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Fascin磷酸化与食管鳞癌患者预后关系的研究
作 者: 赵青
导 师: 许丽艳
学 校: 汕头大学
专 业: 病理学与病理生理学
关键词: Fascin 磷酸化修饰 生存分析 组织芯片 免疫组织化学
分类号: R735.1
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
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内容摘要
Fascin是一种结构独特、进化保守的肌动蛋白结合蛋白;通常主要表达于间叶组织细胞与神经组织细胞中,有诱导细胞膜突起形成,促进细胞运动等生理功能。在上皮组织中,如食管上皮等,分化良好的上层细胞通常不表达Fascin,而处在分裂状态中的基底部细胞表达少量Fascin。包括本课题组的研究在内,近年来的许多研究发现,在肺癌、乳腺癌、结直肠癌、胰腺癌、鼻咽癌、卵巢癌以及食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma, ESCC)等上皮来源的恶性肿瘤中,Fascin的表达显著上调,且与癌细胞的侵袭转移行为以及患者的不良预后密切相关。研究发现,Fascin存在着磷酸化修饰,然而这种特殊形式的Fascin在肿瘤中的确切表达模式及其临床意义如何尚不清楚。基于此,本文主要通过综合运用组织芯片、免疫组织化学染色以及western印迹等实验方法,对上述科学问题开展了深入研究,主要结果如下。首先,对254例ESCC组织中Fascin以及磷酸化修饰Fascin的表达情况进行了对比检测,结果显示,1)在正常食管上皮中,Fascin不表达或仅表达于基底层及棘层下部细胞的胞浆中;2)与Fascin相比,正常食管上皮中的磷酸化修饰Fascin表达稍强;3)在ESCC组织中,Fascin弥漫表达于癌细胞胞浆中,且癌组织侵袭性边缘的细胞呈现出更高的免疫反应性;4)与Fascin相比,磷酸化修饰Fascin依然主要表达在ESCC细胞的细胞浆中,但癌组织的侵袭性边缘未见明显免疫反应性增强。生存分析结果显示,1)Fascin在ESCC组织中的上调表达与患者的不良预后相关,P=0.006;2)与Fascin’恰好相反,磷酸化修饰Fascin高表达的ESCC患者的预后较好,P=0.016;3)有趣的是,在Fascin高表达的ESCC患者中,磷酸化修饰Fascin低表达与磷酸化修饰Fascin高表达的相比,后者表现出更高的五年生存率趋势。其次,为了确认前述免疫组织化学检测结果,我们同时用western印迹法,对8种ESCC细胞系和18对ESCC及癌旁正常组织样本中,Fascin与磷酸化修饰Fascin的表达情况进行了检测分析。检测结果与前述免疫组织化学的检测结果总体趋势基本一致。本文的研究结果表明,在ESCC组织中,Fascin高表达患者预后不良,而磷酸化修饰Fascin高表达患者预后较好。
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全文目录
摘要 4-5 ABSTRACT 5-7 缩略语表 7-8 目录 8-10 第一章 前言 10-17 1.1 研究背景 10-15 1.1.1 Fascin的发现 10 1.1.2 Fascin蛋白的结构及功能特点 10-12 1.1.3 Fascin蛋白在正常组织中的表达 12-13 1.1.4 Fascin蛋白在肿瘤中的表达及临床意义 13-14 1.1.5 Fascin蛋白与食管鳞癌的相关研究 14 1.1.6 Fascin蛋白磷酸化修饰的相关研究 14-15 1.2 本项研究课题的基金来源及相关课题情况 15 1.3 本项研究课题的研究意义 15-16 1.4 研究内容与目的 16-17 第二章 材料方法 17-25 2.1 主要实验试剂和材料 17-18 2.2 Phospho-S39-fascin多克隆抗体的制备 18 2.3 细胞系及细胞培养 18 2.4 标本来源及组织芯片制备 18-19 2.5 HE染色 19-20 2.6 免疫组织化学染色 20-21 2.7 统计学分析 21 2.8 Western印迹法 21-24 2.9 酶联免疫吸附试验 24-25 第三章 结果与分析 25-37 3.1 Phospho-S39-fascin多克隆抗体的特异性鉴定 25-27 3.2 病例组成 27-28 3.3 Fascin及Phospho-S39-fascin在组织及细胞系中的表达 28-31 3.4 Fascin及Phospho-S39-fascin在ESCC中的表达及临床病理联系 31-33 3.4 Fascin的高表达与ESCC患者不良预后相关 33 3.5 Phospho-S39-fascin的高表达与患者较好预后相关 33-34 3.6 Fascin/Phospho-S39-fascin共表达与患者的预后 34-37 第四章 讨论 37-39 第五章 小结与展望 39-40 参考文献 40-44 附录1 试剂配置 44-49 附录2 硕士期间发表论文 49-50 附录3 个人简历 50-51 致谢 51
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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 消化系肿瘤 > 食管肿瘤
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