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胞内DNA感受器DAI在慢性鼻—鼻窦炎及鼻息肉发病机制中作用的研究

作　者: 胡双
导　师: 游学俊；崔永华
学　校: 华中科技大学
专　业: 耳鼻咽喉—头颈外科学
关键词: 慢性鼻-鼻窦炎鼻息肉 DNA依赖的干扰素调节因子激活物双链DNA BEAS-2B细胞系体外培养 I型干扰素促炎因子抗炎因子负反馈调节
分类号: R765
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

第一部分胞内DNA感受器DAI在慢性鼻-鼻窦炎和鼻息肉组织中的表达目的研究DNA依赖的干扰素调节因子激活物(DNA-dependent activator of IFN-regulatory factors,DAI) mRNA以及蛋白在慢性鼻-鼻窦炎、鼻息肉和正常下鼻甲鼻黏膜组织的表达及表达程度的差异,探讨其在慢性鼻-鼻窦炎、和鼻息肉发病机制中的作用。方法RT-PCR检测DAI在人类支气管上皮细胞系BEAS-2B细胞及慢性鼻-鼻窦炎、鼻息肉和正常下鼻甲鼻黏膜组织的表达。real time RT-PCR技术和免疫组织化学法(IHC)分别检测慢性鼻-鼻窦炎、鼻息肉和下鼻甲黏膜组织中DAI的表达水平。结果DAI mRNA及蛋白在BEAS-2B细胞、慢性鼻-鼻窦炎、慢性鼻-鼻窦炎合并鼻息肉和下鼻甲组织中均有表达,real-time RT-PCR及免疫组化显示慢性鼻-鼻窦炎和鼻息肉组织DAI的表达水平明显低于下鼻甲组织,而以慢性鼻-鼻窦炎组织中下降更为明显。结论DAI mRNA及蛋白在慢性鼻-鼻窦炎、鼻息肉和正常下鼻甲黏膜上皮细胞内均有表达,且表达量不同,差异有统计学意义,提示DAI可能在慢性鼻-鼻窦炎的发病机制中起重要作用。第二部分双链DNA对BEAS-2B细胞及体外培养的鼻粘膜组织块的影响目的1观察双链DNA分子poly(dA-dT).poly(dT-dA)是否能够诱导BEAS-2B细胞产生I型干扰素及DAI。2了解dsDNA刺激BEAS-2B细胞后所产生各细胞因子的影响,探讨其相互作用。3使用鼻粘膜组织块体外培养研究dsDNA对鼻粘膜组织中相关细胞因子的影响,探讨DNA受体DAI分子在慢性鼻-鼻窦炎、鼻息肉急性复发中的作用。方法1 poly(dA-dT).poly(dT-dA)转染BEAS-2B细胞,real time RT-PCR检测相关细胞因子的表达水平,western blot检测DAI的表达。2 dsDNA转染体外培养的鼻粘膜组织块,real time RT-PCR检测相关细胞因子的表达水平。结果1 poly(dA-dT).poly(dT-dA)能够诱导BEAS-2B细胞产生I型干扰素IFN-β,且具有时间与剂量依赖性。dsDNA刺激BEAS-2B细胞后产生的应答中,早期主要表现为促炎因子的升高,后期则以抗炎因子的高表达为主,且dsDNA对抗炎因子的诱导更为明显。2 dsDNA刺激体外培养的鼻粘膜组织块后,表现为IL-6、IL-8、IP-10、IL-1β及MCP-3的高表达主要出现在NP中;TNF-α、IL-17、IL-22及IFN-λ2的高表达主要出现CRS中;而正常下鼻甲粘膜却对dsDNA的反应性较低。结论用dsDNA刺激BEAS-2B细胞后,机体通过自身负反馈调节,最终表现以抗炎作用为主,对机体起保护性作用。在病原微生物刺激后,慢性鼻-鼻窦炎、鼻息肉比正常下鼻甲粘膜组织可能更容易受到影响,导致慢性鼻-鼻窦炎及鼻息肉的急性发作。而上述这些作用,可能正是通过dsDNA的受体DAI发挥作用的。

全文目录

英文缩略词表  5-7
中文摘要  7-10
英文摘要  10-13
前言  13-17
第一部分胞内DNA感受器DAI在慢性鼻-鼻窦炎和鼻息肉组织中的表达  17-28
  材料和方法  17-23
  结果  23-24
  讨论  24-26
  参考文献  26-28
第二部分双链DNA对BEAS-28细胞及体外培养的鼻粘膜组织块的影响  28-45
  材料和方法  28-38
  结果  38-41
  讨论  41-43
  参考文献  43-45
综述胞内模式识别受体对核酸的识别  45-54
  参考文献  50-54
致谢  54

胞内DNA感受器DAI在慢性鼻—鼻窦炎及鼻息肉发病机制中作用的研究

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