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肝细胞癌变过程中磷脂酰肌醇蛋白多糖-3动态表达及其临床价值的研究

作　者: 张崇国
导　师: 姚登福
学　校: 南通大学
专　业: 肿瘤学
关键词: 肝癌磷脂酰肌醇蛋白多糖-3 逆转录-聚合酶链反应免疫组化表达
分类号: R735.7
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要

【目的】肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma , HCC)预后极差,延长患者生存期的关键是早期(小肝癌)诊断和早期(手术)治疗。HCC通过肝癌标记和影像检查建立诊断。甲胎蛋白(α-fetoprotein , AFP)是主要肝癌标记,但有假阳性和假阴性; AFP异质体(AFP-L3)、AFP基因标志(AFPmRNA)以及GGT-Ⅱ、PIVKAⅡ、AFU等其他肝癌标记可与AFP互补诊断,尤其对AFP假阴性肝癌和小肝癌的诊断甚有帮助。磷脂酰肌醇蛋白多糖-3(glypican-3, GPC-3)在细胞的生长发育中起着重要的调控作用,与肝癌密切相关。本研究建立大鼠肝癌模型探讨了GPC-3mRNA在肝细胞癌变过程中的表达、动态变化规律及对肝癌的早期诊断价值;并分析了人肝癌不同组织细胞中GPC-3的表达、胞内分布特点及其与临床病理学特征。【方法】以2-乙酰氨基芴(2-fluorenyl acetamide, 2-FAA)喂饲Sprague-Dawley大鼠诱发肝癌发生,HE染色组织学检测,组织提取总RNA,以巢式逆转录聚合酶链反应扩增GPC3基因片段,探讨在肝癌形成过程中GPC-3mRNA表达及其早期诊断价值。以自身配对法分别收集经手术切除患者的肝癌及其癌旁、远癌组织各36份,以免疫组化染色法检测癌灶、癌旁及远癌组织GPC-3表达及胞内分布状况,分析其与病理学特征关系。【结果】肝细胞在癌变过程中,在形态学上呈肝细胞变性、癌前病变到肝癌形成三个发展阶段;肝组织总RNA表达水平呈动态梯度表达,表现为癌变组>癌前组>变性组>对照组;肝组织GPC-3mRNA扩增阳性率在癌前组和癌变组均为100%,在肝细胞变性组为83.3%,正常对照组未见阳性;肝组织GPC-3mRNA阳性表达率与肝总RNA水平两者呈明显的正相关关系(P < 0.001)。GPC-3阳性表达物呈棕黄色颗粒状染色,癌组织中GPC-3点灶状表达,定位于胞浆和细胞膜;而癌旁组织GPC-3阳性表达主要定位于胞浆,远癌组织未见表达。癌灶、癌旁组织中GPC-3表达强度及阳性率明显高于远癌组织,癌组织表达阳性率为80.6%,癌旁组织为41.7%,远癌组织未见表达,癌组织、癌旁与远癌组织之间比较差异显著(P < 0.001),肝癌组织中GPC-3的表达强度与分化程度、肿瘤数目、肿瘤大小、HBsAg等无关。【结论】GPC-3参与肝细胞的癌变过程,GPC-3mRNA过度表达有助于肝癌的早期诊断。肝癌组织中GPC-3过表达,与肝癌的发生、发展密切相关。

全文目录

英文缩略词表(Abbreviation)  6-8
中文摘要(Abstract in Chinese)  8-10
英文摘要(Abstract in English)  10-12
前言（Introduction）  12-14
材料和方法（Materials and Methods）  14-18
结果（Results）  18-23
讨论(Discussion)  23-27
结论(Conclusions)  27-28
参考文献(References)  28-33
综述(Review)  33-41
综述参考文献(Review References)  41-45
致谢(Acknowledgements)  45-46
研究生期间发表论文与参与的研究项目  46-47

肝细胞癌变过程中磷脂酰肌醇蛋白多糖-3动态表达及其临床价值的研究

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