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黄粉虫蛋白分类提取水解纯化及其抗氧化活性研究

作　者: 何桂梅
导　师: 张建新
学　校: 西北农林科技大学
专　业: 食品科学
关键词: 黄粉虫 蛋白 抗氧化肽 分离 纯化
分类号: S899.9
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要


黄粉虫幼虫蛋白质含量丰富,是制备昆虫生物活性肽的有效资源之一。本研究以黄粉虫幼虫为材料,从黄粉虫幼虫中分离出4种蛋白,对获得的黄粉虫水溶蛋白和碱溶蛋白,分别进行了双酶水解工艺条件优化,并比较了两种多肽的抗氧化活性等。本研究为黄粉虫蛋白的充分利用提供了依据,提高黄粉虫的经济价值。主要结果如下:(1)黄粉虫幼虫脱脂干粉中水溶蛋白、碱溶蛋白、酸溶性蛋白和醇溶性蛋白所占比例分别为42.60%、16.33%、1.65%和1.33%。(2)双酶水解水溶蛋白的最佳工艺条件为:料液比1∶20、水解时间2h、加酶量17.36 mg/g(碱性蛋白酶和胰蛋白酶酶活比为1∶1)、pH8.0、温度46.5℃。在优化条件下制得的水解液·OH清除率为86.21%。(3)碱溶蛋白双酶水解的最佳工艺条件为:料液比1∶20、水解时间1.9h、加酶量10mg/g(碱性蛋白酶和胰蛋白酶酶活比为1∶1)、pH7.2、温度47.8℃。在优化条件下制得的水解液·OH清除率为55.38%。(4)通过Sephadex G-25葡聚糖凝胶色谱,水溶蛋白多肽被分离成3个组分,峰S2的·OH清除率高达64.26%;利用DEAE Sepharose F.F.离子交换层析将峰S2分离成4个部分,多肽组分S2-1和S2-2的·OH清除率较高,分别为78.44%、45.39%;碱溶蛋白多肽被Sephadex G-25凝胶过滤色谱分离成4个组分,其中峰J3的·OH清除率达40.55%;利用DEAE Sepharose F.F.将峰J3分离成4个部分,多肽组分J3-2的·OH清除率最强,为47.02%。(5)对分离纯化后的各抗氧化肽进行氨基酸成分测定可知,黄粉虫的水溶蛋白制得的抗氧化肽S2-1中主要的氨基酸为Ala、Pro、Leu、Glu、Val、Gly、Ile、Ser;S2-2中主要的氨基酸为Glu、Asp、Pro;碱溶蛋白制得的抗氧化肽J3-2中主要的氨基酸为Glu、Asp、Pro、Gly。

全文目录


摘要  5-6
ABSTRACT  6-10
第一章 文献综述  10-25
  1.1 黄粉虫概述  10-14
    1.1.1 黄粉虫营养价值  10-12
    1.1.2 黄粉虫功能性及食用安全性  12-13
    1.1.3 黄粉虫食品的开发  13-14
  1.2 蛋白质提取分离方法  14-17
    1.2.1 植物性食品的蛋白质提取分离  15-16
    1.2.2 动物性食品的蛋白质提取分离  16
    1.2.3 昆虫蛋白质提取分离  16-17
  1.3 生物活性肽  17-22
    1.3.1 生物活性肽及其分类  17-19
    1.3.2 生物活性肽的制备方法  19-20
    1.3.3 生物活性肽的分离纯化方法  20-22
    1.3.4 生物活性肽在食品工业的应用  22
  1.4 研究目的意义与技术路线  22-25
    1.4.1 研究的目的及意义  22-23
    1.4.2 技术路线和主要研究内容  23-25
第二章 黄粉虫蛋白的分类提取及水溶蛋白水解工艺优化和活性研究  25-38
  2.1 材料与方法  25-28
    2.1.1 材料  25-26
    2.1.2 试验方法  26-28
  2.2 结果与分析  28-37
    2.2.1 黄粉虫幼虫蛋白质分类提取  28-29
    2.2.2 水溶蛋白水解单因素试验  29-32
    2.2.3 二次正交旋转组合试验  32-34
    2.2.4 黄粉虫水溶蛋白多肽的抗氧化活性  34-37
  2.3 小结  37-38
第三章 碱溶蛋白水解工艺优化及多肽活性  38-48
  3.1 材料与方法  38-40
    3.1.1 材料  38
    3.1.2 试验方法  38-40
  3.2 结果与分析  40-47
    3.2.1 碱溶蛋白水解单因素试验  40-43
    3.2.2 中心组合试验  43-45
    3.2.3 黄粉虫碱溶蛋白多肽的抗氧化活性  45-47
  3.3 小结  47-48
第四章 水溶蛋白抗氧化肽及碱溶蛋白抗氧化肽的分离纯化  48-57
  4.1 材料与方法  48-49
    4.1.1 试验材料  48
    4.1.2 主要仪器设备  48
    4.1.3 试验方法  48-49
  4.2 结果与分析  49-56
    4.2.1 黄粉虫水溶蛋白制备多肽的分离与纯化  49-52
    4.2.2 黄粉虫碱溶蛋白制备多肽的分离与纯化  52-55
    4.2.3 黄粉虫抗氧化肽的氨基酸组成  55-56
  4.3 小结  56-57
第五章 结论与讨论  57-59
  5.1 结论  57
  5.2 讨论  57-59
参考文献  59-67
致谢  67-68
作者简介  68

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中图分类: > 农业科学 > 畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂 > 养蜂、益虫饲养 > 益虫饲养 > 其他
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