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吗啡对C6神经胶质瘤细胞NO、Glu和Gln含量及其代谢相关酶基因表达的影响

作　者: 王少华
导　师: 刘剑凯
学　校: 吉林大学
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: 吗啡纳洛酮一氧化氮诱导型一氧化氮合酶谷氨酸谷氨酰胺谷氨酰胺合成酶谷氨酸脱氢酶
分类号: Q343
类　型: 硕士论文
年　份: 2008年
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内容摘要

在本实验中,通过吖啶橙染色(AO染色)和流式细胞计数(FCM)的方法研究吗啡和纳洛酮对大鼠C6神经胶质瘤细胞细胞形态及细胞周期和细胞凋亡的影响。通过一氧化氮(NO),谷氨酸(Glu)和谷氨酰胺(Gln)试剂盒检测大鼠C6神经胶质瘤细胞培养上清液中NO, Glu和Gln含量的变化。通过Western blot方法研究吗啡对大鼠C6神经胶质瘤细胞中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白表达量的影响。通过RT-PCR的方法研究吗啡对大鼠C6神经胶质瘤细胞中谷氨酸脱氢酶(GDH)和谷氨酰胺合成酶(GS)mRNA表达量的影响。探索阿片类依赖与耐受的机制。本实验结果显示:吗啡和纳洛酮没有对C6细胞周期和细胞凋亡产生明显影响。单独应用吗啡可显著性的降低胞外NO含量,与纳洛酮共同应用对胞外NO含量的降低无显著性;吗啡单独应用明显降低C6细胞iNOS蛋白表达,与纳洛酮共同应用对C6细胞iNOS蛋白表达的降低无显著性。单独应用吗啡可显著增加胞外Glu含量,与纳洛酮共同应用可显著降低吗啡引起的胞外Glu含量增加;吗啡或者纳洛酮单独作用均使GS mRNA转录活性显著降低,吗啡和纳洛酮共同作用GS mRNA转录活性也有所降低,但差异无显著性;吗啡或吗啡加纳洛酮均使GDH mRNA转录活性明显升高。以上结果提示,阿片受体非特异性阻断剂纳洛酮可以部分拮抗吗啡的作用,吗啡可能通过作用于C6神经胶质瘤细胞表面μ受体,降低iNOS蛋白表达,降低C6神经胶质瘤细胞外NO含量;吗啡可能通过调节Glu-Gln循环关键酶GS和GDH转录活性来调节胞外Gln和Glu的浓度,影响C6神经胶质瘤细胞释放和摄取谷氨酸,参与吗啡的依赖与耐受。

全文目录

内容提要  4-7
引言  7-16
第一章细胞水平的实验  16-30
  实验材料  16-18
  实验方法  18-22
  实验结果  22-25
  讨论  25-29
  小结  29-30
第二章分子水平的实验  30-48
  实验材料  30-32
  实验方法  32-40
  实验结果  40-44
  讨论  44-47
  小结  47-48
结论  48-49
参考文献  49-53
中文摘要  53-56
ABSTRACT  56-60
致谢  60

吗啡对C6神经胶质瘤细胞NO、Glu和Gln含量及其代谢相关酶基因表达的影响

内容摘要

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