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虎杖甙的提取、分离、纯化及酶解研究

作　者: 赵愉快
导　师: 刘仲华；曾建国
学　校: 湖南农业大学
专　业: 药用植物资源工程
关键词: 虎杖 虎杖甙 白藜芦醇 酶解法
分类号: R284.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要


虎杖别名花斑竹蓼科植物(Polygonum cuspidatum Sieb. et Zucc),在我国大部分地区广泛分布。根、茎干燥,性味苦寒,具有祛风利湿、散瘀、止咳化痰的作用。虎杖甙是虎杖的主要有效成分之一,具有显著的抗氧化、抗自由基的作用、抑制和治疗组织癌变和肿瘤等生物活性。虎杖中白藜芦醇含量低,而虎杖甙含量是白藜芦醇的10-20倍,基于此思路本文对虎杖中虎杖甙提取、分离、纯化、酶解工艺进行系统的研究。所取得的实验结果如下：1.提取工艺：虎杖细粉提取条件为80%7乙醇、提取温度为40℃、提取3次、每次2h,虎杖甙的提取率达到90%以上。2.精制工艺：聚酰胺富集、氧化铝除杂、活性炭脱色、结晶等方法,能够制备出98%以上的高纯度虎杖甙,收率为0.85%。该工艺简便易行,成本低适合于工业化大生产。3.酶解工艺：10%虎杖甙(98%)水溶液,40℃水浴充分溶解后,加入5%粗提酶反应30min。虎杖中虎杖甙几乎全都转变成白藜芦醇,酶解率达95%以上,酶解转移率达95%左右。

全文目录


摘要  4-5
Abstract  5-10
第一章 前言  10-17
  1 虎杖的有效成分  10
  2 白藜芦醇的药理作用  10-12
    2.1 改善心脑血管循环的作用  11
    2.2 抗氧化、抗衰老作用  11
    2.3 抗病毒、保肝作用  11-12
    2.4 抗肿瘤、抗癌作用  12
    2.5 抗细菌和真菌作用  12
  3 虎杖甙的提取、分离  12-14
  4 虎杖甙生物转化成白藜芦醇研究  14-15
    4.1 β-葡萄糖甙酶  14
    4.2 纤维素酶  14-15
    4.3 其它  15
  5 研究课题的目的、意义及工作内容  15-17
    5.1 研究课题的目的、意义  15-16
    5.2 课题研究内容  16-17
第二章 虎杖中虎杖甙提取纯化工艺研究  17-26
  1 材料与试剂  17
    1.1 材料  17
    1.2 试剂  17
    1.3 仪器和设备  17
  2 实验方法  17-19
    2.1 检测方法  17-18
    2.2 提取方法  18
    2.3 单因素实验  18-19
  3 实验结果与分析  19-25
    3.1 色谱条件确定  19-20
    3.2 标准曲线的绘制  20-22
    3.3 乙醇浓度考察  22-23
    3.4 提取温度考察  23
    3.5 提取时间考察  23-24
    3.6 提取溶媒用量考察  24
    3.7 正交试验方差分析及结果  24-25
  4 讨论  25-26
第三章 不同树脂对虎杖中虎杖甙纯化工艺研究  26-35
  1 材料与试剂  26
    1.1 材料  26
    1.2 试剂  26
    1.3 仪器和设备  26
  2 实验方法  26-29
    2.1 树脂的预处理  26
    2.2 上样液的制备  26-27
    2.3 装柱方法  27
    2.4 虎杖甙含量的测定  27
    2.5 虎杖甙静态吸附和解吸实验  27
    2.6 动态吸附实验  27-29
  3 结果与分析  29-33
    3.1 虎杖甙静态吸附和解吸实验  29
    3.2 动态吸附和洗脱实验  29-33
  4 讨论  33-35
第四章 虎杖甙精制工艺研究  35-47
  1 材料与试剂  35
    1.1 材料  35
    1.2 试剂  35
    1.3 仪器和设备  35
  2 实验方法  35-38
    2.1 上样液的制备  35
    2.2 氧化铝装柱方法  35-36
    2.3 洗脱终点判断方法  36
    2.4 虎杖甙含量的测定  36
    2.5 氧化铝种类选择  36
    2.6 虎杖提取物溶解方法考察  36-37
    2.7 氧化铝粒度考察  37
    2.8 氧化铝用量考察  37
    2.9 氧化铝吸附量与过柱量比例考察  37
    2.10 洗脱溶剂用量考察  37
    2.11 活性炭种类考察  37
    2.12 活性炭脱色溶剂考察  37
    2.13 活性炭用量考察  37-38
    2.14 活性炭脱色时间考察  38
    2.15 结晶溶剂的选择  38
  3 结果与分析  38-46
    3.1 虎杖提取物溶解方法考察  38-39
    3.2 氧化铝除杂工艺研究  39-42
    3.3 活性炭脱色工艺研究  42-44
    3.4 虎杖甙结晶工艺研究  44-46
  4 讨论  46-47
第五章 虎杖甙的发酵工艺研究  47-58
  1 实验材料  47-48
    1.1 材料  47
    1.2 试剂  47
    1.3 仪器设备  47
    1.4 培养基  47-48
  2 试验方法  48-51
    2.1 菌种富集与分离  48
    2.2 菌落及菌体形态观察鉴定  48
    2.3 粗酶液的制备  48-49
    2.4 DNS(3,5—二硝基水杨酸)法测定酶活力  49
    2.5 筛选菌株产酶活力的测定方法  49
    2.6 麦芽糖标准曲线的制备  49-50
    2.7 木霉固态发酵条件的优化  50-51
    2.8 虎杖甙酶解研究  51
  3 结果与分析  51-57
    3.1 麦芽糖标准曲线的制备  51
    3.2 菌株的筛选与生长结果图片分析  51-53
    3.3 木霉菌株发酵条件优化  53-56
    3.4 正交试验方差分析及结果  56-57
    3.5 虎杖甙酶解研究  57
  4 结论  57-58
结论与展望  58-60
参考文献  60-64
致谢  64-65
作者简历  65

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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药化学 > 化学分析与鉴定
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