学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

癃必消胶囊对前列腺中内皮素及血管紧张素系统表达的影响

作　者: 董佳晨
导　师: 贾金铭
学　校: 中国中医科学院
专　业: 中西医结合临床
关键词: 前列腺增生症 癃必消胶囊 内皮素-1 血管紧张素Ⅱ
分类号: R285
类　型: 博士论文
年　份: 2009年
下　载: 52次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载
 

内容摘要


良性前列腺增生（benign prostatic hyperplasia,BPH）是一种特殊的组织病理疾病,其病理特征是前列腺间质和上皮细胞增生,结缔组织及平滑肌呈结节样增生。为老年男性的多发病、常见病。BPH引起的下尿路症状（lower urinary tractsymptoms,LUTS）可影响泌尿系统的正常功能,最终引起膀胱及肾脏病变,导致肾功能损害,甚至危及生命。近年来,随着人类预期寿命延长,BPH发病率有逐年增高的趋势,据文献报道,60岁以上男性BPH的发病率超过50%,其中15%—30%可出现LUTS。BPH已成为国际性关注的重大疾病。BPH引起的临床症状主要表现在两方面:①不能很好地储存尿液的刺激性症状,如尿频、尿急、尿痛,夜尿次数增多,急迫性尿失禁等;②不能很顺畅地排出尿液的梗阻性症状,如尿线细或排尿困难踌躇、间断、滴沥不能成线,不能排净尿液,甚至发生急性尿潴留。BPH在病理生理方面,则表现为膀胱出口梗阻（bladder outlet obstruction,BOO）,膀胱出口梗阻的病因主要包括两方面,首先是静力因素,即前列腺的间质和上皮组织增生,直接挤压后尿道而引起机械性梗阻;其次是动力因素,即分布在膀胱颈、前列腺包膜和腺体平滑肌中α1肾上腺素能受体被活化,平滑肌收缩、肌张力增强,膀胱颈及尿道内压增高,排尿阻力增加而引起动力性梗阻。以益气活血为治则组方的癃必消（消癃通闭）胶囊,经临床观察可使部分患者前列腺体积缩小,抑制前列腺的进一步增生,改善排尿症状,提高生活质量。在癃必消胶囊治疗BPH的作用机理方面的研究表明癃必消胶囊可缩小动物自发及诱导BPH的前列腺体积,降低动物后尿道压力。进一步机理研究发现,该药可以阻滞犬大脑皮层α1受体,抑制前列腺5α-还原酶活性,增加前列腺组织NOS神经含量,降低碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）表达,抑制大鼠前列腺上皮细胞分裂及DNA合成,促进前列腺上皮细胞凋亡,重建前列腺增生细胞动力学平衡,抑制前列腺间质细胞和平滑肌细胞增殖或减少成纤维细胞向平滑肌细胞转化,能有效改善BPH引起的动力性、静力性BOO。近年来研究表明,内皮素、血管紧张素系统在BPH的发生发展过程中发挥重要作用,本实验应用免疫组化方法、酶联免疫吸附分析方法、定量RT-PCR方法对癃必消胶囊对大鼠前列腺组织及体外培养的人前列腺间质细胞系中的内皮素-1、内皮素受体A、血管紧张素Ⅱ、血管紧张素受体1、血管紧张素转化酶定位表达、含量及基因表达的影响进行了研究,实验得出如下结论:1.应用免疫组化方法研究表明,ET-1、AngⅡ在正常及增生大鼠前列腺组织中均有表达,表现为胞浆表达,主要定位于腺上皮及部分间质细胞,在增生大鼠前列腺组织中表达明显增高。2.应用ELISA方法研究表明,增生大鼠前列腺组织中ET-1含量明显增高,癃必消胶囊可显著降低增生大鼠前列腺组织中ET-1含量,提示癃必消胶囊可抑制大鼠前列腺组织中ET-1分泌,从整体上降低ET-1的生物学效应。3.应用定量RT-PCR方法研究表明,增生前列腺大鼠组织中ETAR基因表达水平明显增高,癃必消胶囊可降低ETAR基因表达水平,提示癃必消胶囊可抑制ETAR的表达而降低ET-1与ETAR的结合率,从而减低二者结合所发挥的生物学效应。4.应用定量RT-PCR方法研究表明,癃必消药物血清可显著降低体外培养的人前列腺间质细胞系wpmy-1中ETAR基因表达水平,提示益气活血药物血清可抑制人前列腺间质细胞中ETAR的生成。5.应用ELISA方法研究表明,增生大鼠前列腺组织中AngⅡ含量明显增高,癃必消胶囊可显著降低增生大鼠前列腺组织中AngⅡ含量,提示癃必消胶囊可抑制大鼠前列腺组织中AngⅡ的分泌。6.应用定量RT-PCR方法研究表明,增生前列腺大鼠组织中AT1、ACE基因表达明显增高,癃必消胶囊可降低AT1、ACE基因表达水平,提示癃必消胶囊可通过降低受体表达,从而降低AngⅡ与AT1结合率以减少二者结合发挥的生物学效应,同时也可通过降低ACE减少AngⅡ的生成。7.应用定量RT-PCR方法研究表明,癃必消药物血清可显著降低体外培养的人前列腺间质细胞系wpmy-1中AT1、ACE基因表达水平,提示益气活血药物血清可抑制人前列腺间质细胞中AT1、ACE的生成。

全文目录


中文摘要  8-10
ABSTRACT  10-12
英文缩略词  12-14
综述一、中医药治疗良性前列腺增生症研究进展  14-28
综述二、内皮素及其受体与前列腺增生  28-40
综述三、肾素-血管紧张素系统与前列腺增生  40-50
前言  50-52
第一部分、中药癃必消(消癃通闭)胶囊对大鼠BPH前列腺组织及体外培养的人前列腺间质细胞系内皮素-1及其受体A的影响  52-77
  一、BPH大鼠前列腺组织实验部分  52-64
    1.动物  52
    2.实验药物  52
    3.实验仪器  52-53
    4.统计学方法  53
    5.实验步骤  53-60
      5.1 免疫组化方法测定大鼠前列腺组织中ET-1定位表达及半定量分析  53-56
        5.1.1 动物标本的制备  53-54
        5.1.2 免疫组化实验  54-56
      5.2 ELISA方法测定大鼠前列腺组织匀浆中ET-1含量  56-57
      5.3 定量RT-PCR方法检测大鼠前列腺组织匀浆中的ETAR基因表达  57-60
        5.3.1 动物标本的制备  57
        5.3.2 Trizol方法提取大鼠前列腺组织总RNA  57-58
        5.3.3 反转录(reverse transcription,RT)合成cDNA第一链  58-59
        5.3.4 定量PCR  59-60
    6.结果  60-64
      6.1 免疫组化实验结果  60-62
      6.2 ELISA实验结果  62-63
      6.3 定量RT-PCR实验结果  63-64
  二、癃必消药物血清对体外培养的人前列腺间质细胞系中ETAR基因表达的影响  64-71
    1.动物  64
    2.实验药物  64
    3.实验仪器  64-65
    4.统计学方法  65
    5.实验步骤  65-70
      5.1 药物血清的制备  65-66
      5.2 试验材料  66
      5.3 人前列腺间质细胞系wpmy-1的常规培养  66-67
        5.3.1 细胞复苏  66-67
        5.3.2 细胞传代  67
      5.4 药物血清处理人前列腺间质细胞系  67
      5.5 细胞总RNA的提取  67-68
      5.6 反转录(reverse transcription,RT)合成cDNA第一链  68-69
        5.6.1 主要试剂  68
        5.6.2 主要器材  68
        5.6.3 操作步骤  68-69
      5.7 定量PCR检测  69-70
        5.7.1 试剂  69
        5.7.2 主要仪器  69
        5.7.3 操作步骤  69-70
    6.结果  70-71
  三、讨论  71-75
  参考文献  75-77
第二部分、中药癃必消(消癃通闭)胶囊对BPH大鼠前列腺组织及体外培养的人前列腺间质细胞系血管紧张素Ⅱ及其受体1、血管紧张素转化酶的影响  77-100
  一、BPH大鼠前列腺组织实验部分  77-88
    1.动物  77
    2.实验药物  77
    3.实验仪器  77-78
    4.统计学方法  78-79
    5.实验步骤  79-83
      5.1 免疫组化方法测定大鼠前列腺组织中AngⅡ定位表达及半定量分析  79-81
        5.1.1 动物标本的制备  79
        5.1.2 免疫组化实验  79-81
      5.2 ELISA方法测定大鼠前列腺组织匀浆中AngⅡ含量  81-82
        5.2.1 动物标本的制备  81
        5.2.2 ELISA实验  81-82
      5.3 定量RT-PCR方法检测大鼠前列腺组织匀浆中的AT1、ACE基因表达  82-83
        5.3.1 动物标本的制备  82
        5.3.2 Trizol方法提取大鼠前列腺组织总RNA  82
        5.3.3 反转录(reverse transcription,RT)合成cDNA第一链  82-83
    6.结果  83-88
      6.1 免疫组化实验结果  83-85
      6.2 ELISA实验结果  85-86
      6.3 定量RT-PCR实验结果  86-88
  二、癃必消药物血清对体外培养的人前列腺间质细胞系ACE及AT1基因表达的影响  88-94
    1.动物  88
    2.实验药物  88-89
    3.实验仪器  89
    4.统计学方法  89
    5.实验步骤  89-92
      5.1 药物血清的制备  90
      5.2 试验材料  90
      5.3 人前列腺间质细胞系wpmy-1的常规培养  90
      5.4 药物血清处理人前列腺间质细胞系  90
      5.5 细胞总RNA的提取  90
      5.6 反转录(reverse transcription,RT)合成cDNA第一链  90
      5.7 定量PCR检测  90-92
        5.7.1 试剂  90-91
        5.7.2 主要仪器  91
        5.7.3 操作步骤  91-92
    6.结果  92-94
  三、讨论  94-97
  参考文献  97-100
全文总结  100-102
本课题创新点  102-103
问题与展望  103-104
致谢  104-106
个人简历  106-107

相似论文

  1. 内皮素-1、胰岛素抵抗与急性缺血性脑血管病的相关性研究,R743.3
  2. 葡萄籽原花青素对肾血管性高血压大鼠血压的影响及其机制研究,R544.1
  3. 脉冲电场介导AT2R基因在血管局部表达及其对血管新生内膜影响,R541.4
  4. 盐酸法舒地尔对人脐静脉内皮细胞骨架作用及机制的研究,R96
  5. 辛伐他汀、氯沙坦对自发性高血压大鼠前列腺增生的作用及机制探讨,R544.1
  6. 缬沙坦与缬沙坦乙酯降血压和抑制心血管重构及机制研究,R544.1
  7. 滋阴潜阳活血汤对肾性高血压大鼠左室肥厚的影响及其作用机制初探,R285
  8. 肾炎止血丸对IgA肾病大鼠肾小管间质损伤影响的实验研究,R285
  9. 冠心病中医证型与血清NO、血浆ET的相关性研究,R259
  10. 电针中髎治疗良性前列腺增生症穴位特异性的研究,R246
  11. 电针“足三里”、“三阴交”穴对脾气虚证大鼠血清NO、ET-1的影响,R245
  12. 血府逐瘀汤治疗肢体缺血性疾病的实验研究,R259
  13. 盐酸法舒地尔对内毒素致大鼠急性肾损伤的防治作用研究,R965
  14. 1型多聚二磷酸腺苷核糖合成酶抑制PI3K/Akt途径调节热休克蛋白70的机制研究,R96
  15. 高度近视阻止糖尿病视网膜病变发生的机制研究,R587.2
  16. 经尿道前列腺球囊扩裂术与经尿道前列腺电切术治疗前列腺增生症的比较观察,R699
  17. 内皮素-1在醛固酮增多症大鼠模型肾脏纤维化过程中的作用及其意义,R586.24
  18. 血脂康、普伐他汀对单纯原发性高血压患者内皮功能和炎性因子的影响,R544.1
  19. AT1R 1166A/C和CYP11B2-344T/C基因多态性与原发性高血压相关性研究,R544.1
  20. 电针治疗良性前列腺增生症的临床观察,R277.5
  21. 尿畅舒胶囊治疗良性前列腺增生症—（肾）气虚血瘀型的临床研究,R277.5

中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药药理学
© 2012 www.xueweilunwen.com