学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

大鼠脊髓损伤后基因表达谱变化的研究

作　者: 强华
导　师: 贾连顺
学　校: 第二军医大学
专　业: 外科学
关键词: cDNA微阵列基因表达基因芯片 Northern blotting 急性脊髓损伤
分类号: R651.2
类　型: 博士论文
年　份: 2002年
下　载: 147次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

脊髓损伤是指脊髓遭受损害导致机体的感觉、运动、反射和植物神经系统功能出现障碍的一类严重损伤。其损伤程度主要取决于最初脊髓所遭受的打击，它不仅决定了脊髓原发性损伤的程度，而且还关系到继发性损伤的进展，继发性的损伤可进一步加剧损伤并影响其恢复。原发性损伤在创伤的瞬间形成，不能控制；减轻损伤的程度，主要着眼于继发性损伤。目前对脊髓损伤治疗的研究主要集中在两个方面，一方面是阻止或减轻继发性损伤，另一方面是促使神经元再生和神经组织的移植替代。继发性损伤的机制包括神经源性休克，出血、缺血、兴奋性毒性反应、Ca²⁺介导的继发损伤，以及体液电解质紊乱、免疫性损伤，直至线粒体功能紊乱、神经细胞坏死和凋亡等病理过程。继发性损伤机理的阐明可为寻找药物治疗靶标提供基础，包括进行性神经损伤过程中的神经保护和重建。为进一步认识这一病理过程的分子机制，探寻在这一进行性神经损伤过程中相关基因的作用及其相互关系，本研究以大鼠急性脊髓损伤为模型，应用cDNA微阵列技术动态观察了受损脊髓的基因表达谱的变化。实验中采用的动物模型是运用Allen氏重物坠落（Weight Drop，WD）法所致SD大鼠T8节段脊髓的中度损伤，此模型与人类急性脊髓损伤高度相似并有很好的重复性，是目前研究急性脊髓损伤的国际通用模型。研究此模型脊髓损伤后基因表达谱的动态变化，对认识人体急性脊髓损伤过程中的复杂机制具有很好的指导意义。本实验采用的cDNA微阵列试剂盒是美国Clontech公司的产品，它包含1176个已知的大鼠基因，它们所编码的蛋白分为23大类，涉及应激、炎性反应、离子通道、细胞外基质、信号传导、免疫、凋亡等细胞的重要生理过程。能从较为广泛的角度研究急性脊髓损伤相关机制。研究结果显示，在分析的1176个基因中，脊髓损伤前及损伤后不同时段（损伤后4小时、24小时、3天、7天、10天）有81个基因的mRNA表达水平发生了变化，这些基因编码的功能蛋白质包括细胞表面抗原、免癸一二军档人柠厦十作灰殁艾呐文艘婴疫系统蛋白、转录因子、应激蛋白、离子通道运输蛋白、翻译、细胞内外信号传导、生长因子及细胞因于及其受体等。在这些脊髓损伤前后差异表达的基因中，数个基因己有文献报道，如即刻早期基因c－fos、Cdun，细胞因子IL刁0、IL6、WIF、，以及热休克蛋白等，本次的实验结果与报迢的结论一致。而更为重要的是，通过脊髓损伤前后不同时段基因表达谱变化规律的系统分析，我们发现了一批尚未见过相关报道的差异表达的基因，如一些生长囚于相关蛋白吓G卜10、1＊FSP等)、神经介质K型利尿钠肽、分泌粒蛋白3等〕、神经肽受体（后叶加压素＊2受体、神经肽W受体等）及一些蛋白激酶和磷脂酶J·小部分具有重要生理活性的基因pN＊r、。FGF、IGFBPS和 somatostatin等进行了 Northern blot验证，叨步分析了它们在损。伤和修复过程中的可能作用。应用CDNA微阵列技术对受损脊髓的基因表达谱的变。化的动态观察，有助于从基因组的层次深入了解脊髓损伤的分子机制。

大鼠脊髓损伤后基因表达谱变化的研究

内容摘要

全文目录

相似论文