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免疫营养对肠粘膜屏障功能的影响

作　者: 胡博
导　师: 朱理玮
学　校: 天津医科大学
专　业: 外科学
关键词: 肠粘膜屏障免疫营养 ω-3脂肪酸紧密连接蛋白肠道分泌型免疫球蛋白A内毒素肿瘤坏死因子α 白介素1β
分类号: R459.3
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的：观察肠缺血再灌注术后肠粘膜屏障功能的变化,初步探讨肠粘膜屏障的损伤机制,研究免疫营养对肠缺血再灌注大鼠肠粘膜屏障的保护作用,为免疫营养的临床应用提供实验基础。方法：本实验选用雄性SD大鼠50只,按随机原则分为五组,每组10只：①正常对照组(C)：正常饲养进食。②肠系膜上动脉夹闭+胃造瘘+普通肠内营养组(LMSA-EN);③肠系膜上动脉夹闭+胃造瘘+免疫增强肠内营养组(LMSA-EIN);④胃造瘘+普通肠内营养组(EN)；⑤胃造瘘+免疫增强肠内营养组(EIN)；建立大鼠肠缺血再灌注模型,分别给予不同营养,术后1、4、7天分别取外周血,流式细胞术检测T细胞亚群。ELISA法检测血浆内毒素、肿瘤坏死因子α、白介素1β、二胺氧化酶、D乳酸；各组大鼠于术后7天断颈处死,消毒,然后分别切取末端回肠及结肠各3cm(距回盲部3cm),行HE及免疫组织化学染色,检测Occludin和sIgA表达水平。结果：1.体重变化：术后体重较术前减轻(P<0.05),LMSA-EN组较LMSA-EIN组减轻明显(18.20±7.61 vs 12.00±3.86,P<0.05)；EN组较EIN组减轻明显(13.40±2.59vs 7.60±5.38,P<0.05)。2.肠粘膜病理改变：各组大鼠小肠粘膜厚度、绒毛高度、隐窝深度比较,肠缺血模型组较对照组均有不同程度下降,存在显著性差异,且LMSA-EN组下降较LMSA-EIN组明显,差异有统计学意义。3.肠粘膜病理损伤评分：各组间存在显著性差异,LMSA-EN组病理损伤评分显著高于C组(30.70±4.45 vs 14.70±3.16,P<0.01)；LMSA-EIN组的病理损伤评分显著低于LMSA-EN组(25.60±4.33 vs 30.70±4.45,P<0.05)；EIN组的病理损伤评分显著低于EN组(16.30±2.75 vs 22.40±2.67,P<0.01)。4.免疫组化染色：Occludin免疫组化染色以上皮细胞胞膜及胞质棕黄色颗粒为阳性细胞,各组均可见有阳性表现,组间阳性细胞百分率存在显著性差异,LMSA-EIN较LMSA-EN组升高(P<0.01)；EIN较EN组升高(P<0.05)；sIgA免疫组化染色以上皮细胞及浆细胞棕黄色颗粒为阳性细胞,各组均可见有阳性表现,组间阳性细胞百分率存在显著性差异,LMSA-EIN较LMSA-EN组升高(P<0.05)；EIN较EN组升高(P<0.05)。5.外周血CD4+/CD8+：各组间存在显著性差异,LMSA-EN组较术前有所降低(P＜0.05), LMSA-EN组降低较LMSA-EIN组明显(P<0.05),EN组降低较EIN明显(P<0.05)。6.术后血浆内毒素、TNF-α、IL-1β、DAO、D乳酸均较术前前明显增高,第1、4、7天逐渐降低,免疫营养组下降较普通营养组明显,但仍高于术前水平,差异有统计学意义。结论：1.成功建立大鼠肠粘膜缺血再灌注模型,大鼠术后体重下降,小肠形态学改变表现为绒毛坏死,隐窝消失,肠屏障功能改变表现为机械屏障功能受损(肠粘膜Occludin蛋白表达减少)、肠免疫屏障受损(肠粘膜sIgA含量下降,T细胞亚群降低,肿瘤坏死因子α、白介素1β等不同程度升高),同时发生肠粘膜通透性改变(内毒素、D乳酸升高)等。2.肠内营养能在一定程度上保护肠粘膜屏障功能。3.免疫营养进一步减轻肠缺血导致大鼠肠粘膜的破坏,减轻体重丢失；增加大鼠肠粘膜Occludin蛋白及sIgA表达；降低内毒素、肿瘤坏死因子α、白介素1β等升高的程度,促进肠上皮损伤的修复；与普通营养比较对肠粘膜屏障有更加明显的保护作用。

全文目录

中文摘要  4-6
Abstract  6-9
缩略语/符号说明  9-10
前言  10-12
  研究现状、成果  10-11
  研究目的、方法  11-12
对象和方法  12-28
结果  28-52
讨论  52-60
结论  60-61
参考文献  61-67
发表论文和参加科研情况说明  67-68
综述免疫营养对肠粘膜屏障影响的研究进展  68-78
  综述参考文献  74-78
致谢  78

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