生物，它可引起多种疾病，如1)沙眼，是致盲病因的第一位；2)包涵体性结膜炎；3)婴儿衣原体肺炎；4)男性非淋病性尿道炎，发病率与淋病相似；5)女性衣原体性宫颈炎、输卵管炎等，可导致不育；6)性病淋巴肉芽肿；7)Reiter氏综合症等，是重要的性病病原微生物。目前我国对衣原体研究相对薄弱，极需加强。沙眼衣原体与许多病原微生物一样粘附于宿主细胞是引起感染的先决条件，目前已知沙眼衣原体有两种粘连真核细胞膜的蛋白，深入研究粘连蛋白。将有助于了解衣原体感染致病的最初进程，明确粘连蛋白在致病与免疫中所起作用，为寻找特异有效的预防治疗制剂开拓新的途径。按常规方法提纯沙眼衣原体L2型基因组，根据Kaal．R发表的18KDa蛋白的基因图谱，采用PstⅠ和XbaⅠ双酶切，琼脂糖电泳后提取670bq的目的基因，插入到经相同内切酶消化的pUC19质粒中，转化E．coli JM109株，涂布在含X-gal、IPTG及氨苄青霉素的营养琼脂上37℃静置培养12小时，挑选有插入片段的白色克隆，经PstⅠ．XbaⅠ双酶切方法鉴定，筛选含有670bq片段的克隆。该670bq片段的多核苷酸链中含有核糖体结合位点、启始码、终止码，该开放读框在载体Lac操纵子控制下表达，表达产物经SDS-PAGE电泳证明其分子量为18KDa，该重组蛋白与天然沙眼衣原体18KDa一样具有粘连真核细胞表面化合物的能力，可与抗18KDa血清反应。

全文目录

缩略语表  4-6
中文摘要  6-8
英文摘要  8-12
前言  12-13
文献回顾  13-25
课题研究  25-64
  第一部分沙眼衣原体18KDa粘连蛋白的克隆表达  25-42
    材料和方法  26-34
    结果  34-40
    讨论  40-42
  第二部分沙眼衣原体18KDa粘连蛋白单克隆抗体的制备  42-53
    材料和方法  43-47
    结果  47-51
    讨论  51-53
  第三部分 LGV2型衣原体空斑形成试验及McAb抑制空斑试验  53-64
    材料和方法  54-57
    结果  57-62
    讨论  62-64
小结  64-66
致谢  66-67
参考文献  67-71

沙眼衣原体18KDa粘连蛋白的初步研究

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