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产质粒介导AmpCβ-内酰胺酶阴沟肠杆菌基因型及耐药性研究
作 者: 张瑞琴
导 师: 白小红
学 校: 山西医科大学
专 业: 药物分析
关键词: 阴沟肠杆菌 AmpC酶 三维试验 质粒 药敏实验
分类号: R450
类 型: 硕士论文
年 份: 2007年
下 载: 29次
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内容摘要
目的:了解医院感染的阴沟肠杆菌产AmpC酶的发生情况、质粒介导AmpC酶基因型的分布、分析阴沟肠杆菌产酶与不产酶的耐药情况,进行本课题的研究。给临床防控感染、合理用抗生素提供科学依据。方法:选取161株阴沟肠杆菌采用K-B法以头孢西丁纸片初筛疑产AmpC酶菌株;对疑产株通过AmpC酶提取物做头孢西丁三维试验检测AmpC酶;对产AmpC酶菌株的酶提取物进行头孢曲松三维试验检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)。使用B型质粒小样快速提取试剂盒进行质粒的提取;采用提取出的质粒作为PCR的模板进行扩增;采用琼脂糖凝胶,电压80V电泳30min后凝胶成像仪下分析基因型。采用纸片扩散(K-B)法,按美国临床实验室标准化委员会(NCCLs)2005制定的标准,进行药敏纸片的选择和药敏试验结果判读;所有原始数据用WHO细菌耐药性监测网提供WHONET5.4软件进行统计分析;计数资料分析采用SPSS统计软件进行分析。结果:在所检测的161株阴沟肠杆菌中,产AmpC酶的阴沟肠杆菌共46株,总检出率为28.6%,其中单产AmpC酶菌株38株,检出率为23.6%,同时产AmpC酶和ESBLs菌株8株,检出率为4.9%。对46株三维试验阳性的阴沟肠杆菌进行质粒提取试验和5组质粒介导AmpC酶的PCR检测,共有15株为质粒介导的AmpC酶,基因型为单产ACT-1型、单产DHA-1型和同时产ACI-1和DHA-1型;经质粒接合传递实验有12株传递成功。本研究发现检测到的15株质粒介导产AmpC酶阴沟肠杆菌,表现了对头孢吡肟、头孢哌酮/舒巴坦和亚胺培南较敏感,对所监测的其它抗生素耐药率较高;同产AmpC酶+ESBLs的阴沟肠杆菌只对头孢哌酮/舒巴坦和亚胺培南较敏感;x~2检验显示不产AmpC酶的菌株和产AmpC酶的菌株对所监测大多数抗生素耐药率的差异有统计学意义(P<0.05)。结论:三维试验可作为实验室用来鉴别常见临床分离革兰阴性杆菌耐药株是否产AmpC酶、ESBLs的的筛选方法。感染产AmpC酶阴沟肠杆菌中以染色体介导为主,多数为单产AmpC酶细菌,分离到质粒介导的AmpC酶为单产ACT-1型、单产DHA-1和同产ACT-1和DHA-1型基因型。对产AmpC酶细菌感染,碳青霉烯类药物和头孢哌酮/舒巴坦可作为经验用药,而第四代头孢菌素(如:头孢吡肟),对同产ESBLs的菌株耐药性较高,经验用药时应根据药敏结果选择性应用,亦可根据药敏结果选用氟喹诺酮类或氨基糖苷类抗生素。
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全文目录
中文摘要 5-6 英文摘要 6-8 正文 8-29 前言 8-9 材料与方法 9-13 结果 13-14 讨论 14-17 结论 17-18 参考文献 18-29 综述 29-37 正文 29-34 参考文献 34-37 个人简介 37-38 致谢 38
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中图分类: > 医药、卫生 > 临床医学 > 治疗学
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