学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

大豆异黄酮对体外关节软骨细胞的影响

作　者: 黄武君
导　师: 白人骁
学　校: 天津医科大学
专　业: 外科
关键词: 大豆异黄酮 雌激素 植物雌激素 软骨细胞 关节软骨 骨性关节炎
分类号: R684.3
类　型: 硕士论文
年　份: 2007年
下　载: 74次
引　用: 2次
阅　读: 论文下载
 

内容摘要


目的：探讨不同浓度大豆异黄酮对体外培养软骨细胞的影响，进一步揭示大豆异黄酮在骨性关节炎关节软骨退变中的作用。方法：1、取3周龄、雌性幼兔三只，无菌条件下切取股骨头、股骨髁部关节软骨，分离软骨细胞进行培养传代，将第一代软骨细胞随机分成阳性对照组（17β-E2组，E2组）、阴性对照组（溶媒对照组）、10-5mol／L～10-10mol／L SI组，共8组，分别以每孔2×103个软骨细胞接种于96孔板，每组平行4孔；以每孔1×104个软骨细胞接种于24孔，每组平行3孔，每孔底部预先放入无菌5mm×5mm盖玻片。48h细胞贴壁后予以不同浓度药物干预，隔天换药一次，每天取一块96孔板进行MTT测定，连续测定8天；药物干预一周后取出24孔板内盖玻片分别行雌激素β受体免疫组织化学染色、甲苯胺蓝染色和瑞氏染色。2、取第一代软骨细胞随机分成A、B两组，B组先用IL-β1干预，每组又分成E2组、溶媒对照组、10-5mol／L～1010mol／L SI组，共8个亚组，以每孔2×105个细胞接种于6孔培养板中，每亚组平行2孔，48h后，A组予以不同浓度药物干预5天，B组先以10ng／ml IL-β1干预24h后予以不同浓度药物干预5天，隔天换药一次。提取培养软骨细胞总RNA，RT-PCR检测Ⅰ型胶原、Ⅱ型胶原、biglycan、TGF-β1、IGF-1 mRNA表达情况。结果：1、MTT结果显示：各组24小时内作用无明显差异（p＞0.05）；10-5mol／L SI组从24小时后测得的OD值与溶媒对照组和E2组的OD值有显著性差别（p＜0.05）。10-6mol／L、1010mol／L SI组的OD值与与溶媒对照组的OD值无明显差别，从24小时后测得的OD值与17β-E2组的OD值有显著性差别（p＜0.05）。10-7mol／L、10-8mol／L、10-9mol／L SI组从48小时后测得的OD值与溶媒对照组的OD值有显著性差别（p＜0.05）。雌激素β受体免疫组化显示未滴加一抗的爬片无棕黄色颗粒，其余各组均有雌激素β受体表达，阳性在体外培养的软骨细胞中有棕黄色深染颗粒存在于细胞浆和（或）细胞核内。甲苯胺蓝染色显示胞浆中有不同程度的紫红色颗粒，体外培养的软骨细胞中蛋白多糖存在。2、SI对软骨细胞mRNA表达的影响：正常关节软骨细胞均有biglyoan、Ⅱ型胶原、TGF-β1mRNA表达，10-7mol／L、10-8mol／L、10-9mol／L SI能刺激正常关节软骨细胞mRNA表达，而10-5mol／L SI则起抑制作用；IL—1β抑制软骨细胞biglycan、Ⅱ型胶原、TGF-β1 mRNA的表达，10-5mol／L SI能协同IL—1β起抑制作用，10-7mol／L、10-8mol／L SI能部分对抗IL—1β的抑制作用。10-5mol／L、10-6mol／L、10-7mol／L SI能刺激正常关节软骨细胞表达Ⅰ型胶原mRNA表达，变性老化的软骨细胞都有Ⅰ型胶原mRNA表达，其中10-8mol／L、10-9mol／L SI能部分对抗IL-1β的作用。10-7mol／L、10-8mol／L、10-9mol／L SI能诱导关节软骨细胞表达IGF-1 mRNA。10-7mol／L、10-8mol／L SI能诱导变性关节软骨细胞表达IGF-1 mRNA。结论：1、不同浓度SI对软骨细胞增殖的作用表现出双重作用，10-5mol／L的SI抑制软骨细胞的增殖；而10-7mol／L、10-8mol／L、10-9mol／L的SI促进软骨细胞的增殖，且随着浓度的增加作用增加。2、不同浓度SI对软骨细胞胶原、蛋白多糖、IGF-1、TGF-β1 mRNA表达的作用不同。3、体外关节软骨细胞存在雌激素受体，SI对软骨细胞的作用与雌激素有相似性，提示SI可能通过雌激素受体发挥作用。4、SI可促进软骨细胞的增殖，对胶原、蛋白多糖等的作用强于雌激素，为将SI用于OA的临床防治提供了一定的药理和药效学依据。5、SI和雌激素不同作用提示：（1）SI作用于雌激素α、β受体的比率可能与雌激素不同；（2）SI对软骨细胞的作用有与雌激素不同的作用途径。

全文目录


中文摘要  4-6
ABSTRACT  6-10
符号说明  10-11
前言  11-13
第一部分 大豆异黄酮外对关节软骨细胞增殖及雌激素β受体表达的影响  13-28
  材料和方法  13-18
  实验结果  18-24
  讨论  24-28
第二部分 SI对软骨细胞相关mRNA表达的影响  28-45
  材料和方法  28-33
  实验结果  33-41
  讨论  41-45
结论  45-46
参考文献  46-53
综述  53-64
致谢  64

相似论文

  1. 牛蒡子苷提取、纯化及其对小鼠C2C12细胞生长的影响,S853.7
  2. 大豆异黄酮浸种对栽培大豆和滩涂野大豆亲本及其杂交后代幼苗盐害的缓解效应及其机理,S565.1
  3. 雌激素及chOPG对鸡胚BMSCs诱导的成骨细胞增殖、凋亡、细胞周期以及BGP与ColⅠmRNA表达的影响,S858.31
  4. 脱氧雪腐镰刀菌烯醇对鸡软骨细胞增殖、分化及凋亡的影响,S858.31
  5. 茶黄素与TGF-β3对兔骨髓间充质干细胞向软骨细胞增殖和诱导分化地影响,R329
  6. 大豆胚芽异黄酮的乳酸菌转化及其咀嚼片的研制,TS214.2
  7. 小鼠雌激素受体α重组腺病毒感染神经细胞及小鼠中枢神经系统的鉴定,R363
  8. 牛膝总皂甙对兔早期骨关节炎及PI3K/AKT通路的影响,R285.5
  9. 应用脂肪干细胞与丝素蛋白和壳聚糖支架材料共同构建细胞—支架复合物的实验研究,R329
  10. 乳腺癌超声弹性成像与ER、PR及C-erbB-2表达的相关性研究,R445.1
  11. MR延迟增强扫描对正常膝关节软骨及其Ⅰ、Ⅱ期病变的应用研究,R445.2
  12. 雌激素与H.pylori对人十二指肠粘膜碳酸氢盐转运蛋白的影响,R573.1
  13. 大豆异黄酮对去势大鼠骨质疏松症预防效果的实验研究,R580
  14. 复合自体骨髓基质干细胞（BMSCs）的关节软骨细胞外基质（ACECM）取向支架修复羊膝关节全层软骨缺损的实验研究,R687.4
  15. 雌激素对人胚髁突软骨细胞增殖与分化的影响,R782.6
  16. 大豆异黄酮摄入与乳腺癌及前列腺癌发生风险的Meta分析,R737.25
  17. 外源性透明质酸对兔骨髓间充质干细胞定向分化为软骨细胞的影响,R329
  18. 创伤对成年及幼年羊关节软骨基因表达谱影响的研究,S826
  19. 不同浓度医用臭氧治疗膝骨性关节炎的临床研究,R684.3
  20. 邻苯二甲酸丁苄酯对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞类雌激素样作用的影响,R739.4
  21. 雌激素受体多态性与大肠癌发病风险的相关性研究,R735.34

中图分类: > 医药、卫生 > 外科学 > 骨科学（运动系疾病、矫形外科学） > 关节疾病及损伤 > 关节炎
© 2012 www.xueweilunwen.com