学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

人体皮肤上皮细胞异常增殖和分化特征及其与创（烧）伤不同修复结局关系的研究

作　者: 姜笃银
导　师: 付小兵；盛志勇
学　校: 中国人民解放军军医进修学院
专　业: 外科学
关键词: 烧伤创面愈合肥厚性瘢痕瘢痕疙瘩假性上皮瘤样增生皮肤附件分化增生干细胞信号转导
分类号: R644
类　型: 博士论文
年　份: 2004年
下　载: 351次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

人体皮肤上皮细胞异常增殖和分化特征及其与创(烧)伤不同修复结局关系的研究【目的】皮肤创(烧)伤后创面自然愈合会产生不同的修复结局，包括正常瘢痕、增生性瘢痕(hypertrophic scar，HS)、瘢痕疙瘩(keloid，Ke)、慢性溃疡和假性上皮瘤样增生(pseudoepitheliomatous hyperplasia，PEH)病变等。这些病理性结局的产生固然与自身免疫状态、局部损伤深度、感染和炎症反应等综合因素有关，但作为深度损伤的修复主体-皮肤附件(SAs)与表皮(干)细胞对创面再上皮化和病变形成发挥至关重要的作用。因此，本研究将从胚胎表皮和附件形态发生、深Ⅱ度烧伤创面汗腺上皮细胞复层上皮化，以及HS、Ke和PEH形成过程中表皮和皮肤附件(SAs)变化等方面入手，探讨生理和病理条件下上皮细胞增殖和分化(转分化)对组织发生和不同修复结局的影响，为认识创伤修复规律和提高创面愈合质量提供理论依据。【方法】收集不同时间点人胎儿、成人正常皮肤(NS)标本、皮肤深Ⅱ度(DBW)和浅Ⅱ度烧伤创面(SBW)标本以及不同愈合结局(HS、Ke和PEH)组织标本，在组织形态学观察的基础上，采用免疫组化和免疫荧光(双)标记、mRNA原位杂交、流式细胞分析和计算机辅助图象扫描分析技术等，调查人胚胎发育阶段表皮细胞及其SAs形态发生、临床DBW汗腺复层上皮化以及病理性愈合结局SAs破坏过程中，上皮细胞组织表型与分化表型之间的关系。具体包括：(1)不同角蛋白分子表达与上皮增殖和分化的关系，如增殖性蛋白标记-细胞角蛋白(CK)5&6、CK14和CK17，(胚胎)表皮干细胞标记-CK8&18和CK19，以及终末分化标记-CK10，腺上皮细胞功能性标记-分泌成分(SC)等；(2)上皮细胞表达金属蛋白酶(MMP-2，-3，-9)和金属蛋白酶抑制物(TIMP-1，-2)对Ⅳ型胶原(ColIV)、层粘连蛋白(laminin，LN)基底膜结构成分形成的影响：(3)细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、上皮细胞钙粘附蛋白(E-cadherin，E-Cad)和β-链蛋白(β-catenin，β-Cat)表达水平，对上皮细胞异常分化和迁移的影响；(4)组织中干细胞因子(stem cell factor，SCF)及其受体博士后名丹究工作J晨告(c一Kit/CDx17)和白介素门L)一6等表达水平对分化杭原簇一14(cluste:ofdifterentiation，eol4)、en6s和肥大细胞类胰蛋白酶(l刀ast eell tryptase，MCT)阳性细胞分布、细胞生长和分化的诱导作用;(5)上皮细胞表达广谱CK〔cKp)、转化生长因子一田(TGF一pl)及其受体TGFpRI表达水平与波形蛋白(vim)和a一sMA表达之间的关系，探讨 TGF一印/TG FpRI信号系统对成体上皮一间质细胞转化‘巨州~二一epithelia卜mesenellylllal trans、，·:二ati。。，EMT)和胚胎间质一上皮细胞转化(mesenchyma一epstllelia一transfor，nation，MET)的诱导作用及其生物学意义;(6)细胞增殖性核抗原(PcNA)和凋亡相关蛋白分子(Bcl一2和Bax)表达水平与表皮、皮肤附件上皮细胞增殖和分化以及结构异常的关系;(7)成纤维细胞生长因子(FGF) 10(KGFZ)及其受体(FGFRZb/Bek)信号系统对胚胎表皮细胞增殖、分化和皮肤附件发生的诱导作用。此外，在建立新生大鼠表皮角肮细胞分离、培养和纯化方法和技术的基础上，对培养第3一5代角阮细胞采用重组人TGF一p】(rh TGF一日!)和/或重组人表皮生长因子(rhEGF)进行离体刺激实验，并对Dispase和胰蛋白酶分离的早期人增生性疲痕表皮细胞，采用进行免疫组化、免疫荧光和流式细胞分析等方法动态观察EMT的组织表型和分子表型的改变。具体分以下五个部分进行总结:1.胚胎期表皮细胞及其皮肤附件发生【结果】在人胚胎胎龄(EAG)6一sw期间，外胚层细胞Vi:n+一a一sMA一向cKS&!8十-CK19十表皮干细胞转变，并检测到中等强度(+十)TGF口R工信号，但TGF口!信号十分微弱;至EA GI ow以后呈现表皮细胞典型的组织形态学特征。在EAG 1 lw，表皮细胞开始表达CK一9和eKS&6，在表皮下过度表达FGF一。、PCNA和 Bel·2的间质细胞开始成团聚集;在EAG I3w时，分层的表皮细胞浅层出现CKIO，周皮细胞开始脱落;在基底层细胞CK14、PcNA、Bek和p一Cat信号明显增强的区域，细胞局灶性增殖形成毛囊原基(胚芽)，在其向真皮内侵入生长的同时，上皮细胞E一cad表达水平与周围间质细胞表达FGF10呈现相反的表达趋势:在EAG16w皮脂腺发生的同时，表皮一真皮依次重复上述信号并开始汗腺形态发生。 [结论l(1) EAG6一sw是人胚胎皮肤表皮细胞经由MET发生的重要时期，TGF 博士后对究互‘乍报告.‘亩亩‘菌‘‘亩亩.亩‘亩‘‘‘亩‘亩亩‘亩‘‘.‘亩亩‘‘亩‘‘亩‘亩~‘口RI信号通路可能参与了MET调变过程，但其配体一TGF日】起源及其作用机制有待研究。(2)间质细胞源性FGF10以旁分泌方式作用于上皮细胞Bek，并通过合理调配p一cat和E一cad信号，诱导表皮干细胞增殖分化和SAs形态发生·2.汗睐上皮细胳表皮细胞转化机制与DBW愈合的关系 l结果1 NS汗腺分泌部基底层的肌上皮细胞表达卜Cat、Bcl一2、CK19、P63和eK14:浅51度烧伤创面(superfieial 110 bLlrn wounds，sBW)愈合期间深层汗腺分泌部与NS组相似。在深11度烧伤创面(deep 110 bL!rn woL一

全文目录

英文缩写一览表  4-7
中文摘要  7-13
英文摘要  13-20
论文正文  20-198
  前言  20-23
  第一部分胚胎期表皮细胞及其皮肤附件发生  23-44
    实验一间质细胞-上皮细胞转分化与人胚胎表皮细胞发生  23-30
    实验二 FGF10及其受体对胎儿皮肤附件形成的诱导作用  30-36
    实验三细胞角蛋白14和β-链蛋白表达水平与人胎儿皮肤附件形态发生  36-44
  第二部分汗腺上皮细胞-表皮细胞转分化与深Ⅱ度烧伤创面愈合方式  44-68
    实验一深Ⅱ度烧伤创面再上皮化特征和汗腺转归  44-55
    实验二汗腺上皮细胞经由干细胞-表皮细胞转化完成深度烧伤创面修复  55-61
    实验三汗腺上皮细胞以鳞状上皮化方式加速深Ⅱ度烧伤创面再上皮化  61-68
  第三部分上皮细胞异常增殖分化与病理性修复结局的关系  68-88
    实验一瘢痕疙瘩中皮肤附件结构破坏与瘢痕增生  68-77
    实验二角朊细胞表达胚胎性细胞角蛋白与创伤不同修复结局的关系  77-88
  第四部分上皮细胞异常增殖分化对间质细胞功能活性的影响  88-133
    实验一上皮细胞免疫诱导作用与瘢痕疙瘩毛囊-皮脂腺结构破坏  89-96
    实验二角朊细胞异常增殖分化与瘢痕疙瘩真皮-表皮连接结构异常  96-107
    实验三血管生成因子及其受体过表达与瘢痕疙瘩侵袭性生长  107-113
    实验四病理性瘢痕中上皮源性干细胞因子对肥大细胞增生活性的影响  113-123
    实验五创伤后不同病变组织中CD68~+肥大细胞的起源分析  123-133
  第五部分上皮细胞-(肌)成纤维细胞转化与病理性瘢痕形成  133-150
    实验一病理性瘢痕中上皮细胞-(肌)成纤维细胞转化的初步观察  133-141
    实验二成体角朊细胞向肌成纤维细胞转分化的实验研究  141-150
  第六部分上皮细胞分化紊乱和EMT与PEH病变形成  150-195
    实验一皮肤创(烧)伤后PEH病变发生的病因分析(附11例报告)  150-157
    实验二 PEH病变中上皮-间质连接区基底膜相关成分缺失机制的研究  157-165
    实验三 PEH病变中上皮细胞以“脱壳”方式去分化  165-176
    实验四上皮细胞向免疫细胞转分化与PEH病变形成  176-186
    实验五血管基底膜相关成分缺失机制与PEH病变肉芽组织过度增生  186-195
  论文全文总结  195-198
附录  198-285
  附录一: 文献综述  198-281
  附录二: 个人简历  281-282
  附录三: 在博士后流动站工作期间发表论文、编写书籍和参加学术会议情况  282-285
  附录四: 致谢  285

人体皮肤上皮细胞异常增殖和分化特征及其与创（烧）伤不同修复结局关系的研究

内容摘要

全文目录

相似论文