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三种有机磷农药胚胎期暴露对发育期脑细胞组织结构的影响

作　者: 陈伟峰
导　师: 陈晓萍
学　校: 浙江工业大学
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: 有机磷农药发育神经毒皮层S1区海马区分裂平面取向
分类号: S481.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

随着有机磷农药的广泛使用,除了急性中毒症状外,发育神经毒性也越来越多地被人们所关注。由于细胞增殖、分化必须通过细胞分裂而实现,所以从细胞分裂的视角来探讨有机磷农药的发育神经毒性具有重要意义。本文探讨三种有机磷农药地亚农(diazinon, DZN)、毒死蜱(chlorpyrifos, CPF)和乙酰甲胺磷(acephate, ACP)对脑组织的形态学影响。在孕鼠神经管形成期E7.5～E11.5(embryal days)连续5天皮下注射2mg/kg的DZN、2mg/kg的CPF和50mg/kg的ACP,对照组注射等体积的二甲基亚砜。分别取新生鼠PND1～4(postnatal days)鼠脑及E16天胚胎鼠脑,制备组织石蜡切片,在显微镜下观察皮层S1区、海马CA1、CA3区神经细胞的形态学变化;并测量脑室区(ventricular Zone,VZ)神经细胞有丝分裂平面的角度。实验结果发现,在妊娠早期分别暴露DZN、CPF和ACP,皮层S1区细胞计数定量分析与对照组相比三种有机磷农药处理均未引起神经元数量明显改变;胶质细胞数量在DZN与CPF处理后发生下降,且均具有统计学意义,在ACP组则无明显改变。海马CA1区与CA3区细胞计数统计显示,经DZN和CPF处理后CA1、CA3区锥体细胞减少,ACP组则无明显改变;对海马区细胞体积密度的测定结果显示,DZN组和CPF组使CA1、CA3区体积密度出现程度不等的下降,ACP则无明显改变。通过有丝分裂平面角度的测量并统计发现对照组和农药组在VZ区表层细胞均以垂直分裂为主,倾斜分裂次之,水平分裂最少;DZN组和CPF组使水平分裂、倾斜分裂出现程度不等的增加,而使垂直分裂减少,ACP组无明显影响;DZN、CPF和ACP暴露后有丝分裂细胞数与细胞总数的比率无明显变化,比率值相对稳定。以上结果表明在妊娠早期分别暴露DZN、CPF对发育期脑组织造成细微损伤,并且使VZ区表层神经前体细胞的有丝分裂平面取向发生改变。

全文目录

摘要  4-6
ABSTRACT  6-10
主要缩略词一览表  10-11
第一章论文综述  11-19
  1.1 引言  11-12
  1.2 有机磷农药的一般毒性机制和神经发育毒性  12-16
    1.2.1 有机磷农药的一般毒性机制及三种农药的理化特性  12-14
    1.2.2 有机磷农药对神经行为的影响  14
    1.2.3 有机磷农药对脑细胞的发育毒性  14-16
      1.2.3.1 对脑神经元的影响  14-15
      1.2.3.2 对神经胶质细胞的影响  15-16
  1.3 有机磷农药神经发育毒性的分子机制  16-17
  1.4 研究背景与意义  17
  1.5 课题设计与创新点  17-19
第二章三种有机磷农药对新生鼠脑皮层S1 区的影响  19-30
  前言  19-20
  2.1 实验材料  20-22
    2.1.1 实验动物  20
    2.1.2 试剂及药品  20-21
    2.1.3 仪器设备  21-22
  2.2 实验方法  22-25
    2.2.1 实验动物的分组与给药  22
    2.2.2 常规石蜡包埋切片步骤  22-24
    2.2.3 尼氏染色（甲苯胺蓝染色）  24-25
    2.2.4 形态观察与计数  25
    2.2.5 统计学分析  25
  2.3 结果  25-27
    2.3.1 三种有机磷农药对皮层S1 区形态结构的影响  25-26
    2.3.2 三种有机磷农药对皮层S1 区细胞数量的影响  26-27
  2.4 讨论  27-30
第三章三种有机磷农药对新生鼠脑海马CA1、CA3 区的影响  30-40
  前言  30
  3.1 实验材料  30-31
    3.1.1 实验动物  30
    3.1.2 试剂及药品  30
    3.1.3 仪器设备  30-31
  3.2 实验方法  31-33
    3.2.1 实验动物的分组与给药  31
    3.2.2 常规石蜡包埋切片步骤  31
    3.2.3 尼氏染色（甲苯胺蓝染色）  31
    3.2.4 形态观察与计数  31-32
    3.2.5 体视学参数的测量方法  32
    3.2.6 统计学分析  32-33
  3.3 结果  33-38
    3.3.1 三种有机磷农药对CA1 区的影响  33-35
      3.3.1.1 对CA1 区形态结构的影响  33
      3.3.1.2 对CA1 区细胞数量的影响  33-34
      3.3.1.3 对CA1 区体积密度的影响  34-35
    3.3.2 三种有机磷农药对CA3 区的影响  35-38
      3.3.2.1 对CA3 区形态结构的影响  35-36
      3.3.2.2 对CA3 区细胞数量的影响  36-37
      3.3.2.3 对CA3 区体积密度的影响  37-38
  3.4 讨论  38-40
第四章三种有机磷农药对脑室区前体细胞有丝分裂平面取向的影响  40-53
  前言  40-41
  4.1 实验材料  41
    4.1.1 实验动物  41
    4.1.2 试剂及药品  41
    4.1.3 仪器设备  41
  4.2 实验方法  41-46
    4.2.1 实验动物的分组与给药  41-42
    4.2.2 常规石蜡包埋切片步骤  42-43
    4.2.3 苏木精-伊红染色（HE 染色）  43-44
    4.2.4 区域选择及有丝分裂平面角度的测量  44-45
    4.2.5 统计学分析  45-46
  4.3 结果  46-49
    4.3.1 三种有机磷农药对VZ 区细胞形态的影响  46
    4.3.2 三种有机磷农药对VZ 区有丝分裂平面取向的影响  46-48
    4.3.3 三种有机磷农药对VZ 区表层有丝分裂细胞总数的影响  48-49
  4.4 讨论  49-53
论文总结与展望  53-55
参考文献  55-63
附录  63-65
致谢  65-66
研究生阶段发表论文情况  66

三种有机磷农药胚胎期暴露对发育期脑细胞组织结构的影响

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