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白细胞介素1,6及NGF低亲和力受体在大鼠实验性神经元损伤中的表达及其机制的研究
作 者: 李月奎
导 师: 万选才;林嘉友
学 校: 中国协和医科大学
专 业: 神经生物学
关键词: 神经元存活 细胞因子 神经元损伤 星形胶质细胞 运动神经元疾病 前角运动神经元 性细胞 白细胞介素 退行性变 原位杂交
分类号: R392
类 型: 博士论文
年 份: 1996年
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内容摘要
神经元退行性疾病,如Alzheimer病(AD),肌萎缩侧索硬化(Amyotrophic lateral sclerosis,ALS)是当今国内外神经科学研究的一个热点,其病理特征主要为中枢神经系统中一些特殊脑区神经元的缺失和死亡。ALS主要是上、下运动神经元选择性死亡,伴随进行性瘫痪;AD主要累及前脑基底胆碱能神经元,这种脑内特殊核团神经元进行性缺失和死亡,其原因至今尚未明确。病因涉及遗传、免疫和环境等因素。近年来ALS,AD患者血清和脑脊液中发现特异性抗体能识别神经元,并对神经元有损伤作用,此外,病变区域发现有IgG沉积。因而推测自身抗体与这类疾病神经元的选择性死亡有关。但有关抗体的这种作用也有不同报道。特异抗体是否可以始动神经元损伤过程,通过何种机制发挥作用一直受到关注。 细胞因子,诸如白细胞介素(Interleukin,IL),肿瘤坏死因子(TNF)以及干扰素(IFN)参与了许多免疫系统介导的神经疾患的病理生理过程,在众多白细胞介素中,IL-1、IL-6与神经元损伤及退变的关系更为密切。多年来对神经元退行性变的研究较多着眼于以经典神经递质为主线索,观察递质合成及其受体水平的变化,而特异抗体及细胞因子与神经元退行性变发生关系的研究只是近几年刚刚起步,尤其是有关特异抗体介导的神经元损伤与细胞因子表达关系的研究尚未见报道。因此,明确细胞因子、抗体在神经元退行性变中的作用,寻求干预或调节细胞因子合成及其对神经元的作用必将会成为这类疾病治疗方面的一个很有价值的领域。 本研究通过建立特异抗体介导神经元损伤离体实验模型,探讨抗体对神经元损伤的机制,采用RT-PCR、原位杂交和免疫细胞化学技术研究细胞因子(IL-1,6)及相关介质在神经元损伤后的变化,并应
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全文目录
英文缩略语 5-6 中文摘要 6-11 英文摘要 11-15 前言 15-18 第一部分 抗运动神经元抗体对离体培养的大鼠大脑皮层神经元的细胞毒性作用 18-44 材料和方法 19-26 结果 26-39 一.提取的脊髓前角运动神经元形态学及抗运动神经元抗体的初步检测结果 26 二.抗运动神经元抗体对培养的大脑皮层神经元影响 26-39 讨论 39-42 一.关于抗运动神经元抗体介导神经元损伤以及建立运动神经元病的离体模型 39-41 二.关于抗运动神经元抗体的产生 41-42 小结 42-44 第二部分 抗运动神经元抗体对离体培养的大鼠脊髓神经元NGF低亲和力受体mRNA表达的影响 44-66 材料和方法 45-51 结果 51-63 一.抗运动神经元抗体对离体培养脊髓神经元的细胞毒性作用 51-53 二.抗运动神经元抗体对培养神经元LNGFR表达的影响 53-63 讨论 63-65 一.抗运动神经元抗体对离体培养的脊髓神经元的细胞毒性作用 63 二.NGF低亲和力受体在脊髓运动神经元中的表达及其在抗体介导的神经元损伤中的可能作用 63-65 小结 65-66 第三部分 白细胞介素1,6mRNA在抗体介导的离体大鼠大脑皮层神经元损伤中的表达—神经元作为脑内白细胞介素1.6来源的证据 66-82 材料和方法 67-71 结果 71-79 一.RT-PCR法检测抗运动神经元所致培养神经元损伤后IL-1和IL-6mRNA的表达 71-72 二.IL-1,IL-6原位杂交结果 72 三.原位杂交结合间接免疫荧光双标记及激光共聚焦显微成像 72-79 讨论 79-81 一.有关抗体介导神经元损伤中IL-1和IL-6mRNA的表达及其可能的作用 79-80 二.神经元可作为脑内IL-1和IL-6的来源 80-81 小结 81-82 第四部分 坐骨神经损伤所致神经元退行性变中IL-1mRNA的表达及其与星形胶质细胞关系的研究 82-99 材料和方法 83-86 结果 86-95 一.坐骨神经切断后脊髓内IL-1mRNA的表达 86 二.坐骨神经损伤后脊髓内星形胶质细胞及NADPH-d/NOS阳性细胞的改变 86-95 讨论 95-98 一.IL-1mRNA的表达及其与星形胶质细胞的关系 95-96 二.坐骨神经损伤后诱导脊髓前角运动神经元表达NOS及与IL-1mRNA,GFAP阳性细胞间的可能关系 96-98 结论 98-99 文献综述 细胞因子在神经系统中的表达、作用及其与神经元退行性变的关系 99-114 前言参考文献 114-116 第一、二部分参考文献 116-122 第三部分参考文献 122-126 第四部分参考文献 126-130 综述参考文献 130-136 致谢 136-137 攻读博士期间发表论文及个人简历 137
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中图分类: > 医药、卫生 > 基础医学 > 医学免疫学
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